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万見
- PDB-5lp3: Three tetrameric rings of Isoaspartyl Dipeptidase fitted in an EM... -

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基本情報

登録情報
データベース: PDB / ID: 5lp3
タイトルThree tetrameric rings of Isoaspartyl Dipeptidase fitted in an EM volume.
要素Isoaspartyl dipeptidase
キーワードHYDROLASE / Designed protein filament / Isoaspartyl Dipeptidase
機能・相同性
機能・相同性情報


加水分解酵素; プロテアーゼ; ペプチド結合加水分解酵素; オメガペプチターゼ / hydrolase activity, acting on carbon-nitrogen (but not peptide) bonds / beta-aspartyl-peptidase activity / metallopeptidase activity / proteolysis / zinc ion binding / identical protein binding / cytosol / cytoplasm
類似検索 - 分子機能
Isoaspartyl-dipeptidase / Peptidase M38, beta-aspartyl dipeptidase / : / Amidohydrolase family / Metal-dependent hydrolase, composite domain superfamily / Amidohydrolase-related / Metal-dependent hydrolase
類似検索 - ドメイン・相同性
Isoaspartyl dipeptidase
類似検索 - 構成要素
生物種Escherichia coli (大腸菌)
手法電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 10.5 Å
データ登録者Garcia-Seisdedos, H. / Empereur-Mot, C. / Elad, N. / Levy, E.D.
引用ジャーナル: Nature / 年: 2017
タイトル: Proteins evolve on the edge of supramolecular self-assembly.
著者: Hector Garcia-Seisdedos / Charly Empereur-Mot / Nadav Elad / Emmanuel D Levy /
要旨: The self-association of proteins into symmetric complexes is ubiquitous in all kingdoms of life. Symmetric complexes possess unique geometric and functional properties, but their internal symmetry ...The self-association of proteins into symmetric complexes is ubiquitous in all kingdoms of life. Symmetric complexes possess unique geometric and functional properties, but their internal symmetry can pose a risk. In sickle-cell disease, the symmetry of haemoglobin exacerbates the effect of a mutation, triggering assembly into harmful fibrils. Here we examine the universality of this mechanism and its relation to protein structure geometry. We introduced point mutations solely designed to increase surface hydrophobicity among 12 distinct symmetric complexes from Escherichia coli. Notably, all responded by forming supramolecular assemblies in vitro, as well as in vivo upon heterologous expression in Saccharomyces cerevisiae. Remarkably, in four cases, micrometre-long fibrils formed in vivo in response to a single point mutation. Biophysical measurements and electron microscopy revealed that mutants self-assembled in their folded states and so were not amyloid-like. Structural examination of 73 mutants identified supramolecular assembly hot spots predictable by geometry. A subsequent structural analysis of 7,471 symmetric complexes showed that geometric hot spots were buffered chemically by hydrophilic residues, suggesting a mechanism preventing mis-assembly of these regions. Thus, point mutations can frequently trigger folded proteins to self-assemble into higher-order structures. This potential is counterbalanced by negative selection and can be exploited to design nanomaterials in living cells.
履歴
登録2016年8月11日登録サイト: PDBE / 処理サイト: PDBE
改定 1.02017年7月26日Provider: repository / タイプ: Initial release
改定 1.12017年8月16日Group: Database references / カテゴリ: citation / citation_author
Item: _citation.country / _citation.journal_abbrev ..._citation.country / _citation.journal_abbrev / _citation.journal_id_ASTM / _citation.journal_id_CSD / _citation.journal_id_ISSN / _citation.pdbx_database_id_DOI / _citation.pdbx_database_id_PubMed / _citation.title / _citation.year / _citation_author.name
改定 1.22017年8月23日Group: Database references / カテゴリ: citation
Item: _citation.journal_volume / _citation.page_first / _citation.page_last

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構造の表示

ムービー
  • 登録構造単位
  • Jmolによる作画
  • ダウンロード
  • EMマップとの重ね合わせ
  • マップデータ: EMDB-4094
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
ムービービューア
構造ビューア分子:
MolmilJmol/JSmol

ダウンロードとリンク

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集合体

登録構造単位
B: Isoaspartyl dipeptidase
C: Isoaspartyl dipeptidase
D: Isoaspartyl dipeptidase
E: Isoaspartyl dipeptidase
A: Isoaspartyl dipeptidase
F: Isoaspartyl dipeptidase
G: Isoaspartyl dipeptidase
H: Isoaspartyl dipeptidase
I: Isoaspartyl dipeptidase
J: Isoaspartyl dipeptidase
K: Isoaspartyl dipeptidase
L: Isoaspartyl dipeptidase


分子量 (理論値)分子数
合計 (水以外)494,01312
ポリマ－494,01312
非ポリマー00
水00
1


  • 登録構造と同一
  • ソフトウェアが定義した集合体
タイプ名称対称操作数
identity operation1_5551
Buried area37540 Å2
ΔGint-188 kcal/mol
Surface area140370 Å2
手法PISA

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要素

#1: タンパク質
Isoaspartyl dipeptidase


分子量: 41167.758 Da / 分子数: 12 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Escherichia coli (大腸菌) / 株: K12 / 遺伝子: iadA, yjiF, b4328, JW4291 / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌)
参照: UniProt: P39377, 加水分解酵素; プロテアーゼ; ペプチド結合加水分解酵素; オメガペプチターゼ

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実験情報

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実験

実験手法: 電子顕微鏡法
EM実験試料の集合状態: FILAMENT / ３次元再構成法: 単粒子再構成法

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試料調製

構成要素名称: Isoaspartyl Dipeptidase / タイプ: ORGANELLE OR CELLULAR COMPONENT / Entity ID: #1-#3 / 由来: RECOMBINANT
分子量実験値: NO
由来(天然)生物種: Escherichia coli (大腸菌) / 株: K12
由来(組換発現)生物種: Escherichia coli 'BL21-Gold(DE3)pLysS AG' (大腸菌)
プラスミド: pET-30a(+)
緩衝液pH: 7.5
緩衝液成分
ID濃度名称式Buffer-ID
120 mMTris-HClC4H12CINO31
2100 mMSodium ChlorideNaCl1
試料濃度: 0.2 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES
試料支持グリッドの材料: COPPER / グリッドのサイズ: 300 divisions/in. / グリッドのタイプ: Quantifoil
急速凍結装置: LEICA EM GP / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 95 % / 凍結前の試料温度: 297 K

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電子顕微鏡撮影

顕微鏡モデル: FEI TECNAI 20
電子銃電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 200 kV / 照射モード: FLOOD BEAM
電子レンズモード: BRIGHT FIELD / C2レンズ絞り径: 30 µm
撮影電子線照射量: 32 e/Å2
フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k)

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解析

EMソフトウェア
ID名称バージョンカテゴリ
1EMAN2.1粒子像選択
2RELION1.4画像取得
3EMAN2.1画像取得
5CTFFIND3CTF補正
8UCSF Chimera1.10.2モデルフィッティング
10RELION1.4初期オイラー角割当
11RELION1.4最終オイラー角割当
12RELION1.4分類
13RELION1.4３次元再構成
CTF補正タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION
粒子像の選択選択した粒子像数: 38786
詳細: Particles were manually selected from filaments only
対称性点対称性: D4 (2回x4回 2面回転対称)
3次元再構成解像度: 10.5 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 17277 / 詳細: 2 CLASSES WERE MERGED IN THE FINAL RECONSTRUCTION / 対称性のタイプ: POINT
原子モデル構築プロトコル: RIGID BODY FIT

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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