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基本情報
| 登録情報 | データベース: PDB / ID: 6lxe | |||||||||||||||||||||
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| タイトル | DROSHA-DGCR8 complex | |||||||||||||||||||||
要素 |
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キーワード | HYDROLASE/RNA BINDING PROTEIN / Ribonuclease / RNA BINDING PROTEIN / HYDROLASE-RNA BINDING PROTEIN complex | |||||||||||||||||||||
| 機能・相同性 | 機能・相同性情報positive regulation of pre-miRNA processing / microprocessor complex / regulation of miRNA metabolic process / DEAD/H-box RNA helicase binding / protein-RNA adaptor activity / primary miRNA binding / ribonuclease III / regulation of regulatory T cell differentiation / Transcriptional Regulation by MECP2 / regulation of stem cell proliferation ...positive regulation of pre-miRNA processing / microprocessor complex / regulation of miRNA metabolic process / DEAD/H-box RNA helicase binding / protein-RNA adaptor activity / primary miRNA binding / ribonuclease III / regulation of regulatory T cell differentiation / Transcriptional Regulation by MECP2 / regulation of stem cell proliferation / primary miRNA processing / miRNA metabolic process / ribonuclease III activity / pre-miRNA processing / MicroRNA (miRNA) biogenesis / SMAD binding / R-SMAD binding / lipopolysaccharide binding / rRNA processing / double-stranded RNA binding / site of double-strand break / regulation of inflammatory response / defense response to Gram-negative bacterium / protein-macromolecule adaptor activity / postsynaptic density / defense response to Gram-positive bacterium / nuclear body / heme binding / DNA damage response / positive regulation of gene expression / nucleolus / glutamatergic synapse / protein homodimerization activity / RNA binding / nucleoplasm / metal ion binding / identical protein binding / nucleus / cytoplasm / cytosol 類似検索 - 分子機能 | |||||||||||||||||||||
| 生物種 | Homo sapiens (ヒト) | |||||||||||||||||||||
| 手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 4.2 Å | |||||||||||||||||||||
データ登録者 | Jin, W. / Wang, J. / Liu, C.P. / Wang, H.W. / Xu, R.M. | |||||||||||||||||||||
| 資金援助 | 中国, 6件
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引用 | ジャーナル: Mol Cell / 年: 2020タイトル: Structural Basis for pri-miRNA Recognition by Drosha. 著者: Wenxing Jin / Jia Wang / Chao-Pei Liu / Hong-Wei Wang / Rui-Ming Xu / ![]() 要旨: A commencing and critical step in miRNA biogenesis involves processing of pri-miRNAs in the nucleus by Microprocessor. An important, but not completely understood, question is how Drosha, the ...A commencing and critical step in miRNA biogenesis involves processing of pri-miRNAs in the nucleus by Microprocessor. An important, but not completely understood, question is how Drosha, the catalytic subunit of Microprocessor, binds pri-miRNAs and correctly specifies cleavage sites. Here we report the cryoelectron microscopy structures of the Drosha-DGCR8 complex with and without a pri-miRNA. The RNA-bound structure provides direct visualization of the tertiary structure of pri-miRNA and shows that a helix hairpin in the extended PAZ domain and the mobile basic (MB) helix in the RNase IIIa domain of Drosha coordinate to recognize the single-stranded to double-stranded junction of RNA, whereas the dsRNA binding domain makes extensive contacts with the RNA stem. Furthermore, the RNA-free structure reveals an autoinhibitory conformation of the PAZ helix hairpin. These findings provide mechanistic insights into pri-miRNA cleavage site selection and conformational dynamics governing pri-miRNA recognition by the catalytic component of Microprocessor. | |||||||||||||||||||||
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構造の表示
| ムービー |
ムービービューア |
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| 構造ビューア | 分子: Molmil Jmol/JSmol |
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ダウンロードとリンク
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ダウンロード
| PDBx/mmCIF形式 | 6lxe.cif.gz | 233.2 KB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
|---|---|---|---|---|
| PDB形式 | pdb6lxe.ent.gz | 156.8 KB | 表示 | PDB形式 |
| PDBx/mmJSON形式 | 6lxe.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
| その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
| アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/lx/6lxe ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/lx/6lxe | HTTPS FTP |
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-関連構造データ
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リンク
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集合体
| 登録構造単位 | ![]()
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| 1 |
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要素
| #1: タンパク質 | 分子量: 115390.578 Da / 分子数: 1 / 変異: E1045Q, E1222Q / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: DROSHA, RN3, RNASE3L, RNASEN発現宿主: ![]() 参照: UniProt: Q9NRR4, ribonuclease III | ||||
|---|---|---|---|---|---|
| #2: タンパク質 | 分子量: 86171.203 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: DGCR8, C22orf12, DGCRK6, LP4941発現宿主: ![]() 参照: UniProt: Q8WYQ5 #3: 化合物 | 研究の焦点であるリガンドがあるか | N | |
-実験情報
-実験
| 実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
|---|---|
| EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
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試料調製
| 構成要素 | 名称: Ternary complex of DROSHA-DGCR8 / タイプ: COMPLEX / Entity ID: #1-#2 / 由来: RECOMBINANT |
|---|---|
| 分子量 | 単位: KILODALTONS/NANOMETER / 実験値: NO |
| 由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
| 由来(組換発現) | 生物種: ![]() |
| 緩衝液 | pH: 8 |
| 試料 | 濃度: 0.3 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
| 急速凍結 | 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 100 % |
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電子顕微鏡撮影
| 実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
|---|---|
| 顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
| 電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
| 電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / C2レンズ絞り径: 50 µm |
| 撮影 | 電子線照射量: 50 e/Å2 フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) |
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解析
| ソフトウェア | 名称: PHENIX / バージョン: 1.16_3549: / 分類: 精密化 | ||||||||||||||||||||||||
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| EMソフトウェア |
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| CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | ||||||||||||||||||||||||
| 対称性 | 点対称性: C1 (非対称) | ||||||||||||||||||||||||
| 3次元再構成 | 解像度: 4.2 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 109333 / クラス平均像の数: 1 / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||||||||||
| 原子モデル構築 | プロトコル: RIGID BODY FIT | ||||||||||||||||||||||||
| 原子モデル構築 | PDB-ID: 5B16 Accession code: 5B16 / Source name: PDB / タイプ: experimental model | ||||||||||||||||||||||||
| 拘束条件 |
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Homo sapiens (ヒト)
中国, 6件
引用
UCSF Chimera











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