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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 6y53 | ||||||
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タイトル | human 17S U2 snRNP low resolution part | ||||||
要素 |
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キーワード | SPLICING / 17S U2 snRNP | ||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 U11/U12 snRNP / poly-ADP-D-ribose modification-dependent protein binding / U2 snRNP binding / U7 snRNA binding / histone pre-mRNA DCP binding / U7 snRNP / B-WICH complex / histone pre-mRNA 3'end processing complex / chromatin-protein adaptor activity / SLBP independent Processing of Histone Pre-mRNAs ...U11/U12 snRNP / poly-ADP-D-ribose modification-dependent protein binding / U2 snRNP binding / U7 snRNA binding / histone pre-mRNA DCP binding / U7 snRNP / B-WICH complex / histone pre-mRNA 3'end processing complex / chromatin-protein adaptor activity / SLBP independent Processing of Histone Pre-mRNAs / SLBP Dependent Processing of Replication-Dependent Histone Pre-mRNAs / splicing factor binding / protein methylation / U12-type spliceosomal complex / methylosome / 7-methylguanosine cap hypermethylation / protein localization to site of double-strand break / U1 snRNP binding / pICln-Sm protein complex / blastocyst formation / snRNP binding / RNA splicing, via transesterification reactions / small nuclear ribonucleoprotein complex / SMN-Sm protein complex / telomerase RNA binding / spliceosomal tri-snRNP complex / telomerase holoenzyme complex / P granule / U2-type spliceosomal complex / U2-type precatalytic spliceosome / mRNA cis splicing, via spliceosome / commitment complex / U2-type prespliceosome assembly / U2-type catalytic step 2 spliceosome / U4 snRNP / positive regulation of mRNA splicing, via spliceosome / U2 snRNP / RNA Polymerase II Transcription Termination / positive regulation of transcription by RNA polymerase III / U1 snRNP / U2-type prespliceosome / precatalytic spliceosome / positive regulation of transcription by RNA polymerase I / mRNA Splicing - Minor Pathway / spliceosomal complex assembly / mRNA 3'-splice site recognition / U5 snRNP / U2 snRNA binding / spliceosomal snRNP assembly / Cajal body / U1 snRNA binding / U4/U6 x U5 tri-snRNP complex / catalytic step 2 spliceosome / Gene and protein expression by JAK-STAT signaling after Interleukin-12 stimulation / mRNA Splicing - Major Pathway / RNA splicing / spliceosomal complex / double-strand break repair via homologous recombination / B-WICH complex positively regulates rRNA expression / mRNA splicing, via spliceosome / fibrillar center / positive regulation of neuron projection development / cytoplasmic ribonucleoprotein granule / mRNA processing / site of double-strand break / snRNP Assembly / SARS-CoV-2 modulates host translation machinery / spermatogenesis / RNA helicase activity / nuclear body / RNA helicase / nuclear speck / chromatin remodeling / mRNA binding / nucleolus / enzyme binding / positive regulation of transcription by RNA polymerase II / ATP hydrolysis activity / RNA binding / extracellular exosome / zinc ion binding / nucleoplasm / ATP binding / nucleus / cytosol / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | ||||||
生物種 | Homo sapiens (ヒト) | ||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 7.1 Å | ||||||
データ登録者 | Zhang, Z. / Will, C.L. / Bertram, K. / Luehrmann, R. / Stark, H. | ||||||
資金援助 | ドイツ, 1件
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引用 | ジャーナル: Nature / 年: 2020 タイトル: Molecular architecture of the human 17S U2 snRNP. 著者: Zhenwei Zhang / Cindy L Will / Karl Bertram / Olexandr Dybkov / Klaus Hartmuth / Dmitry E Agafonov / Romina Hofele / Henning Urlaub / Berthold Kastner / Reinhard Lührmann / Holger Stark / 要旨: The U2 small nuclear ribonucleoprotein (snRNP) has an essential role in the selection of the precursor mRNA branch-site adenosine, the nucleophile for the first step of splicing. Stable addition of ...The U2 small nuclear ribonucleoprotein (snRNP) has an essential role in the selection of the precursor mRNA branch-site adenosine, the nucleophile for the first step of splicing. Stable addition of U2 during early spliceosome formation requires the DEAD-box ATPase PRP5. Yeast U2 small nuclear RNA (snRNA) nucleotides that form base pairs with the branch site are initially sequestered in a branchpoint-interacting stem-loop (BSL), but whether the human U2 snRNA folds in a similar manner is unknown. The U2 SF3B1 protein, a common mutational target in haematopoietic cancers, contains a HEAT domain (SF3B1) with an open conformation in isolated SF3b, but a closed conformation in spliceosomes, which is required for stable interaction between U2 and the branch site. Here we report a 3D cryo-electron microscopy structure of the human 17S U2 snRNP at a core resolution of 4.1 Å and combine it with protein crosslinking data to determine the molecular architecture of this snRNP. Our structure reveals that SF3B1 interacts with PRP5 and TAT-SF1, and maintains its open conformation in U2 snRNP, and that U2 snRNA forms a BSL that is sandwiched between PRP5, TAT-SF1 and SF3B1. Thus, substantial remodelling of the BSL and displacement of BSL-interacting proteins must occur to allow formation of the U2-branch-site helix. Our studies provide a structural explanation of why TAT-SF1 must be displaced before the stable addition of U2 to the spliceosome, and identify RNP rearrangements facilitated by PRP5 that are required for stable interaction between U2 and the branch site. | ||||||
