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基本情報
| 登録情報 | データベース: PDB / ID: 8k0g | |||||||||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| タイトル | Cryo-EM structure of human 26S RP (Ed state) bound to K11/K48-branched ubiquitin (Ub) chain composed of four Ub. | |||||||||||||||
要素 |
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キーワード | CYTOSOLIC PROTEIN / protein degradation / macromolecular complex / ubiquitin-proteasome system | |||||||||||||||
| 機能・相同性 | 機能・相同性情報SCF ubiquitin ligase complex binding / Impaired BRCA2 translocation to the nucleus / Impaired BRCA2 binding to SEM1 (DSS1) / thyrotropin-releasing hormone receptor binding / nuclear proteasome complex / host-mediated perturbation of viral transcription / positive regulation of inclusion body assembly / 加水分解酵素; プロテアーゼ; ペプチド結合加水分解酵素; オメガペプチターゼ / integrator complex / proteasome accessory complex ...SCF ubiquitin ligase complex binding / Impaired BRCA2 translocation to the nucleus / Impaired BRCA2 binding to SEM1 (DSS1) / thyrotropin-releasing hormone receptor binding / nuclear proteasome complex / host-mediated perturbation of viral transcription / positive regulation of inclusion body assembly / 加水分解酵素; プロテアーゼ; ペプチド結合加水分解酵素; オメガペプチターゼ / integrator complex / proteasome accessory complex / meiosis I / cyclin-dependent protein serine/threonine kinase inhibitor activity / purine ribonucleoside triphosphate binding / proteasome regulatory particle / cytosolic proteasome complex / positive regulation of proteasomal protein catabolic process / proteasome-activating activity / proteasome regulatory particle, lid subcomplex / proteasome regulatory particle, base subcomplex / hypothalamus gonadotrophin-releasing hormone neuron development / protein K63-linked deubiquitination / female meiosis I / negative regulation of programmed cell death / metal-dependent deubiquitinase activity / positive regulation of protein monoubiquitination / Regulation of ornithine decarboxylase (ODC) / Proteasome assembly / Cross-presentation of soluble exogenous antigens (endosomes) / fat pad development / mitochondrion transport along microtubule / proteasome core complex / Homologous DNA Pairing and Strand Exchange / Defective homologous recombination repair (HRR) due to BRCA1 loss of function / Defective HDR through Homologous Recombination Repair (HRR) due to PALB2 loss of BRCA1 binding function / Defective HDR through Homologous Recombination Repair (HRR) due to PALB2 loss of BRCA2/RAD51/RAD51C binding function / Resolution of D-loop Structures through Synthesis-Dependent Strand Annealing (SDSA) / Somitogenesis / Resolution of D-loop Structures through Holliday Junction Intermediates / K63-linked deubiquitinase activity / negative regulation of macroautophagy / female gonad development / Impaired BRCA2 binding to RAD51 / seminiferous tubule development / proteasome binding / transcription factor binding / regulation of protein catabolic process / myofibril / male meiosis I / proteasome storage granule / Presynaptic phase of homologous DNA pairing and strand exchange / positive regulation of intrinsic apoptotic signaling pathway by p53 class mediator / general transcription initiation factor binding / blastocyst development / polyubiquitin modification-dependent protein binding / positive regulation of RNA polymerase II transcription preinitiation complex assembly / protein deubiquitination / immune system process / NF-kappaB binding / endopeptidase activator activity / proteasome assembly / mRNA export from nucleus / proteasome core complex, alpha-subunit complex / energy homeostasis / SARS-CoV-1 targets host intracellular signalling and regulatory pathways / regulation of neuron apoptotic process / neuron projection morphogenesis / enzyme regulator activity / regulation of proteasomal protein catabolic process / ERAD pathway / Maturation of protein E / Maturation of protein E / inclusion body / ER Quality Control Compartment (ERQC) / Myoclonic epilepsy of Lafora / FLT3 signaling by CBL mutants / IRAK2 mediated activation of TAK1 complex / Prevention of phagosomal-lysosomal fusion / Alpha-protein kinase 1 signaling pathway / Glycogen synthesis / IRAK1 recruits IKK complex / IRAK1 recruits IKK complex upon TLR7/8 or 9 stimulation / Endosomal Sorting Complex Required For Transport (ESCRT) / Membrane binding and targetting of