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- 基本情報
基本情報
| 登録情報 | データベース: PDB / ID: 7nhk | |||||||||||||||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| タイトル | LsaA, an antibiotic resistance ABCF, in complex with 70S ribosome from Enterococcus faecalis | |||||||||||||||||||||
|  要素 | 
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|  キーワード | RIBOSOME / Antibiotic resistance element / ribosomal protein / LsaA / ABCF / target protection / antibiotic resistance | |||||||||||||||||||||
| 機能・相同性 |  機能・相同性情報 large ribosomal subunit / regulation of translation / transferase activity / ribosomal small subunit biogenesis / ribosomal small subunit assembly / small ribosomal subunit / 5S rRNA binding / small ribosomal subunit rRNA binding / ribosomal large subunit assembly / cytosolic small ribosomal subunit ...large ribosomal subunit / regulation of translation / transferase activity / ribosomal small subunit biogenesis / ribosomal small subunit assembly / small ribosomal subunit / 5S rRNA binding / small ribosomal subunit rRNA binding / ribosomal large subunit assembly / cytosolic small ribosomal subunit / large ribosomal subunit rRNA binding / cytosolic large ribosomal subunit / cytoplasmic translation / tRNA binding / negative regulation of translation / rRNA binding / structural constituent of ribosome / ribosome / translation / ribonucleoprotein complex / mRNA binding / ATP hydrolysis activity / RNA binding / zinc ion binding / ATP binding / cytoplasm / cytosol 類似検索 - 分子機能 | |||||||||||||||||||||
| 生物種 |   Enterococcus faecalis (乳酸球菌) | |||||||||||||||||||||
| 手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.9 Å | |||||||||||||||||||||
|  データ登録者 | Crowe-McAuliffe, C. / Kasari, M. / Hauryliuk, V.H. / Wilson, D.N. | |||||||||||||||||||||
| 資金援助 |  ドイツ,  スウェーデン,  Estonia, 6件 
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|  引用 |  ジャーナル: Nat Commun / 年: 2021 タイトル: Structural basis of ABCF-mediated resistance to pleuromutilin, lincosamide, and streptogramin A antibiotics in Gram-positive pathogens. 著者: Caillan Crowe-McAuliffe / Victoriia Murina / Kathryn Jane Turnbull / Marje Kasari / Merianne Mohamad / Christine Polte / Hiraku Takada / Karolis Vaitkevicius / Jörgen Johansson / Zoya ...著者: Caillan Crowe-McAuliffe / Victoriia Murina / Kathryn Jane Turnbull / Marje Kasari / Merianne Mohamad / Christine Polte / Hiraku Takada / Karolis Vaitkevicius / Jörgen Johansson / Zoya Ignatova / Gemma C Atkinson / Alex J O'Neill / Vasili Hauryliuk / Daniel N Wilson /        要旨: Target protection proteins confer resistance to the host organism by directly binding to the antibiotic target. One class of such proteins are the antibiotic resistance (ARE) ATP-binding cassette ...Target protection proteins confer resistance to the host organism by directly binding to the antibiotic target. One class of such proteins are the antibiotic resistance (ARE) ATP-binding cassette (ABC) proteins of the F-subtype (ARE-ABCFs), which are widely distributed throughout Gram-positive bacteria and bind the ribosome to alleviate translational inhibition from antibiotics that target the large ribosomal subunit. Here, we present single-particle cryo-EM structures of ARE-ABCF-ribosome complexes from three Gram-positive pathogens: Enterococcus faecalis LsaA, Staphylococcus haemolyticus VgaA and Listeria monocytogenes VgaL. Supported by extensive mutagenesis analysis, these structures enable a general model for antibiotic resistance mediated by these ARE-ABCFs to be proposed. In this model, ABCF binding to the antibiotic-stalled ribosome mediates antibiotic release via mechanistically diverse long-range conformational relays that converge on a few conserved ribosomal RNA nucleotides located at the peptidyltransferase center. These insights are important for the future development of antibiotics that overcome such target protection resistance mechanisms. | |||||||||||||||||||||
