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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 7k51 | ||||||||||||
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タイトル | Mid-translocated non-frameshifting(CCA-A) complex with EF-G and GDPCP (Structure II) | ||||||||||||
要素 |
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キーワード | RIBOSOME / tRNA / EFG / TRANSLATION | ||||||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 negative regulation of cytoplasmic translational initiation / stringent response / ornithine decarboxylase inhibitor activity / transcription antitermination factor activity, RNA binding / misfolded RNA binding / Group I intron splicing / RNA folding / transcriptional attenuation / endoribonuclease inhibitor activity / RNA-binding transcription regulator activity ...negative regulation of cytoplasmic translational initiation / stringent response / ornithine decarboxylase inhibitor activity / transcription antitermination factor activity, RNA binding / misfolded RNA binding / Group I intron splicing / RNA folding / transcriptional attenuation / endoribonuclease inhibitor activity / RNA-binding transcription regulator activity / positive regulation of ribosome biogenesis / negative regulation of cytoplasmic translation / translation elongation factor activity / four-way junction DNA binding / translational termination / DnaA-L2 complex / translation repressor activity / negative regulation of DNA-templated DNA replication initiation / negative regulation of translational initiation / regulation of mRNA stability / mRNA regulatory element binding translation repressor activity / ribosome assembly / assembly of large subunit precursor of preribosome / positive regulation of RNA splicing / transcription elongation factor complex / cytosolic ribosome assembly / regulation of DNA-templated transcription elongation / DNA endonuclease activity / response to reactive oxygen species / transcription antitermination / regulation of cell growth / translational initiation / DNA-templated transcription termination / maintenance of translational fidelity / response to radiation / mRNA 5'-UTR binding / ribosomal small subunit biogenesis / small ribosomal subunit rRNA binding / large ribosomal subunit / ribosome biogenesis / ribosome binding / regulation of translation / ribosomal small subunit assembly / small ribosomal subunit / 5S rRNA binding / large ribosomal subunit rRNA binding / transferase activity / cytosolic small ribosomal subunit / ribosomal large subunit assembly / cytoplasmic translation / cytosolic large ribosomal subunit / tRNA binding / molecular adaptor activity / negative regulation of translation / rRNA binding / ribosome / structural constituent of ribosome / translation / response to antibiotic / negative regulation of DNA-templated transcription / GTPase activity / mRNA binding / GTP binding / DNA binding / RNA binding / zinc ion binding / membrane / cytosol / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | ||||||||||||
生物種 | Escherichia coli K-12 (大腸菌) | ||||||||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.5 Å | ||||||||||||
データ登録者 | Demo, G. / Loveland, A.B. / Svidritskiy, E. / Gamper, H.B. / Hou, Y.M. / Korostelev, A.A. | ||||||||||||
資金援助 | 米国, チェコ, 3件
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引用 | ジャーナル: Nat Commun / 年: 2021 タイトル: Structural basis for +1 ribosomal frameshifting during EF-G-catalyzed translocation. 著者: Gabriel Demo / Howard B Gamper / Anna B Loveland / Isao Masuda / Christine E Carbone / Egor Svidritskiy / Ya-Ming Hou / Andrei A Korostelev / 要旨: Frameshifting of mRNA during translation provides a strategy to expand the coding repertoire of cells and viruses. How and where in the elongation cycle +1-frameshifting occurs remains poorly ...Frameshifting of mRNA during translation provides a strategy to expand the coding repertoire of cells and viruses. How and where in the elongation cycle +1-frameshifting occurs remains poorly understood. We describe seven ~3.5-Å-resolution cryo-EM structures of 70S ribosome complexes, allowing visualization of elongation and translocation by the GTPase elongation factor G (EF-G). Four structures with a + 1-frameshifting-prone mRNA reveal that frameshifting takes place during translocation of tRNA and mRNA. Prior to EF-G binding, the pre-translocation complex features an in-frame tRNA-mRNA pairing in the A site. In the partially translocated structure with EF-G•GDPCP, the tRNA shifts to the +1-frame near the P site, rendering the freed mRNA base to bulge between the P and E sites and to stack on the 16S rRNA nucleotide G926. The ribosome remains frameshifted in the nearly post-translocation state. Our findings demonstrate that the ribosome and EF-G cooperate to induce +1 frameshifting during tRNA-mRNA translocation. | ||||||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
