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基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 6gyl | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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タイトル | Structure of a yeast closed complex with distorted DNA (core CCdist) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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![]() | TRANSCRIPTION / rna polymerase II / transcription initiation / promoter dna opening | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
機能・相同性 | ![]() RNA polymerase II complex recruiting activity / transcription open complex formation at RNA polymerase II promoter / TFIIA-class transcription factor complex binding / RNA polymerase III transcription regulatory region sequence-specific DNA binding / RNA polymerase III preinitiation complex assembly / transcription factor TFIIIB complex / RNA polymerase I general transcription initiation factor binding / transcription factor TFIIE complex / regulation of transcription by RNA polymerase III / TFIIF-class transcription factor complex binding ...RNA polymerase II complex recruiting activity / transcription open complex formation at RNA polymerase II promoter / TFIIA-class transcription factor complex binding / RNA polymerase III transcription regulatory region sequence-specific DNA binding / RNA polymerase III preinitiation complex assembly / transcription factor TFIIIB complex / RNA polymerase I general transcription initiation factor binding / transcription factor TFIIE complex / regulation of transcription by RNA polymerase III / TFIIF-class transcription factor complex binding / transcriptional start site selection at RNA polymerase II promoter / RPB4-RPB7 complex / transcription factor TFIIF complex / transcription factor TFIIA complex / RNA polymerase I preinitiation complex assembly / nuclear-transcribed mRNA catabolic process, deadenylation-dependent decay / DNA binding, bending / RNA Polymerase I Transcription Initiation / transcription preinitiation complex / Processing of Capped Intron-Containing Pre-mRNA / RNA Polymerase III Transcription Initiation From Type 2 Promoter / RNA Pol II CTD phosphorylation and interaction with CE / Formation of the Early Elongation Complex / mRNA Capping / RNA polymerase II transcribes snRNA genes / termination of RNA polymerase II transcription / TP53 Regulates Transcription of DNA Repair Genes / RNA Polymerase II Promoter Escape / RNA Polymerase II Transcription Pre-Initiation And Promoter Opening / RNA Polymerase II Transcription Initiation / RNA Polymerase II Transcription Initiation And Promoter Clearance / termination of RNA polymerase III transcription / RNA polymerase II general transcription initiation factor activity / transcription factor TFIID complex / RNA Polymerase II Pre-transcription Events / RNA-templated transcription / Formation of TC-NER Pre-Incision Complex / positive regulation of nuclear-transcribed mRNA poly(A) tail shortening / : / transcription initiation at RNA polymerase III promoter / RNA Polymerase I Promoter Escape / termination of RNA polymerase I transcription / nucleolar large rRNA transcription by RNA polymerase I / Gap-filling DNA repair synthesis and ligation in TC-NER / transcription initiation at RNA polymerase I promoter / RNA polymerase II complex binding / Estrogen-dependent gene expression / maintenance of transcriptional fidelity during transcription elongation by RNA polymerase II / nuclear-transcribed mRNA catabolic process / protein phosphatase activator activity / positive regulation of translational initiation / Dual incision in TC-NER / transcription by RNA polymerase III / positive regulation of transcription initiation by RNA polymerase II / translesion synthesis / transcription by RNA polymerase I / RNA polymerase I complex / transcription elongation by RNA polymerase I / RNA polymerase III complex / RNA polymerase II core promoter sequence-specific DNA binding / transcription-coupled nucleotide-excision repair / RNA polymerase II, core complex / tRNA transcription by RNA polymerase III / RNA polymerase II preinitiation complex assembly / translation initiation factor binding / : / : / : / TBP-class protein binding / : / : / : / transcription coregulator activity / transcription initiation at RNA polymerase II promoter / DNA-templated transcription initiation / transcription elongation by RNA polymerase II / positive regulation of transcription elongation by RNA polymerase II / P-body / DNA-directed RNA polymerase activity / ribonucleoside binding / DNA-directed RNA polymerase / mRNA processing / cytoplasmic stress granule / disordered domain specific binding / peroxisome / ribosome biogenesis / single-stranded DNA binding / transcription regulator complex / DNA-binding transcription factor binding / RNA polymerase II-specific DNA-binding transcription factor binding / nucleic acid binding / transcription by RNA polymerase II / single-stranded RNA binding / protein dimerization activity / nucleotide binding / negative regulation of DNA-templated transcription / mRNA binding / chromatin binding / regulation of DNA-templated transcription / nucleolus 類似検索 - 分子機能 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
生物種 | ![]() ![]() | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 4.8 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
![]() | Dienemann, C. / Schwalb, B. / Schilbach, S. / Cramer, P. | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
資金援助 | ![]()