GAG proteins / Negative regulation of FLT3 / Regulation of TBK1, IKKε (IKBKE)-mediated activation of IRF3, IRF7 / PTK6 Regulates RTKs and Their Effectors AKT1 and DOK1 / Regulation of TBK1, IKKε-mediated activation of IRF3, IRF7 upon TLR3 ligation / Constitutive Signaling by NOTCH1 HD Domain Mutants / IRAK2 mediated activation of TAK1 complex upon TLR7/8 or 9 stimulation / NOTCH2 Activation and Transmission of Signal to the Nucleus / TICAM1,TRAF6-dependent induction of TAK1 complex / TICAM1-dependent activation of IRF3/IRF7 / APC/C:Cdc20 mediated degradation of Cyclin B / Downregulation of ERBB4 signaling / Regulation of FZD by ubiquitination / APC-Cdc20 mediated degradation of Nek2A / p75NTR recruits signalling complexes / InlA-mediated entry of Listeria monocytogenes into host cells / TRAF6 mediated IRF7 activation in TLR7/8 or 9 signaling / TRAF6-mediated induction of TAK1 complex within TLR4 complex 類似検索 - 分子機能 | |||||||||||||||
| 生物種 | Homo sapiens (ヒト)![]() | |||||||||||||||
| 手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.8 Å | |||||||||||||||
データ登録者 | Hsu, S.T.D. / Draczkowski, P. / Wang, Y.S. | |||||||||||||||
| 資金援助 | 台湾, 4件
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引用 | ジャーナル: Nat Commun / 年: 2025タイトル: Structural basis of K11/K48-branched ubiquitin chain recognition by the human 26S proteasome. 著者: Piotr Draczkowski / Szu-Ni Chen / Ting Chen / Yong-Sheng Wang / Hsin-An Shih / Jessica Y C Huang / Ming-Chieh Tsai / Shu-Yu Lin / Steven Lin / Rosa Viner / Yuan-Chih Chang / Kuen-Phon Wu / Shang-Te Danny Hsu / ![]() 要旨: Beyond the canonical K48-linked homotypic polyubiquitination for proteasome-targeted proteolysis, K11/K48-branched ubiquitin (Ub) chains are involved in fast-tracking protein turnover during cell ...Beyond the canonical K48-linked homotypic polyubiquitination for proteasome-targeted proteolysis, K11/K48-branched ubiquitin (Ub) chains are involved in fast-tracking protein turnover during cell cycle progression and proteotoxic stress. Here, we report cryo-EM structures of human 26S proteasome in a complex with a K11/K48-branched Ub chain. The structures revealed a multivalent substrate recognition mechanism involving a hitherto unknown K11-linked Ub binding site at the groove formed by RPN2 and RPN10 in addition to the canonical K48-linkage binding site formed by RPN10 and RPT4/5 coiled-coil. Additionally, RPN2 recognizes an alternating K11-K48-linkage through a conserved motif similar to the K48-specific T1 binding site of RPN1. The insights gleaned from these structures explain the molecular mechanism underlying the recognition of the K11/K48-branched Ub as a priority signal in the ubiquitin-mediated proteasomal degradation. | |||||||||||||||
| 履歴 |
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構造の表示
| 構造ビューア | 分子: Molmil Jmol/JSmol |
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ダウンロードとリンク
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| PDBx/mmCIF形式 | 8k0g.cif.gz | 1.6 MB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
|---|---|---|---|---|
| PDB形式 | pdb8k0g.ent.gz | 1.2 MB | 表示 | PDB形式 |
| PDBx/mmJSON形式 | 8k0g.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
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-検証レポート
| 文書・要旨 | 8k0g_validation.pdf.gz | 1.5 MB | 表示 | wwPDB検証レポート |
|---|---|---|---|---|
| 文書・詳細版 | 8k0g_full_validation.pdf.gz | 1.7 MB | 表示 | |
| XML形式データ | 8k0g_validation.xml.gz | 233.2 KB | 表示 | |
| CIF形式データ | 8k0g_validation.cif.gz | 366.3 KB | 表示 | |
| アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/k0/8k0g ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/k0/8k0g | HTTPS FTP |
-関連構造データ
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リンク
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集合体
| 登録構造単位 | ![]()
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| 1 |
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要素
-26S protease regulatory subunit ... , 6種, 6分子 ABDFCE
| #1: タンパク質 | 分子量: 48700.805 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: PSMC2, MSS1 / 細胞株 (発現宿主): HEK293 / 器官 (発現宿主): KIDNEY / 発現宿主: Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P35998 |
|---|---|
| #2: タンパク質 | 分子量: 49260.504 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: PSMC1 / 細胞株 (発現宿主): HEK293 / 器官 (発現宿主): KIDNEY / 発現宿主: Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P62191 |