| 履歴 | 
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| ムービー | 
 
  ムービービューア | 
|---|---|
| 構造ビューア | 分子:  Molmil  Jmol/JSmol | 
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| PDBx/mmCIF形式 |  7nhk.cif.gz | 3.2 MB | 表示 |  PDBx/mmCIF形式 | 
|---|---|---|---|---|
| PDB形式 |  pdb7nhk.ent.gz | 表示 |  PDB形式 | |
| PDBx/mmJSON形式 |  7nhk.json.gz | ツリー表示 |  PDBx/mmJSON形式 | |
| その他 |  その他のダウンロード | 
-検証レポート
| 文書・要旨 |  7nhk_validation.pdf.gz | 1.9 MB | 表示 |  wwPDB検証レポート | 
|---|---|---|---|---|
| 文書・詳細版 |  7nhk_full_validation.pdf.gz | 2 MB | 表示 | |
| XML形式データ |  7nhk_validation.xml.gz | 214.9 KB | 表示 | |
| CIF形式データ |  7nhk_validation.cif.gz | 376.6 KB | 表示 | |
| アーカイブディレクトリ |  https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/nh/7nhk  ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/nh/7nhk | HTTPS FTP | 
-関連構造データ
| 関連構造データ |  12331MC  7nhlC  7nhmC  7nhnC M: このデータのモデリングに利用したマップデータ C: 同じ文献を引用 ( | 
|---|---|
| 類似構造データ | |
| 電子顕微鏡画像生データ |  EMPIAR-10682 (タイトル: Affinity-purified LsaA in complex with 70S ribosomes from Enterococcus faecalis Data size: 82.3 Data #1: Unaligned multi-frame micrographs of LsaA bound to 70S ribosome from Entrococcus faecalis [micrographs - multiframe]) | 
- リンク
リンク
- 集合体
集合体
| 登録構造単位 |  
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|---|---|
| 1 | 
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- 要素
要素
-タンパク質 , 1種, 1分子 0
| #1: タンパク質 | 分子量: 62372.363 Da / 分子数: 1 / 変異: E142Q, E452Q / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現)    Enterococcus faecalis (乳酸球菌) / 遺伝子: DVW78_08325 / 発現宿主:   Enterococcus faecalis (乳酸球菌) / 株 (発現宿主): TX5332 / 参照: UniProt: A0A4U4C430 | 
|---|
+50S ribosomal protein  ... , 28種, 28分子 1245678GHIJKMNOPQRSTUVWXYZF3                           
-RNA鎖 , 5種, 5分子 ABaDb    
| #9: RNA鎖 | 分子量: 944000.625 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然)    Enterococcus faecalis (乳酸球菌) | 
|---|---|
| #10: RNA鎖 | 分子量: 37433.188 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然)    Enterococcus faecalis (乳酸球菌) | 
| #30: RNA鎖 | 分子量: 504170.562 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然)    Enterococcus faecalis (乳酸球菌) | 
| #50: RNA鎖 | 分子量: 24811.795 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然)    Enterococcus faecalis (乳酸球菌) | 
| #51: RNA鎖 | 分子量: 5617.279 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然)    Enterococcus faecalis (乳酸球菌) | 
-30S ribosomal protein  ... , 19種, 19分子 cdefghijklmnopqrstu                  
| #31: タンパク質 | 分子量: 29500.635 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然)    Enterococcus faecalis (乳酸球菌) / 参照: UniProt: A0A1B4XQD8 | 
|---|---|
| #32: タンパク質 | 分子量: 24415.184 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然)    Enterococcus faecalis (乳酸球菌) / 参照: UniProt: A0A1B4XKR8 | 
| #33: タンパク質 | 分子量: 23273.652 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然)    Enterococcus faecalis (乳酸球菌) / 参照: UniProt: A0A1B4XRV7 | 
| #34: タンパク質 | 分子量: 17444.357 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然)    Enterococcus faecalis (乳酸球菌) / 参照: UniProt: A0A1B4XKW0 | 
| #35: タンパク質 | 分子量: 11621.188 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然)    Enterococcus faecalis (乳酸球菌) / 参照: UniProt: A0A1B4XKB6 | 
