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- PDB-8brr: Crystal structure of a variant of penicillin G acylase from Bacil... -

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基本情報

登録情報
データベース: PDB / ID: 8brr
タイトルCrystal structure of a variant of penicillin G acylase from Bacillaceae i. s. sp. FJAT-27231 with reduced surface entropy and additionally engineered crystal contact
要素(Penicillin G ...) x 2
キーワードHYDROLASE / Penicillin / Acylase / Surface entropy reduction / Crystal contact engineering / Crystallizability
機能・相同性
機能・相同性情報


hydrolase activity, acting on carbon-nitrogen (but not peptide) bonds, in linear amides / antibiotic biosynthetic process / metal ion binding
類似検索 - 分子機能
Penicillin/GL-7-ACA/AHL acylase / Penicillin/GL-7-ACA/AHL/aculeacin-A acylase / Penicillin amidase type, domain 1 / Penicillin amidase type, N-terminal domain, B-knob / Penicillin amidase type, A-knob / Penicillin amidase / Nucleophile aminohydrolases, N-terminal
類似検索 - ドメイン・相同性
(R,R)-2,3-BUTANEDIOL / Penicillin G acylase
類似検索 - 構成要素
生物種Bacillus sp. FJAT-27231 (バクテリア)
手法X線回折 / シンクロトロン / 分子置換 / 解像度: 1.95 Å
データ登録者Wichmann, J. / Mayer, J. / Mattes, H. / Lukat, P. / Blankenfeldt, W. / Biedendieck, R.
資金援助 ドイツ, 1件
組織認可番号
German Research Foundation (DFG) ドイツ
引用ジャーナル: Cryst.Growth Des. / : 2023
タイトル: Multistep Engineering of a Penicillin G Acylase for Systematic Improvement of Crystallization Efficiency
著者: Wichmann, J. / Mayer, J. / Hintmann, M. / Lukat, P. / Blankenfeldt, W. / Biedendieck, R.
履歴
登録2022年11月23日登録サイト: PDBE / 処理サイト: PDBE
改定 1.02023年5月3日Provider: repository / タイプ: Initial release
改定 1.12024年2月7日Group: Data collection / カテゴリ: chem_comp_atom / chem_comp_bond

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構造の表示

構造ビューア分子:
MolmilJmol/JSmol

ダウンロードとリンク

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集合体

登録構造単位
A: Penicillin G acylase
B: Penicillin G acylase
C: Penicillin G acylase
D: Penicillin G acylase
ヘテロ分子


分子量 (理論値)分子数
合計 (水以外)172,93012
ポリマ-172,1134
非ポリマー8178
19,9791109
1
A: Penicillin G acylase
B: Penicillin G acylase
ヘテロ分子


分子量 (理論値)分子数
合計 (水以外)86,4656
ポリマ-86,0572
非ポリマー4094
362
タイプ名称対称操作
identity operation1_555x,y,z1
Buried area13190 Å2
ΔGint-87 kcal/mol
Surface area26980 Å2
手法PISA
2
C: Penicillin G acylase
D: Penicillin G acylase
ヘテロ分子


分子量 (理論値)分子数
合計 (水以外)86,4656
ポリマ-86,0572
非ポリマー4094
362
タイプ名称対称操作
identity operation1_555x,y,z1
Buried area12930 Å2
ΔGint-85 kcal/mol
Surface area26860 Å2
手法PISA
単位格子
Length a, b, c (Å)61.276, 139.227, 100.638
Angle α, β, γ (deg.)90.00, 91.51, 90.00
Int Tables number4
Space group name H-MP1211

-
要素

-
Penicillin G ... , 2種, 4分子 ACBD

#1: タンパク質 Penicillin G acylase


分子量: 24683.795 Da / 分子数: 2 / 変異: K201A, K202A, E203A / 由来タイプ: 組換発現
詳細: penicillin G acylase, alpha-subunit, Surface entropy reduction variant (variant hypho_3)
由来: (組換発現) Bacillus sp. FJAT-27231 (バクテリア)
遺伝子: AC623_04440 / 発現宿主: Priestia megaterium (バクテリア) / 参照: UniProt: A0A0K9H482
#2: タンパク質 Penicillin G acylase