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構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 7k51.cif.gz | 3.3 MB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb7k51.ent.gz | 表示 | PDB形式 | |
PDBx/mmJSON形式 | 7k51.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
文書・要旨 | 7k51_validation.pdf.gz | 1.6 MB | 表示 | wwPDB検証レポート |
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文書・詳細版 | 7k51_full_validation.pdf.gz | 1.7 MB | 表示 | |
XML形式データ | 7k51_validation.xml.gz | 218.1 KB | 表示 | |
CIF形式データ | 7k51_validation.cif.gz | 388.7 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/k5/7k51 ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/k5/7k51 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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-要素
+50S ribosomal protein ... , 32種, 32分子 bcdefghijklmnopqrstuvwxyzABCDEFa
-30S ribosomal protein ... , 20種, 20分子 GHIJKLMNOPQRSTUVWXYZ
#32: タンパク質 | 分子量: 25015.816 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 詳細: cell / 由来: (天然) Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 株: MRE600 / 参照: UniProt: P0A7V0 |
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#33: タンパク質 | 分子量: 23078.785 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 詳細: cell / 由来: (天然) Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 株: MRE600 / 参照: UniProt: P0A7V3 |
#34: タンパク質 | 分子量: 23383.002 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 詳細: cell / 由来: (天然) Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 株: MRE600 / 参照: UniProt: P0A7V8 |
#35: タンパク質 | 分子量: 16532.088 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 詳細: cell / 由来: (天然) Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 株: MRE600 / 参照: UniProt: P0A7W1 |
#36: タンパク質 | 分子量: 11669.371 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 詳細: cell / 由来: (天然) Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 株: MRE600 / 参照: UniProt: P02358 |
#37: タンパク質 | 分子量: 16861.523 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 詳細: cell / 由来: (天然) Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 株: MRE600 / 参照: UniProt: P02359 |
#38: タンパク質 | 分子量: 14015.361 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 詳細: cell / 由来: (天然) Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 株: MRE600 / 参照: UniProt: P0A7W7 |
#39: タンパク質 | 分子量: 14554.882 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 詳細: cell / 由来: (天然) Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 株: MRE600 / 参照: UniProt: P0A7X3 |
#40: タンパク質 | 分子量: 11196.988 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 詳細: cell / 由来: (天然) Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 株: MRE600 / 参照: UniProt: P0A7R5 |
#41: タンパク質 | 分子量: 12388.068 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 詳細: cell / 由来: (天然) Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 株: MRE600 / 参照: UniProt: P0A7R9 |
#42: タンパク質 | 分子量: 13636.961 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 詳細: cell / 由来: (天然) Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 株: MRE600 / 参照: UniProt: P0A7S3 |
#43: タンパク質 | 分子量: 12625.753 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 詳細: cell / 由来: (天然) Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 株: MRE600 / 参照: UniProt: P0A7S9 |
#44: タンパク質 | 分子量: 11475.364 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 詳細: cell / 由来: (天然) Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 株: MRE600 / 参照: UniProt: P0AG59 |
#45: タンパク質 | 分子量: 10159.621 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 詳細: cell / 由来: (天然) Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 株: MRE600 / 参照: UniProt: P0ADZ4 |
#46: タンパク質 | 分子量: 9207.572 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 詳細: cell / 由来: (天然) Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 株: MRE600 / 参照: UniProt: P0A7T3 |
#47: タンパク質 | 分子量: 9263.946 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 詳細: cell / 由来: (天然) Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 株: MRE600 / 参照: UniProt: P0AG63 |