| #3: タンパク質 | 分子量: 47426.141 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: PSMC4, MIP224, TBP7 / 細胞株 (発現宿主): HEK293 / 器官 (発現宿主): KIDNEY / 発現宿主: Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P43686 |
| #4: タンパク質 | 分子量: 49266.457 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: PSMC3, TBP1 / 細胞株 (発現宿主): HEK293 / 器官 (発現宿主): KIDNEY / 発現宿主: Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P17980 |
| #5: タンパク質 | 分子量: 45694.047 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: PSMC5, SUG1 / 細胞株 (発現宿主): HEK293 / 器官 (発現宿主): KIDNEY / 発現宿主: Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P62195 |
| #21: タンパク質 | 分子量: 44241.008 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: PSMC6, SUG2 / 細胞株 (発現宿主): HEK293 / 器官 (発現宿主): KIDNEY / 発現宿主: Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P62333 |
-Proteasome subunit alpha type- ... , 7種, 7分子 GHIJKLM
| #6: タンパク質 | 分子量: 27432.459 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: PSMA6, PROS27 / 細胞株 (発現宿主): HEK293 / 器官 (発現宿主): KIDNEY / 発現宿主: Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P60900, proteasome endopeptidase complex |
|---|---|
| #7: タンパク質 | 分子量: 25927.535 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: PSMA2, HC3, PSC3 / 細胞株 (発現宿主): HEK293 / 器官 (発現宿主): KIDNEY / 発現宿主: Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P25787, proteasome endopeptidase complex |
| #8: タンパク質 | 分子量: 29525.842 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: PSMA4, HC9, PSC9 / 細胞株 (発現宿主): HEK293 / 器官 (発現宿主): KIDNEY / 発現宿主: Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P25789, proteasome endopeptidase complex |
| #9: タンパク質 | 分子量: 27929.891 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: PSMA7, HSPC / 細胞株 (発現宿主): HEK293 / 器官 (発現宿主): KIDNEY / 発現宿主: Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: O14818, proteasome endopeptidase complex |
| #10: タンパク質 | 分子量: 26435.977 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: PSMA5 / 細胞株 (発現宿主): HEK293 / 器官 (発現宿主): KIDNEY / 発現宿主: Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P28066, proteasome endopeptidase complex |
| #11: タンパク質 | 分子量: 29595.627 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: PSMA1, HC2, NU, PROS30, PSC2 / 細胞株 (発現宿主): HEK293 / 器官 (発現宿主): KIDNEY / 発現宿主: Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P25786, proteasome endopeptidase complex |
| #12: タンパク質 | 分子量: 28469.252 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: PSMA3, HC8, PSC8 / 細胞株 (発現宿主): HEK293 / 器官 (発現宿主): KIDNEY / 発現宿主: Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P25788 |
-26S proteasome non-ATPase regulatory subunit ... , 11種, 11分子 VWXYdfUZabc
| #13: タンパク質 | 分子量: 61066.500 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: PSMD3 / 細胞株 (発現宿主): HEK293 / 器官 (発現宿主): KIDNEY / 発現宿主: Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: O43242 |
|---|---|
| #14: タンパク質 | 分子量: 52979.359 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: PSMD12 / 細胞株 (発現宿主): HEK293 / 器官 (発現宿主): KIDNEY / 発現宿主: Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: O00232 |
| #15: タンパク質 | 分子量: 47526.688 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: PSMD11 / 細胞株 (発現宿主): HEK293 / 器官 (発現宿主): KIDNEY / 発現宿主: Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: O00231 |
| #16: タンパク質 | 分子量: 45592.285 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: PSMD6, KIAA0107, PFAAP4 / 細胞株 (発現宿主): HEK293 / 器官 (発現宿主): KIDNEY / 発現宿主: Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q15008 |
| #17: タンパク質 | 分子量: 39667.871 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: PSMD8 / 細胞株 (発現宿主): HEK293 / 器官 (発現宿主): KIDNEY / 発現宿主: Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P48556 |
| #19: タンパク質 | 分子量: 100313.625 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: PSMD2, TRAP2 / 細胞株 (発現宿主): HEK293 / 器官 (発現宿主): KIDNEY / 発現宿主: Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q13200 |
| #22: タンパク質 | 分子量: 105958.234 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: PSMD1 / 細胞株 (発現宿主): HEK293 / 器官 (発現宿主): KIDNEY / 発現宿主: Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q99460 |
| #23: タンパク質 | 分子量: 37086.441 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: PSMD7, MOV34L / 細胞株 (発現宿主): HEK293 / 器官 (発現宿主): KIDNEY / 発現宿主: Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P51665 |
