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- PDB-8cxo: Cryo-EM structure of the unliganded mSMO-PGS2 in a lipidic environment -

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基本情報

登録情報
データベース: PDB / ID: 8cxo
タイトルCryo-EM structure of the unliganded mSMO-PGS2 in a lipidic environment
要素Smoothened homolog, GlgA glycogen synthase chimera
キーワードMEMBRANE PROTEIN / G-protein coupled receptor / Smoothened / unliganded state / lipid system
機能・相同性
機能・相同性情報


regulation of localization / BBSome-mediated cargo-targeting to cilium / ventral midline determination / mesenchymal to epithelial transition involved in metanephric renal vesicle formation / response to inositol / Activation of SMO / regulation of heart morphogenesis / contact inhibition / negative regulation of hair follicle development / 9+0 non-motile cilium ...regulation of localization / BBSome-mediated cargo-targeting to cilium / ventral midline determination / mesenchymal to epithelial transition involved in metanephric renal vesicle formation / response to inositol / Activation of SMO / regulation of heart morphogenesis / contact inhibition / negative regulation of hair follicle development / 9+0 non-motile cilium / pancreas morphogenesis / regulation of somatic stem cell population maintenance / epithelial-mesenchymal cell signaling / myoblast migration / atrial septum morphogenesis / Hedgehog 'on' state / spinal cord dorsal/ventral patterning / determination of left/right asymmetry in lateral mesoderm / cell development / alpha-1,4-glucan glucosyltransferase (UDP-glucose donor) activity / left/right axis specification / Hedgehog 'off' state / patched binding / forebrain morphogenesis / type B pancreatic cell development / somite development / positive regulation of organ growth / dorsal/ventral neural tube patterning / smooth muscle tissue development / cerebellar cortex morphogenesis / positive regulation of branching involved in ureteric bud morphogenesis / cellular response to cholesterol / pattern specification process / mammary gland epithelial cell differentiation / dentate gyrus development / dopaminergic neuron differentiation / oxysterol binding / thalamus development / central nervous system neuron differentiation / positive regulation of multicellular organism growth / positive regulation of smoothened signaling pathway / dorsal/ventral pattern formation / digestive tract development / determination of left/right symmetry / cell fate specification / cAMP-dependent protein kinase inhibitor activity / neural crest cell migration / negative regulation of DNA binding / anterior/posterior pattern specification / positive regulation of mesenchymal cell proliferation / ciliary membrane / hair follicle morphogenesis / midgut development / smoothened signaling pathway / negative regulation of epithelial cell differentiation / positive regulation of neuroblast proliferation / heart looping / protein kinase A catalytic subunit binding / endoplasmic reticulum-Golgi intermediate compartment / odontogenesis of dentin-containing tooth / negative regulation of protein phosphorylation / developmental growth / neuroblast proliferation / hair follicle development / protein localization to nucleus / embryonic organ development / heart morphogenesis / vasculogenesis / skeletal muscle fiber development / epithelial cell differentiation / centriole / homeostasis of number of cells within a tissue / ossification / protein sequestering activity / positive regulation of epithelial cell proliferation / central nervous system development / epithelial cell proliferation / astrocyte activation / G protein-coupled receptor activity / cerebral cortex development / caveola / positive regulation of protein import into nucleus / multicellular organism growth / endocytic vesicle membrane / protein import into nucleus / osteoblast differentiation / late endosome / regulation of gene expression / in utero embryonic development / gene expression / cell population proliferation / protein stabilization / cilium / positive regulation of cell migration / negative regulation of gene expression / negative regulation of DNA-templated transcription / apoptotic process / positive regulation of cell population proliferation / positive regulation of gene expression / negative regulation of apoptotic process
類似検索 - 分子機能
Smoothened, transmembrane domain / Smoothened, cysteine-rich domain / Glycosyl transferases group 1 / Bacterial/plant glycogen synthase / Starch synthase, catalytic domain / Starch synthase catalytic domain / Frizzled/Smoothened, transmembrane domain / Frizzled/Smoothened family membrane region / Frizzled/Smoothened family membrane region / Frizzled/secreted frizzled-related protein ...Smoothened, transmembrane domain / Smoothened, cysteine-rich domain / Glycosyl transferases group 1 / Bacterial/plant glycogen synthase / Starch synthase, catalytic domain / Starch synthase catalytic domain / Frizzled/Smoothened, transmembrane domain / Frizzled/Smoothened family membrane region / Frizzled/Smoothened family membrane region / Frizzled/secreted frizzled-related protein / Frizzled / Frizzled domain / Frizzled cysteine-rich domain superfamily / Fz domain / Frizzled (fz) domain profile. / GPCR, family 2-like / G-protein coupled receptors family 2 profile 2.
類似検索 - ドメイン・相同性
CHOLESTEROL / Protein smoothened / Glycogen synthase
類似検索 - 構成要素
生物種Mus musculus (ハツカネズミ)
Pyrococcus abyssi (古細菌)
手法電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.7 Å
データ登録者Zhang, K. / Wu, H. / Hoppe, N. / Manglik, A. / Cheng, Y.
資金援助 フランス, 米国, 3件
組織認可番号国
Human Frontier Science Program (HFSP)LT000471/2017-L フランス
National Institutes of Health/National Institute of General Medical Sciences (NIH/NIGMS)GM140847 米国
National Institutes of Health/National Center for Advancing Translational Sciences (NIH/NCATS)TR003384 米国
引用ジャーナル: Nat Commun / 年: 2022
タイトル: Fusion protein strategies for cryo-EM study of G protein-coupled receptors.
著者: Kaihua Zhang / Hao Wu / Nicholas Hoppe / Aashish Manglik / Yifan Cheng /
要旨: Single particle cryogenic-electron microscopy (cryo-EM) is used extensively to determine structures of activated G protein-coupled receptors (GPCRs) in complex with G proteins or arrestins. However, ...Single particle cryogenic-electron microscopy (cryo-EM) is used extensively to determine structures of activated G protein-coupled receptors (GPCRs) in complex with G proteins or arrestins. However, applying it to GPCRs without signaling proteins remains challenging because most receptors lack structural features in their soluble domains to facilitate image alignment. In GPCR crystallography, inserting a fusion protein between transmembrane helices 5 and 6 is a highly successful strategy for crystallization. Although a similar strategy has the potential to broadly facilitate cryo-EM structure determination of GPCRs alone without signaling protein, the critical determinants that make this approach successful are not yet clear. Here, we address this shortcoming by exploring different fusion protein designs, which lead to structures of antagonist bound A adenosine receptor at 3.4 Å resolution and unliganded Smoothened at 3.7 Å resolution. The fusion strategies explored here are likely applicable to cryo-EM interrogation of other GPCRs and small integral membrane proteins.
履歴
登録2022年5月22日登録サイト: RCSB / 処理サイト: RCSB
改定 1.02022年8月3日Provider: repository / タイプ: Initial release
改定 1.12024年5月1日Group: Data collection / Database references
カテゴリ: chem_comp_atom / chem_comp_bond ...chem_comp_atom / chem_comp_bond / citation / citation_author
Item: _citation.page_last / _citation.pdbx_database_id_PubMed / _citation_author.identifier_ORCID
改定 1.22024年10月9日Group: Data collection / Structure summary
カテゴリ: em_admin / pdbx_entry_details / pdbx_modification_feature
Item: _em_admin.last_update / _pdbx_entry_details.has_protein_modification