分子量: 61372.836 Da / 分子数: 2 / 変異: K135A, E136A, K137A, K403A, E404A, E405A, K408V / 由来タイプ: 組換発現
詳細: penicillin G acylase, beta-subunit, Surface entropy reduction variant (variant hypho_3)
由来: (組換発現) Bacillus sp. FJAT-27231 (バクテリア)
遺伝子: AC623_04440 / 発現宿主: Priestia megaterium (バクテリア) / 参照: UniProt: A0A0K9H482

-
非ポリマー , 4種, 1117分子

#3: 化合物 ChemComp-EPE / 4-(2-HYDROXYETHYL)-1-PIPERAZINE ETHANESULFONIC ACID / HEPES / HEPES


分子量: 238.305 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 合成 / : C8H18N2O4S / コメント: pH緩衝剤*YM
#4: 化合物 ChemComp-BU3 / (R,R)-2,3-BUTANEDIOL / (2R,3R)-2,3-ブタンジオ-ル


分子量: 90.121 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 合成 / : C4H10O2
#5: 化合物
ChemComp-CA / CALCIUM ION / カルシウムジカチオン


分子量: 40.078 Da / 分子数: 4 / 由来タイプ: 合成 / : Ca
#6: 水 ChemComp-HOH / water


分子量: 18.015 Da / 分子数: 1109 / 由来タイプ: 天然 / : H2O

-
詳細

研究の焦点であるリガンドがあるかN

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実験情報

-
実験

実験手法: X線回折 / 使用した結晶の数: 1

-
試料調製

結晶マシュー密度: 2.49 Å3/Da / 溶媒含有率: 50.67 %
結晶化温度: 293 K / 手法: 蒸気拡散法, ハンギングドロップ法 / pH: 7.5
詳細: 100 mM HEPES pH 7.5 40 mg/ml PEG 8000 Cryo-protection: 10 % (v/v) 2,3-(R,R)-butanediol

-
データ収集

回折平均測定温度: 100 K / Serial crystal experiment: N
放射光源由来: シンクロトロン / サイト: PETRA III, DESY / ビームライン: P11 / 波長: 1.0332 Å
検出器タイプ: DECTRIS EIGER2 X 16M / 検出器: PIXEL / 日付: 2021年9月8日
放射プロトコル: SINGLE WAVELENGTH / 単色(M)・ラウエ(L): M / 散乱光タイプ: x-ray
放射波長波長: 1.0332 Å / 相対比: 1
反射解像度: 1.95→100.6 Å / Num. obs: 109804 / % possible obs: 90.2 % / 冗長度: 3.7 % / CC1/2: 0.994 / Rmerge(I) obs: 0.104 / Rpim(I) all: 0.06 / Rrim(I) all: 0.121 / Χ2: 0.87 / Net I/σ(I): 8 / Num. measured all: 411100
反射 シェル解像度: 1.95→2.06 Å / % possible obs: 92.4 % / 冗長度: 3.8 % / Rmerge(I) obs: 0.466 / Num. measured all: 62405 / Num. unique obs: 16432 / CC1/2: 0.863 / Rpim(I) all: 0.27 / Rrim(I) all: 0.541 / Χ2: 0.78 / Net I/σ(I) obs: 3