| #24: タンパク質 | 分子量: 42995.359 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: PSMD13 / 細胞株 (発現宿主): HEK293 / 器官 (発現宿主): KIDNEY / 発現宿主: Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q9UNM6 |
| #25: タンパク質 | 分子量: 40781.590 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: PSMD4, MCB1 / 細胞株 (発現宿主): HEK293 / 器官 (発現宿主): KIDNEY / 発現宿主: Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P55036 |
| #26: タンパク質 | 分子量: 34620.023 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: PSMD14, POH1 / 細胞株 (発現宿主): HEK293 / 器官 (発現宿主): KIDNEY / 発現宿主: Homo sapiens (ヒト)参照: UniProt: O00487, 加水分解酵素; プロテアーゼ; ペプチド結合加水分解酵素; オメガペプチターゼ |
-タンパク質 , 3種, 6分子 eyuvwx
| #18: タンパク質 | 分子量: 8284.611 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: SHFM1, DSS1, SHFDG1 / 細胞株 (発現宿主): HEK293 / 器官 (発現宿主): KIDNEY / 発現宿主: Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P60896 |
|---|---|
| #20: タンパク質 | 分子量: 7249.966 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) ![]() 遺伝子: SIC1, SDB25, YLR079W, L9449.8 / 発現宿主: ![]() |
| #27: タンパク質 | 分子量: 8950.154 Da / 分子数: 4 / Mutation: K63R / 由来タイプ: 組換発現 詳細: GSGGS linker sequence remaining at C-terminus after TEV cleavage 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: UBB / 発現宿主: ![]() |
-非ポリマー , 3種, 9分子 




| #28: 化合物 | | #29: 化合物 | ChemComp-MG / #30: 化合物 | |
|---|
-詳細
| 研究の焦点であるリガンドがあるか | Y |
|---|---|
| Has protein modification | Y |
-実験情報
-実験
| 実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
|---|---|
| EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
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試料調製
| 構成要素 |
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| 分子量 | 値: 2.5 MDa / 実験値: NO | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 由来(天然) |
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| 由来(組換発現) |
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| 緩衝液 | pH: 7.6 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 緩衝液成分 |
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| 試料 | 濃度: 1 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES 詳細: The complex was additionally supplemented with an excess of preformed and SEC-purified RPN13:UCHL5 complex. | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 試料支持 | 詳細: 20 mA / グリッドの材料: COPPER / グリッドのサイズ: 300 divisions/in. / グリッドのタイプ: Quantifoil R1.2/1.3 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 急速凍結 | 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 100 % / 凍結前の試料温度: 277.15 K / 詳細: incubation time= 3 s blotting time= 2.5 s |
-
電子顕微鏡撮影
| 実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
|---|---|
| 顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
| 電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
| 電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 倍率(公称値): 70000 X / 最大 デフォーカス(公称値): 1800 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 1200 nm / アライメント法: COMA FREE |
| 試料ホルダ | 凍結剤: NITROGEN 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER |
| 撮影 | 平均露光時間: 1.8 sec. / 電子線照射量: 49 e/Å2 / フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) / 撮影したグリッド数: 3 / 実像数: 15242 |
| 電子光学装置 | エネルギーフィルタースリット幅: 20 eV |
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解析
| EMソフトウェア |
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|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 粒子像の選択 | 選択した粒子像数: 2695911 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 対称性 | 点対称性: C1 (非対称) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 3次元再構成 | 解像度: 3.8 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 84476 / アルゴリズム: FOURIER SPACE 詳細: Performed in cryoSPARC using Non-uniform Refinement job type. Some parts of the map were then improved by using focused local refinement. クラス平均像の数: 2 / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 原子モデル構築 | B value: 107.54 / プロトコル: OTHER / 空間: REAL / Target criteria: 0.83 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 原子モデル構築 | PDB-ID: 6MSK Accession code: 6MSK / Source name: PDB / タイプ: experimental model | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 精密化 | 交差検証法: NONE 立体化学のターゲット値: GeoStd + Monomer Library + CDL v1.2 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 原子変位パラメータ | Biso mean: 107.44 Å2 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 拘束条件 |
|
ムービー
コントローラー
万見について




Homo sapiens (ヒト)

台湾, 4件
引用




















PDBj


























FIELD EMISSION GUN