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構造の表示

構造ビューア分子:
MolmilJmol/JSmol

ダウンロードとリンク

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集合体

登録構造単位
A: Smoothened homolog, GlgA glycogen synthase chimera
ヘテロ分子


分子量 (理論値)分子数
合計 (水以外)81,2552
ポリマ－80,8681
非ポリマー3871
水00
1


  • 登録構造と同一
  • 登録者が定義した集合体
  • 根拠: gel filtration
タイプ名称対称操作数
identity operation1_5551

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要素

#1: タンパク質 Smoothened homolog, GlgA glycogen synthase chimera / SMO / Glycogen synthase


分子量: 80868.180 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現
由来: (組換発現) Mus musculus (ハツカネズミ), (組換発現) Pyrococcus abyssi (strain GE5 / Orsay) (古細菌)
遺伝子: Smo, Smoh, PAB2292 / 株: GE5 / Orsay / 発現宿主: Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P56726, UniProt: Q9V2J8
#2: 化合物 ChemComp-CLR / CHOLESTEROL / コレステロ-ル


分子量: 386.654 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 式: C27H46O / タイプ: SUBJECT OF INVESTIGATION
研究の焦点であるリガンドがあるかY
Has protein modificationY

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実験情報

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実験

実験手法: 電子顕微鏡法
EM実験試料の集合状態: PARTICLE / ３次元再構成法: 単粒子再構成法

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試料調製

構成要素名称: mSMO-PGS2 / タイプ: COMPLEX / Entity ID: #1 / 由来: MULTIPLE SOURCES
由来(天然)生物種: Mus musculus (ハツカネズミ)
由来(組換発現)生物種: Homo sapiens (ヒト)
緩衝液pH: 7.4
試料包埋: YES / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES
EM embeddingMaterial: nanodisc
急速凍結凍結剤: ETHANE

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電子顕微鏡撮影

実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company
顕微鏡モデル: FEI TITAN KRIOS
電子銃電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM
電子レンズモード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス（公称値）: 3000 nm / 最小 デフォーカス（公称値）: 500 nm
撮影電子線照射量: 68.4 e/Å2
フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 BIOQUANTUM (6k x 4k)

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解析

CTF補正タイプ: NONE
3次元再構成解像度: 3.7 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 90476 / 対称性のタイプ: POINT

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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