-
解析

ソフトウェア
名称バージョン分類
PHENIX1.20-4459精密化
autoPROCdata processing
Aimlessデータスケーリング
XDSデータ削減
PHASER位相決定
精密化構造決定の手法: 分子置換
開始モデル: 6NVX
解像度: 1.95→50.3 Å / SU ML: 0.21 / 交差検証法: FREE R-VALUE / σ(F): 1.34 / 位相誤差: 26.25 / 立体化学のターゲット値: ML
Rfactor反射数%反射
Rfree0.2322 5321 4.86 %
Rwork0.1907 --
obs0.1928 109538 89.93 %
溶媒の処理減衰半径: 0.9 Å / VDWプローブ半径: 1.1 Å / 溶媒モデル: FLAT BULK SOLVENT MODEL
精密化ステップサイクル: LAST / 解像度: 1.95→50.3 Å
タンパク質核酸リガンド溶媒全体
原子数11610 0 46 1109 12765
拘束条件
Refine-IDタイプDev ideal
X-RAY DIFFRACTIONf_bond_d0.00811984
X-RAY DIFFRACTIONf_angle_d0.66616191
X-RAY DIFFRACTIONf_dihedral_angle_d14.594403
X-RAY DIFFRACTIONf_chiral_restr0.0471651
X-RAY DIFFRACTIONf_plane_restr0.0062095
LS精密化 シェル
解像度 (Å)Rfactor RfreeNum. reflection RfreeRfactor RworkNum. reflection RworkRefine-ID% reflection obs (%)
1.95-1.980.35551940.29933845X-RAY DIFFRACTION99
1.98-20.31451830.26623779X-RAY DIFFRACTION99
2-2.020.27311870.22663801X-RAY DIFFRACTION99
2.02-2.050.33061730.21893812X-RAY DIFFRACTION98
2.05-2.080.3208220.3264481X-RAY DIFFRACTION13
2.08-2.10.27942040.22813808X-RAY DIFFRACTION98
2.1-2.130.29911870.20663795X-RAY DIFFRACTION98
2.13-2.170.27761760.20523837X-RAY DIFFRACTION99
2.17-2.20.28041750.21383817X-RAY DIFFRACTION99
2.2-2.230.36391720.30063108X-RAY DIFFRACTION89
2.25-2.270.28481060.25091870X-RAY DIFFRACTION92
2.27-2.320.2522340.18913717X-RAY DIFFRACTION98
2.32-2.360.24161770.18983840X-RAY DIFFRACTION98
2.36-2.410.22521680.19253730X-RAY DIFFRACTION96
2.41-2.460.20711830.18953607X-RAY DIFFRACTION93
2.46-2.520.27371630.19043773X-RAY DIFFRACTION98
2.52-2.580.23011950.1833813X-RAY DIFFRACTION99
2.58-2.640.2511800.19443146X-RAY DIFFRACTION95
2.68-2.730.22961450.19792502X-RAY DIFFRACTION96
2.73-2.820.24331800.20173843X-RAY DIFFRACTION99
2.82-2.920.2341980.1933839X-RAY DIFFRACTION99
2.92-3.030.24572160.19193754X-RAY DIFFRACTION99
3.04-3.170.23562190.18933801X-RAY DIFFRACTION99
3.17-3.340.22222290.18673778X-RAY DIFFRACTION99
3.34-3.550.26711350.18873126X-RAY DIFFRACTION80
3.55-3.820.22721550.17813237X-RAY DIFFRACTION83
3.82-4.210.20621550.163334X-RAY DIFFRACTION86
4.21-4.820.1682060.15153620X-RAY DIFFRACTION94
4.82-6.070.2011860.16783906X-RAY DIFFRACTION100
6.07-50.30.18272180.18393898X-RAY DIFFRACTION99
精密化 TLS