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![]() | ![]() タイトル: Promoter Distortion and Opening in the RNA Polymerase II Cleft. 著者: Christian Dienemann / Björn Schwalb / Sandra Schilbach / Patrick Cramer / ![]() 要旨: Transcription initiation requires opening of promoter DNA in the RNA polymerase II (Pol II) pre-initiation complex (PIC), but it remains unclear how this is achieved. Here we report the cryo-electron ...Transcription initiation requires opening of promoter DNA in the RNA polymerase II (Pol II) pre-initiation complex (PIC), but it remains unclear how this is achieved. Here we report the cryo-electron microscopic (cryo-EM) structure of a yeast PIC that contains underwound, distorted promoter DNA in the closed Pol II cleft. The DNA duplex axis is offset at the upstream edge of the initially melted DNA region (IMR) where DNA opening begins. Unstable IMRs are found in a subset of yeast promoters that we show can still initiate transcription after depletion of the transcription factor (TF) IIH (TFIIH) translocase Ssl2 (XPB in human) from the nucleus in vivo. PIC-induced DNA distortions may thus prime the IMR for melting and may explain how unstable IMRs that are predicted in promoters of Pol I and Pol III can open spontaneously. These results suggest that DNA distortion in the polymerase cleft is a general mechanism that contributes to promoter opening. | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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その他 | ![]() |
-検証レポート
文書・要旨 | ![]() | 1.6 MB | 表示 | ![]() |
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文書・詳細版 | ![]() | 1.7 MB | 表示 | |
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-関連構造データ
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集合体
登録構造単位 | ![]()
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1 |
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要素
-DNA-directed RNA polymerase II subunit ... , 7種, 7分子 ABCDGIK
#1: タンパク質 | 分子量: 191821.578 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() ![]() 参照: UniProt: P04050, DNA-directed RNA polymerase |
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#2: タンパク質 | 分子量: 138937.297 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() ![]() 参照: UniProt: P08518, DNA-directed RNA polymerase |
#3: タンパク質 | 分子量: 35330.457 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() ![]() 参照: UniProt: P16370 |
#4: タンパク質 | 分子量: 25451.191 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() ![]() 参照: UniProt: P20433 |
#7: タンパク質 | 分子量: 19081.053 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() ![]() 参照: UniProt: P34087 |
#9: タンパク質 | 分子量: 14308.161 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() ![]() 参照: UniProt: P27999 |
#11: タンパク質 | 分子量: 13633.493 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() ![]() 参照: UniProt: P38902 |
-DNA-directed RNA polymerases I, II, and III subunit ... , 5種, 5分子 EFHJL
#5: タンパク質 | 分子量: 25117.094 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() ![]() 参照: UniProt: P20434 |
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#6: タンパク質 | 分子量: 17931.834 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() ![]() 参照: UniProt: P20435 |
#8: タンパク質 | 分子量: 16525.363 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() ![]() 参照: UniProt: P20436 |
#10: タンパク質 | 分子量: 8290.732 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() ![]() 参照: UniProt: P22139 |
#12: タンパク質 | 分子量: 7729.969 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() ![]() 参照: UniProt: P40422 |
-タンパク質 , 2種, 2分子 MO
#13: タンパク質 | 分子量: 38257.340 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) ![]() ![]() 遺伝子: SUA7, YPR086W, P9513.4 / 発現宿主: ![]() ![]() |
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#15: タンパク質 | 分子量: 27042.275 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) ![]() ![]() 遺伝子: SPT15, BTF1, TBP1, YER148W / 発現宿主: ![]() ![]() |
-GAT1 promoter ... , 2種, 2分子 NT
#14: DNA鎖 | 分子量: 17129.941 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 由来: (合成) ![]() ![]() |
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#18: DNA鎖 | 分子量: 17388.111 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 由来: (合成) ![]() ![]() |
-Transcription initiation factor IIF subunit ... , 2種, 2分子 QR
#16: タンパク質 | 分子量: 82320.570 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) ![]() ![]() 遺伝子: TFG1, SSU71, YGR186W, G7526 / 発現宿主: ![]() ![]() |
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#17: タンパク質 | 分子量: 46684.492 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) ![]() ![]() 遺伝子: TFG2, YGR005C / 発現宿主: ![]() ![]() |
-Transcription initiation factor IIA ... , 2種, 2分子 UV
#19: タンパク質 | 分子量: 19432.029 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) ![]() ![]() 遺伝子: TOA1, YOR194C / 発現宿主: ![]() ![]() |
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#20: タンパク質 | 分子量: 14431.131 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) ![]() ![]() 遺伝子: TOA2, YKL058W / 発現宿主: ![]() ![]() |
-Transcription initiation factor IIE subunit ... , 2種, 2分子 WX
#21: タンパク質 | 分子量: 57538.461 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) ![]() ![]() 遺伝子: TFA1, YKL028W / 発現宿主: ![]() ![]() |
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#22: タンパク質 | 分子量: 37050.434 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) ![]() ![]() 遺伝子: TFA2, YKR062W / 発現宿主: ![]() ![]() |
-非ポリマー , 2種, 11分子 


#23: 化合物 | ChemComp-ZN / #24: 化合物 | ChemComp-MG / | |
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-詳細
Has protein modification | N |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
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試料調製
構成要素 |
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由来(天然) |
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由来(組換発現) |
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緩衝液 | pH: 7 | ||||||||||||||||||||||||||||||
試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES | ||||||||||||||||||||||||||||||
急速凍結 | 凍結剤: ETHANE |
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電子顕微鏡撮影
実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: ![]() |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD |
撮影 | 電子線照射量: 37 e/Å2 フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 QUANTUM (4k x 4k) |
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解析
ソフトウェア | 名称: PHENIX / バージョン: 1.13_2998: / 分類: 精密化 |
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EMソフトウェア | 名称: PHENIX / カテゴリ: モデル精密化 |
CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION |
対称性 | 点対称性: C1 (非対称) |
3次元再構成 | 解像度: 4.8 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 38000 / 対称性のタイプ: POINT |