#48: タンパク質 | 分子量: 7606.768 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 詳細: cell / 由来: (天然) Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 株: MRE600 / 参照: UniProt: P0A7T7 |
#49: タンパク質 | 分子量: 9057.626 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 詳細: cell / 由来: (天然) Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 株: MRE600 / 参照: UniProt: P0A7U3 |
#50: タンパク質 | 分子量: 9506.190 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 詳細: cell / 由来: (天然) Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 株: MRE600 / 参照: UniProt: P0A7U7 |
#51: タンパク質 | 分子量: 7763.073 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 詳細: cell / 由来: (天然) Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 株: MRE600 / 参照: UniProt: P68679 |
-RNA鎖 , 6種, 6分子 312564
#53: RNA鎖 | 分子量: 498725.406 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 詳細: cell / 由来: (天然) Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 株: MRE600 / 参照: GenBank: 1126835768 |
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#54: RNA鎖 | 分子量: 941305.250 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 詳細: cell / 由来: (天然) Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 株: MRE600 / 参照: GenBank: 802133627 |
#55: RNA鎖 | 分子量: 38813.133 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 詳細: cell / 由来: (天然) Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 株: MRE600 / 参照: GenBank: 1266961702 |
#56: RNA鎖 | 分子量: 24862.746 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 詳細: cell / 由来: (天然) Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 株: MRE600 / 参照: GenBank: 1848949880 |
#57: RNA鎖 | 分子量: 24802.785 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 株: MRE600 / 参照: GenBank: 1275521620 |
#58: RNA鎖 | 分子量: 5192.207 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 由来: (合成) Escherichia coli K-12 (大腸菌) |
-タンパク質 , 1種, 1分子 8
#59: タンパク質 | 分子量: 78616.203 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 株: MRE600 / 遺伝子: fusA, ECDEC6A_4099 発現宿主: Escherichia coli 'BL21-Gold(DE3)pLysS AG' (大腸菌) 参照: UniProt: H4UQ46 |
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-非ポリマー , 4種, 4分子
#60: 化合物 | ChemComp-FME / |
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#61: 化合物 | ChemComp-PRO / |
#62: 化合物 | ChemComp-GCP / |
#63: 化合物 | ChemComp-MG / |
-詳細
研究の焦点であるリガンドがあるか | Y |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: Mid-translocated non-frameshifting(CCA-A) ribosome complex タイプ: RIBOSOME / Entity ID: #1-#59 / 由来: NATURAL | |||||||||||||||||||||||||||||||||||
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分子量 | 値: 1.6 MDa / 実験値: NO | |||||||||||||||||||||||||||||||||||
由来(天然) | 生物種: Escherichia coli (strain K12) (大腸菌) / 株: MRE600 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||
緩衝液 | pH: 7.5 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||
緩衝液成分 |
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試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES | |||||||||||||||||||||||||||||||||||
試料支持 | 詳細: glow discharged with 25mA negative polarity in PELCO easiGlow unit グリッドの材料: COPPER / グリッドのサイズ: 200 divisions/in. / グリッドのタイプ: Quantifoil R2/1 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||
急速凍結 | 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 95 % / 凍結前の試料温度: 278 K / 詳細: Blotting force 9, blotted for 4 seconds |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 倍率(公称値): 130000 X / 最大 デフォーカス(公称値): 2000 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 800 nm / アライメント法: COMA FREE |
試料ホルダ | 凍結剤: NITROGEN 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER |
撮影 | 平均露光時間: 7.2 sec. / 電子線照射量: 47.5 e/Å2 / 検出モード: SUPER-RESOLUTION フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 実像数: 1041 |
画像スキャン | 動画フレーム数/画像: 36 / 利用したフレーム数/画像: 1-36 |
-解析
EMソフトウェア |
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CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
粒子像の選択 | 選択した粒子像数: 62716 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
対称性 | 点対称性: C1 (非対称) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 3.5 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 3179 / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 | プロトコル: FLEXIBLE FIT / 空間: REAL / Target criteria: correlation coefficient | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 |
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