手法: refined / Refine-ID: X-RAY DIFFRACTION

IDL112)L122)L132)L222)L232)L332)S11 (Å °)S12 (Å °)S13 (Å °)S21 (Å °)S22 (Å °)S23 (Å °)S31 (Å °)S32 (Å °)S33 (Å °)T112)T122)T132)T222)T232)T332)Origin x (Å)Origin y (Å)Origin z (Å)
17.0453.1561-5.16524.42030.20275.89340.1052-0.1101-1.4848-0.9711-0.30230.52582.41270.41460.03690.77820.07880.08330.40980.14750.6922-2.1919-50.87567.7053
21.2345-0.18210.10910.36290.25430.6667-0.00740.0173-0.21860.0097-0.00630.0190.03680.00360.00970.2054-0.0015-0.02650.15620.00730.318717.1383-46.010610.9163
30.56610.20160.04890.56180.03-0.04370.0835-0.0646-0.2396-0.0084-0.0988-0.3135-00.01470.010.1953-0.01-0.00780.1919-0.00290.290831.1927-30.880114.9992
46.15441.74940.8152.6242-0.24311.65090.2291-0.36460.64330.1393-0.22760.1682-0.0324-0.132-0.01370.2397-0.0137-0.01750.1622-0.04940.28729.2463-6.275318.4806
50.26130.17510.28880.88010.11750.87430.0318-0.0041-0.01090.03260.00650.1131-0.0538-0.0916-0.0380.153-0.00580.00950.1682-0.00870.246511.1242-27.06912.0312
62.08111.52932.59234.10894.57425.92330.09870.1354-0.52360.65840.5719-0.3170.81020.7935-0.66670.28710.0562-0.06980.32640.00490.38743.1977-40.283524.1771
73.0373-0.0350.96930.6103-0.00860.7460.0595-0.12030.01360.1311-0.0258-0.0221-0.08720.0148-0.04340.2064-0.0050.00610.1992-0.0160.196621.6481-24.892825.3404
80.57740.3968-0.14190.4453-0.21360.38260.0063-0.00490.14540.08190.02270.0787-0.1019-0.0505-0.0370.20780.0227-0.0130.1904-0.01980.298716.85-8.82077.0752
91.23140.46230.94911.48110.11622.1393-0.08220.09720.1633-0.14550.05320.00580.02960.04370.03140.1539-0.01140.0250.1570.02080.321230.5592-5.4849-3.3541
101.2541.52480.26093.7081-0.31240.5363-0.18090.25330.0553-0.56140.153-0.10170.02760.09420.03690.30080.00860.02060.25940.00860.342831.5559-7.3098-13.3546
111.8945-0.45460.12211.532-0.11670.58240.0697-0.0072-0.2023-0.0738-0.0302-0.04430.03680.1163-0.03850.2041-0.0068-0.00420.196-0.01030.244317.4583-29.7565-0.8403
121.4012-0.6358-0.36382.14760.8561.429-0.00190.1014-0.26770.01420.02870.15410.0237-0.01350.01880.1459-0.0063-0.05390.1786-0.01150.28055.102-34.4954-2.4837
136.63162.68886.12251.46472.63738.3873-0.0739-0.00910.5549-0.09940.051-0.2764-0.68260.1632-0.04620.2631-0.07770.06350.21040.01470.455832.5147-29.6474-43.9833
143.8523-0.34150.4311.631-1.1581.2042-0.0832-0.12280.68050.0332-0.0222-0.0545-0.1595-0.07890.11060.24830.0058-0.03540.1611-0.03050.385914.1813-28.4363-40.8268
153.67440.30972.45520.9736-1.22393.8005-0.0526-0.31020.06440.06260.07460.1625-0.176-0.32760.02640.19340.0260.0120.2315-0.08170.36363.5531-33.1027-30.5959
162.5995-0.31871.07464.5177-5.55639.0851-0.00250.06420.42980.2773-0.1968-0.2068-0.6370.31630.26310.3086-0.0336-0.00120.2005-0.02720.462220.2918-22.3747-37.3435
172.8-0.70033.14980.328-1.1534.3593-0.2095-0.21160.29030.03070.052-0.0451-0.4694-0.4470.17490.28090.0279-0.02130.17470.03340.40969.3363-21.716-46.6198
182.53291.40880.60784.55930.2181.83780.0644-0.19480.0175-0.2222-0.26050.0605-0.1332-0.19850.18960.1785-0.0072-0.04190.2198-0.00080.26618.5101-39.3874-33.9175
196.24430.60690.83482.85051.76121.7197-0.02460.0118-0.20980.0077-0.14010.5830.009-0.1630.14030.1527-0.023-0.01340.19610.03310.2898-11.292-63.3344-33.8476
