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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 6zym | |||||||||
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タイトル | Human C Complex Spliceosome - High-resolution CORE | |||||||||
要素 |
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キーワード | SPLICING / human C complex / spliceosome / hC / human step 1 spliceosome | |||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 striated muscle dense body / post-spliceosomal complex / regulation of retinoic acid receptor signaling pathway / post-mRNA release spliceosomal complex / 3'-5' RNA helicase activity / generation of catalytic spliceosome for first transesterification step / regulation of vitamin D receptor signaling pathway / embryonic brain development / nuclear retinoic acid receptor binding / positive regulation of androgen receptor activity ...striated muscle dense body / post-spliceosomal complex / regulation of retinoic acid receptor signaling pathway / post-mRNA release spliceosomal complex / 3'-5' RNA helicase activity / generation of catalytic spliceosome for first transesterification step / regulation of vitamin D receptor signaling pathway / embryonic brain development / nuclear retinoic acid receptor binding / positive regulation of androgen receptor activity / Prp19 complex / mRNA 3'-end processing / sno(s)RNA-containing ribonucleoprotein complex / U2-type catalytic step 1 spliceosome / RNA splicing, via transesterification reactions / pre-mRNA binding / regulation of mRNA splicing, via spliceosome / C2H2 zinc finger domain binding / U2-type spliceosomal complex / U2-type precatalytic spliceosome / positive regulation by host of viral transcription / mRNA cis splicing, via spliceosome / positive regulation of vitamin D receptor signaling pathway / nuclear vitamin D receptor binding / Transport of Mature mRNA derived from an Intron-Containing Transcript / U2-type catalytic step 2 spliceosome / Notch binding / Regulation of gene expression in late stage (branching morphogenesis) pancreatic bud precursor cells / positive regulation of mRNA splicing, via spliceosome / RUNX3 regulates NOTCH signaling / NOTCH4 Intracellular Domain Regulates Transcription / RNA Polymerase II Transcription Termination / NOTCH3 Intracellular Domain Regulates Transcription / WD40-repeat domain binding / positive regulation of neurogenesis / nuclear androgen receptor binding / K63-linked polyubiquitin modification-dependent protein binding / muscle organ development / cyclosporin A binding / Notch-HLH transcription pathway / generation of catalytic spliceosome for second transesterification step / positive regulation of transforming growth factor beta receptor signaling pathway / Formation of paraxial mesoderm / mRNA Splicing - Minor Pathway / spliceosomal complex assembly / SMAD binding / negative regulation of DNA damage response, signal transduction by p53 class mediator / mRNA 3'-splice site recognition / protein peptidyl-prolyl isomerization / protein localization to nucleus / spliceosomal tri-snRNP complex assembly / intrinsic apoptotic signaling pathway in response to DNA damage by p53 class mediator / U5 snRNA binding / U5 snRNP / positive regulation of G1/S transition of mitotic cell cycle / retinoic acid receptor signaling pathway / U2 snRNA binding / U6 snRNA binding / Cajal body / RNA processing / pre-mRNA intronic binding / cellular response to retinoic acid / U1 snRNA binding / U4/U6 x U5 tri-snRNP complex / catalytic step 2 spliceosome / mRNA Splicing - Major Pathway / RNA splicing / positive regulation of RNA splicing / positive regulation of protein export from nucleus / nuclear receptor coactivator activity / DNA damage checkpoint signaling / response to cocaine / nuclear receptor binding / peptidylprolyl isomerase / peptidyl-prolyl cis-trans isomerase activity / RNA polymerase II transcription regulatory region sequence-specific DNA binding / Downregulation of SMAD2/3:SMAD4 transcriptional activity / spliceosomal complex / Transcription-Coupled Nucleotide Excision Repair (TC-NER) / Formation of TC-NER Pre-Incision Complex / NOTCH1 Intracellular Domain Regulates Transcription / mRNA splicing, via spliceosome / Z disc / Pre-NOTCH Transcription and Translation / fibrillar center / histone deacetylase binding / Constitutive Signaling by NOTCH1 PEST Domain Mutants / Constitutive Signaling by NOTCH1 HD+PEST Domain Mutants / nuclear matrix / positive regulation of protein import into nucleus / Dual incision in TC-NER / mRNA processing / Gap-filling DNA repair synthesis and ligation in TC-NER / transcription corepressor activity / calcium-dependent protein binding / rRNA processing / disordered domain specific binding / actin filament binding / cellular response to xenobiotic stimulus / protein folding 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Homo sapiens (ヒト) | |||||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.4 Å | |||||||||
データ登録者 | Bertram, K. / Kastner, B. | |||||||||
資金援助 | ドイツ, 2件
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引用 | ジャーナル: Mol Cell / 年: 2020 タイトル: Structural Insights into the Roles of Metazoan-Specific Splicing Factors in the Human Step 1 Spliceosome. 著者: Karl Bertram / Leyla El Ayoubi / Olexandr Dybkov / Dmitry E Agafonov / Cindy L Will / Klaus Hartmuth / Henning Urlaub / Berthold Kastner / Holger Stark / Reinhard Lührmann / 要旨: Human spliceosomes contain numerous proteins absent in yeast, whose functions remain largely unknown. Here we report a 3D cryo-EM structure of the human spliceosomal C complex at 3.4 Å core ...Human spliceosomes contain numerous proteins absent in yeast, whose functions remain largely unknown. Here we report a 3D cryo-EM structure of the human spliceosomal C complex at 3.4 Å core resolution and 4.5-5.7 Å at its periphery, and aided by protein crosslinking we determine its molecular architecture. Our structure provides additional insights into the spliceosome's architecture between the catalytic steps of splicing, and how proteins aid formation of the spliceosome's catalytically active RNP (ribonucleoprotein) conformation. It reveals the spatial organization of the metazoan-specific proteins PPWD1, WDR70, FRG1, and CIR1 in human C complexes, indicating they stabilize functionally important protein domains and RNA structures rearranged/repositioned during the B to C transition. Structural comparisons with human B, C, and P complexes reveal an intricate cascade of RNP rearrangements during splicing catalysis, with intermediate RNP conformations not found in yeast, and additionally elucidate the structural basis for the sequential recruitment of metazoan-specific spliceosomal proteins. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