| #36: タンパク質 | 分子量: 17864.625 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然)    Enterococcus faecalis (乳酸球菌) / 参照: UniProt: A0A1B4XKQ3 | 
| #37: タンパク質 | 分子量: 14936.396 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然)    Enterococcus faecalis (乳酸球菌) / 参照: UniProt: A0A1B4XKS6 | 
| #38: タンパク質 | 分子量: 14271.480 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然)    Enterococcus faecalis (乳酸球菌) / 参照: UniProt: A0A1B4XSA2 | 
| #39: タンパク質 | 分子量: 11731.739 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然)    Enterococcus faecalis (乳酸球菌) / 参照: UniProt: A0A1B4XKR5 | 
| #40: タンパク質 | 分子量: 13739.913 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然)    Enterococcus faecalis (乳酸球菌) / 参照: UniProt: A0A1B4XKV1 | 
| #41: タンパク質 | 分子量: 15309.817 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然)    Enterococcus faecalis (乳酸球菌) / 参照: UniProt: A0A1B4XKQ7 | 
| #42: タンパク質 | 分子量: 13595.774 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然)    Enterococcus faecalis (乳酸球菌) / 参照: UniProt: A0A1B4XKT7 | 
| #43: タンパク質 | 分子量: 7172.593 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然)    Enterococcus faecalis (乳酸球菌) / 参照: UniProt: A0A1B4XKT0 | 
| #44: タンパク質 | 分子量: 10668.236 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然)    Enterococcus faecalis (乳酸球菌) / 参照: UniProt: A0A1B4XRW3 | 
| #45: タンパク質 | 分子量: 10356.150 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然)    Enterococcus faecalis (乳酸球菌) / 参照: UniProt: A0A1B4XP69 | 
| #46: タンパク質 | 分子量: 10332.100 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然)    Enterococcus faecalis (乳酸球菌) / 参照: UniProt: A0A1B4XKS3 | 
| #47: タンパク質 | 分子量: 9262.891 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然)    Enterococcus faecalis (乳酸球菌) / 参照: UniProt: A0A1B4XKB3 | 
| #48: タンパク質 | 分子量: 10586.332 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然)    Enterococcus faecalis (乳酸球菌) / 参照: UniProt: A0A1B4XKS0 | 
| #49: タンパク質 | 分子量: 8972.320 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然)    Enterococcus faecalis (乳酸球菌) / 参照: UniProt: A0A1B4XQJ7 | 
-非ポリマー , 5種, 185分子 








| #54: 化合物 | | #55: 化合物 | ChemComp-MG / #56: 化合物 | #57: 化合物 | ChemComp-K / #58: 化合物 | ChemComp-PUT / | 
|---|
-詳細
| 研究の焦点であるリガンドがあるか | N | 
|---|
-実験情報
-実験
| 実験 | 手法: 電子顕微鏡法 | 
|---|---|
| EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 | 
- 試料調製
試料調製
| 構成要素 | 名称: LsaA-in complex with 70S ribosome, mRNA, and tRNA / タイプ: RIBOSOME / Entity ID: #1-#53 / 由来: NATURAL | 
|---|---|
| 分子量 | 値: 2.2 MDa / 実験値: NO | 
| 由来(天然) | 生物種:   Enterococcus faecalis (乳酸球菌) | 
| 緩衝液 | pH: 7.5 | 
| 試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES | 
| 試料支持 | グリッドの材料: COPPER / グリッドのサイズ: 200 divisions/in. / グリッドのタイプ: Quantifoil R1.2/1.3 | 
| 急速凍結 | 装置: FEI VITROBOT MARK III / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 100 % / 凍結前の試料温度: 277.15 K / 詳細: 5s blotting | 
- 電子顕微鏡撮影
電子顕微鏡撮影
| 実験機器 |  モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company | 
|---|---|
| 顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS | 
| 電子銃 | 電子線源:  FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM | 
| 電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 倍率(公称値): 130000 X / 最大 デフォーカス(公称値): -2200 nm / 最小 デフォーカス(公称値): -700 nm / Cs: 2.7 mm | 
| 撮影 | 電子線照射量: 38 e/Å2 / 検出モード: COUNTING フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 撮影したグリッド数: 1 | 
- 解析
解析
| EMソフトウェア | 
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|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | ||||||||||||
| 3次元再構成 | 解像度: 2.9 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 59262 / 対称性のタイプ: POINT | 
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