205.54570.4129-0.12873.53471.93244.9712-0.0424-0.246-0.51230.1763-0.0499-0.42090.57740.27670.03620.1780.0306-0.04770.17170.07550.257810.4038-67.4034-33.0573
210.67380.35110.32221.5052-0.0920.77290.05790.05320.10750.0493-0.0556-0.0945-0.02260.089-0.00570.162-0.005-0.02170.1607-0.0040.217421.2614-46.9851-38.3717
222.44433.0748-4.23265.4357-5.48988.90890.22740.13530.82140.61240.52580.5962-0.917-0.7176-0.77440.30050.10120.0090.3903-0.04680.5062-10.7841-34.3975-25.5815
232.22670.2006-0.39050.87650.08260.62610.0544-0.25110.00910.0565-0.0628-0.00860.0225-0.03940.00780.2036-0.0221-0.0380.20780.02220.199511.8432-52.7245-27.3645
242.91361.66731.18552.07541.07081.1990.09430.0753-0.3702-0.0256-0.0195-0.22450.17660.0559-0.08230.21650.0262-0.02240.1621-0.02450.191716.8184-66.9361-51.013
251.42410.2737-0.94781.06970.01481.6393-0.01380.1269-0.1541-0.1654-0.0460.09190.0432-0.11820.05770.22180.0082-0.06090.2141-0.02790.28711.7405-68.6434-54.1544
260.98461.2299-0.70023.2924-0.27140.69-0.16680.3181-0.1106-0.45460.15570.05290.1223-0.1860.00910.30730.0101-0.08380.3162-0.05790.38980.7009-66.6765-64.3642
271.1392-0.65080.5871.8694-0.36821.24020.00170.11620.2389-0.1039-0.1193-0.1638-0.11930.13350.11370.2186-0.01470.01230.1810.04640.251222.5134-40.9302-52.1997
精密化 TLSグループ
IDRefine-IDRefine TLS-IDSelection details
1X-RAY DIFFRACTION1chain 'A' and (resid 2 through 9 )
2X-RAY DIFFRACTION2chain 'A' and (resid 10 through 125 )
3X-RAY DIFFRACTION3chain 'A' and (resid 126 through 168 )
4X-RAY DIFFRACTION4chain 'A' and (resid 169 through 197 )
5X-RAY DIFFRACTION5chain 'B' and (resid 1 through 81 )
6X-RAY DIFFRACTION6chain 'B' and (resid 82 through 124 )
7X-RAY DIFFRACTION7chain 'B' and (resid 125 through 229 )
8X-RAY DIFFRACTION8chain 'B' and (resid 230 through 313 )
9X-RAY DIFFRACTION9chain 'B' and (resid 314 through 402 )
10X-RAY DIFFRACTION10chain 'B' and (resid 403 through 442 )
11X-RAY DIFFRACTION11chain 'B' and (resid 443 through 473 )
12X-RAY DIFFRACTION12chain 'B' and (resid 474 through 527 )
13X-RAY DIFFRACTION13chain 'C' and (resid 7 through 25 )
14X-RAY DIFFRACTION14chain 'C' and (resid 26 through 61 )
15X-RAY DIFFRACTION15chain 'C' and (resid 62 through 89 )
16X-RAY DIFFRACTION16chain 'C' and (resid 90 through 117 )
17X-RAY DIFFRACTION17chain 'C' and (resid 118 through 133 )
18X-RAY DIFFRACTION18chain 'C' and (resid 134 through 152 )
19X-RAY DIFFRACTION19chain 'C' and (resid 153 through 180 )
20X-RAY DIFFRACTION20chain 'C' and (resid 181 through 194 )
21X-RAY DIFFRACTION21chain 'D' and (resid 1 through 81 )
22X-RAY DIFFRACTION22chain 'D' and (resid 82 through 124 )
23X-RAY DIFFRACTION23chain 'D' and (resid 125 through 265 )
24X-RAY DIFFRACTION24chain 'D' and (resid 266 through 312 )
25X-RAY DIFFRACTION25chain 'D' and (resid 313 through 402 )
26X-RAY DIFFRACTION26chain 'D' and (resid 403 through 441 )
27X-RAY DIFFRACTION27chain 'D' and (resid 442 through 527 )

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月:コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか? / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例:em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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