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構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
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PDB形式 | pdb6y53.ent.gz | 260.2 KB | 表示 | PDB形式 |
PDBx/mmJSON形式 | 6y53.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
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文書・要旨 | 6y53_validation.pdf.gz | 962.7 KB | 表示 | wwPDB検証レポート |
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文書・詳細版 | 6y53_full_validation.pdf.gz | 964.2 KB | 表示 | |
XML形式データ | 6y53_validation.xml.gz | 49.2 KB | 表示 | |
CIF形式データ | 6y53_validation.cif.gz | 84.1 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/y5/6y53 ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/y5/6y53 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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-要素
-U2 small nuclear ribonucleoprotein ... , 2種, 2分子 ab
#1: タンパク質 | 分子量: 28456.584 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P09661 |
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#2: タンパク質 | 分子量: 25524.367 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P08579 |
-Splicing factor 3B subunit ... , 4種, 4分子 zo8u
#3: タンパク質 | 分子量: 14606.900 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q9Y3B4 |
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#8: タンパク質 | 分子量: 44436.570 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q15427 |
#17: タンパク質 | 分子量: 100377.812 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q13435 |
#18: タンパク質 | 分子量: 146024.938 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: O75533 |
-タンパク質 , 3種, 3分子 pmq
#4: タンパク質 | 分子量: 117576.484 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q7L014, RNA helicase |
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#9: タンパク質 | 分子量: 24642.131 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P14678 |
#16: タンパク質 | 分子量: 85965.961 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: O43719 |
-Splicing factor 3A subunit ... , 3種, 3分子 679
#5: タンパク質 | 分子量: 88991.094 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q15459 |
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#6: タンパク質 | 分子量: 49327.355 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q15428 |
#7: タンパク質 | 分子量: 58934.844 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q12874 |
-Small nuclear ribonucleoprotein ... , 6種, 6分子 knhlji
#10: タンパク質 | 分子量: 8508.084 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P62308 |
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#11: タンパク質 | 分子量: 13310.653 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P62314 |
#12: タンパク質 | 分子量: 13551.928 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P62316 |
#13: タンパク質 | 分子量: 13940.308 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P62318 |
#14: タンパク質 | 分子量: 10817.601 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P62304 |
#15: タンパク質 | 分子量: 9734.171 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P62306 |
-RNA鎖 , 1種, 1分子 2
#19: RNA鎖 | 分子量: 60186.445 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: GenBank: 36516 |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: human 17S U2 snRNP / タイプ: COMPLEX / Entity ID: all / 由来: NATURAL |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
緩衝液 | pH: 7.9 |
試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
試料支持 | グリッドの材料: COPPER / グリッドのタイプ: Quantifoil R3.5/1 |
急速凍結 | 装置: FEI VITROBOT MARK I / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 100 % / 凍結前の試料温度: 277 K |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: SPOT SCAN |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / Cs: 0.01 mm / アライメント法: ZEMLIN TABLEAU |
試料ホルダ | 凍結剤: NITROGEN 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER |
撮影 | 平均露光時間: 1 sec. / 電子線照射量: 72 e/Å2 / 検出モード: INTEGRATING フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON III (4k x 4k) |
-解析
EMソフトウェア |
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CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | ||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 7.1 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 120070 / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||||||
原子モデル構築 | 空間: REAL |