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構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 6zym.cif.gz | 1.2 MB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb6zym.ent.gz | 931.1 KB | 表示 | PDB形式 |
PDBx/mmJSON形式 | 6zym.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
文書・要旨 | 6zym_validation.pdf.gz | 1.3 MB | 表示 | wwPDB検証レポート |
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文書・詳細版 | 6zym_full_validation.pdf.gz | 1.3 MB | 表示 | |
XML形式データ | 6zym_validation.xml.gz | 141.6 KB | 表示 | |
CIF形式データ | 6zym_validation.cif.gz | 227.5 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/zy/6zym ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/zy/6zym | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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-要素
-RNA鎖 , 4種, 5分子 256YZ
#1: RNA鎖 | 分子量: 60186.445 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: GenBank: 36516 |
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#2: RNA鎖 | 分子量: 36908.668 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: GenBank: 36515 |
#3: RNA鎖 | 分子量: 25480.240 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 細胞株: Hela S3 |
#19: RNA鎖 | 分子量: 103979.148 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 細胞株: Hela S3 |
-タンパク質 , 16種, 16分子 9ABCDEFLOQRSVpux
#4: タンパク質 | 分子量: 52441.750 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q86X95 |
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#5: タンパク質 | 分子量: 207470.719 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q6P2Q9 |
#6: タンパク質 | 分子量: 107225.898 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q15029 |
#7: タンパク質 | 分子量: 61610.703 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q13573 |
#8: タンパク質 | 分子量: 57280.758 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: O43660 |
#9: タンパク質 | 分子量: 65612.180 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: O60508 |
#10: タンパク質 | 分子量: 39359.492 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q96DI7 |
#11: タンパク質 | 分子量: 92406.883 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q99459 |
#12: タンパク質 | 分子量: 100610.008 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q9BZJ0 |
#14: タンパク質 | 分子量: 17032.850 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P41223 |
#15: タンパク質 | 分子量: 26674.447 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q9P013 |
#16: タンパク質 | 分子量: 300255.312 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q9UQ35 |
#18: タンパク質 | 分子量: 18257.805 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q9Y3C6, peptidylprolyl isomerase |
#20: タンパク質 | 分子量: 73306.172 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q9NW82 |
#24: タンパク質 | 分子量: 21452.719 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q9BW85 |
#25: タンパク質 | 分子量: 29227.492 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q14331 |
-Pre-mRNA-splicing factor ... , 5種, 5分子 PTrst
#13: タンパク質 | 分子量: 25223.928 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q9NW64 |
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#17: タンパク質 | 分子量: 105646.578 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q9HCG8 |
#21: タンパク質 | 分子量: 140720.641 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q92620, RNA helicase |
#22: タンパク質 | 分子量: 33046.254 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q9ULR0 |
#23: タンパク質 | 分子量: 49769.938 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q9NXE8 |
-非ポリマー , 4種, 14分子
#26: 化合物 | ChemComp-MG / #27: 化合物 | ChemComp-IHP / | #28: 化合物 | ChemComp-GTP / | #29: 化合物 | ChemComp-ZN / |
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-詳細
研究の焦点であるリガンドがあるか | N |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: Human C complex Spliceosome - High resolution core / タイプ: COMPLEX / Entity ID: #1-#25 / 由来: NATURAL | ||||||||||||||||||||
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分子量 | 実験値: NO | ||||||||||||||||||||
由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) / 株: HeLa S3 | ||||||||||||||||||||
緩衝液 | pH: 7.9 | ||||||||||||||||||||
緩衝液成分 |
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試料 | 濃度: 0.1 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES / 詳細: Monodisperse particle distribution | ||||||||||||||||||||
試料支持 | グリッドの材料: COPPER / グリッドのサイズ: 200 divisions/in. / グリッドのタイプ: Quantifoil | ||||||||||||||||||||
急速凍結 | 装置: FEI VITROBOT MARK II / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 100 % / 凍結前の試料温度: 277 K |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: SPOT SCAN |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 倍率(公称値): 132000 X / 最大 デフォーカス(公称値): -3 nm / 最小 デフォーカス(公称値): -1 nm / Cs: 2.7 mm / C2レンズ絞り径: 70 µm / アライメント法: COMA FREE |
試料ホルダ | 凍結剤: NITROGEN 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER |
撮影 | 平均露光時間: 1 sec. / 電子線照射量: 120 e/Å2 / 検出モード: INTEGRATING フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON III (4k x 4k) 撮影したグリッド数: 2 / 実像数: 28279 |
画像スキャン | 横: 4096 / 縦: 4096 |
-解析
ソフトウェア | 名称: PHENIX / バージョン: 1.18.2_3874: / 分類: 精密化 | ||||||||||||||||||||||||
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CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | ||||||||||||||||||||||||
粒子像の選択 | 選択した粒子像数: 1751359 | ||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 3.4 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 411539 / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||||||||||
拘束条件 |
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