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基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 6vbu | ||||||
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タイトル | Structure of the bovine BBSome complex | ||||||
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![]() | PROTEIN TRANSPORT / Cilia / ciliopathy / complex / membrane-protein transport | ||||||
機能・相同性 | ![]() establishment of anatomical structure orientation / BBSome-mediated cargo-targeting to cilium / multi-ciliated epithelial cell differentiation / receptor localization to non-motile cilium / BBSome / renal tubule development / camera-type eye photoreceptor cell differentiation / smoothened binding / establishment of planar polarity / photoreceptor connecting cilium ...establishment of anatomical structure orientation / BBSome-mediated cargo-targeting to cilium / multi-ciliated epithelial cell differentiation / receptor localization to non-motile cilium / BBSome / renal tubule development / camera-type eye photoreceptor cell differentiation / smoothened binding / establishment of planar polarity / photoreceptor connecting cilium / inner ear receptor cell stereocilium organization / patched binding / olfactory bulb development / establishment of epithelial cell apical/basal polarity / protein localization to cilium / non-motile cilium assembly / phosphatidylinositol-3-phosphate binding / regulation of stress fiber assembly / non-motile cilium / centrosome cycle / motile cilium / ciliary membrane / pericentriolar material / fat cell differentiation / axoneme / cilium assembly / intracellular transport / axon guidance / protein localization to plasma membrane / multicellular organism growth / centriolar satellite / fibrillar center / sensory perception of smell / intracellular protein localization / protein transport / regulation of protein localization / protein-macromolecule adaptor activity / RNA polymerase II-specific DNA-binding transcription factor binding / neuron projection / ciliary basal body / cilium / centrosome / membrane / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | ||||||
生物種 | ![]() ![]() | ||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.1 Å | ||||||
![]() | Singh, S.K. / Gui, M. / Koh, F. / Yip, M.C.J. / Brown, A. | ||||||
資金援助 | ![]()
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![]() | ![]() タイトル: Structure and activation mechanism of the BBSome membrane protein trafficking complex. 著者: Sandeep K Singh / Miao Gui / Fujiet Koh / Matthew Cj Yip / Alan Brown / ![]() 要旨: Bardet-Biedl syndrome (BBS) is a currently incurable ciliopathy caused by the failure to correctly establish or maintain cilia-dependent signaling pathways. Eight proteins associated with BBS ...Bardet-Biedl syndrome (BBS) is a currently incurable ciliopathy caused by the failure to correctly establish or maintain cilia-dependent signaling pathways. Eight proteins associated with BBS assemble into the BBSome, a key regulator of the ciliary membrane proteome. We report the electron cryomicroscopy (cryo-EM) structures of the native bovine BBSome in inactive and active states at 3.1 and 3.5 Å resolution, respectively. In the active state, the BBSome is bound to an Arf-family GTPase (ARL6/BBS3) that recruits the BBSome to ciliary membranes. ARL6 recognizes a composite binding site formed by BBS1 and BBS7 that is occluded in the inactive state. Activation requires an unexpected swiveling of the β-propeller domain of BBS1, the subunit most frequently implicated in substrate recognition, which widens a central cavity of the BBSome. Structural mapping of disease-causing mutations suggests that pathogenesis results from folding defects and the disruption of autoinhibition and activation. | ||||||
履歴 |
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構造の表示
ムービー |
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構造ビューア | 分子: ![]() ![]() |
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ダウンロードとリンク
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ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | ![]() | 678.2 KB | 表示 | ![]() |
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PDB形式 | ![]() | 544.1 KB | 表示 | ![]() |
PDBx/mmJSON形式 | ![]() | ツリー表示 | ![]() | |
その他 | ![]() |
-検証レポート
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
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-関連構造データ
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リンク
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集合体
登録構造単位 | ![]()
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1 |
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要素
-Bardet-Biedl syndrome ... , 7種, 7分子 0245789
#1: タンパク質 | 分子量: 8070.502 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
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#3: タンパク質 | 分子量: 79911.484 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#4: タンパク質 | 分子量: 58289.133 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#5: タンパク質 | 分子量: 38880.984 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#6: タンパク質 | 分子量: 80471.375 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#7: タンパク質 | 分子量: 56686.406 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#8: タンパク質 | 分子量: 99230.914 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
-タンパク質 / 非ポリマー , 2種, 3分子 1

#2: タンパク質 | 分子量: 64939.141 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
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#9: 化合物 |
-詳細
研究の焦点であるリガンドがあるか | N |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
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試料調製
構成要素 | 名称: Bovine BBSome complex / タイプ: COMPLEX / 詳細: Native BBSome complex isolated from bovine retina / Entity ID: #1-#8 / 由来: NATURAL | ||||||||||||||||||||||||||||||
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分子量 | 値: 0.5 MDa / 実験値: NO | ||||||||||||||||||||||||||||||
由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() | ||||||||||||||||||||||||||||||
緩衝液 | pH: 7.5 / 詳細: The buffer also contained 36 uM ARL6 and 1 mM GTP. | ||||||||||||||||||||||||||||||
緩衝液成分 |
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試料 | 濃度: 0.7 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES | ||||||||||||||||||||||||||||||
試料支持 | 詳細: The grids were glow discharged at 15 mA for 30 s with a PELCO easiGlow Glow Discharge Cleaning System. グリッドの材料: GOLD / グリッドのサイズ: 400 divisions/in. / グリッドのタイプ: Quantifoil R1.2/1.3 | ||||||||||||||||||||||||||||||
急速凍結 | 装置: FEI VITROBOT MARK II / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 100 % / 凍結前の試料温度: 293 K / 詳細: Grids were blotted for 2 s with a -2 offset. |
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電子顕微鏡撮影
実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: ![]() |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 倍率(公称値): 81000 X / 最大 デフォーカス(公称値): 2400 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 1100 nm / Cs: 2.7 mm / C2レンズ絞り径: 50 µm / アライメント法: COMA FREE |
試料ホルダ | 凍結剤: NITROGEN 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER |
撮影 | 平均露光時間: 4 sec. / 電子線照射量: 56 e/Å2 フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 BIOQUANTUM (6k x 4k) 撮影したグリッド数: 2 / 実像数: 9408 |
電子光学装置 | エネルギーフィルター名称: GIF Bioquantum / エネルギーフィルタースリット幅: 25 eV |
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解析
EMソフトウェア |
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CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
対称性 | 点対称性: C1 (非対称) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 3.1 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 152942 / アルゴリズム: BACK PROJECTION / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 | B value: 43.6 / プロトコル: OTHER / 空間: REAL / Target criteria: Correlation coefficient 詳細: During refinement, the resolution limit was set to 3.1 Angstrom. Secondary structure, Ramachandran and rotamer restraints were applied during refinement. |