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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 5fna | ||||||
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タイトル | Cryo-EM reconstruction of caspase-1 CARD | ||||||
要素 | Caspase-1 | ||||||
キーワード | HYDROLASE / CARD / INFLAMMASOME / FILAMENT / SIGNALOSOME / HELICAL RECONSTRUCTION / DEATH DOMAIN | ||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 aldose 1-epimerase activity / galactose catabolic process via UDP-galactose / glucose metabolic process / carbohydrate binding / DNA damage response 類似検索 - 分子機能 | ||||||
生物種 | Homo sapiens (ヒト) | ||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / らせん対称体再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 4.8 Å | ||||||
データ登録者 | Li, Y. / Lu, A. / Schmidt, F.I. / Yin, Q. / Chen, S. / Fu, T.M. / Tong, A.B. / Ploegh, H.L. / Mao, Y. / Wu, H. | ||||||
引用 | ジャーナル: Nat Struct Mol Biol / 年: 2016 タイトル: Molecular basis of caspase-1 polymerization and its inhibition by a new capping mechanism. 著者: Alvin Lu / Yang Li / Florian I Schmidt / Qian Yin / Shuobing Chen / Tian-Min Fu / Alexander B Tong / Hidde L Ploegh / Youdong Mao / Hao Wu / 要旨: Inflammasomes are cytosolic caspase-1-activation complexes that sense intrinsic and extrinsic danger signals, and trigger inflammatory responses and pyroptotic cell death. Homotypic interactions ...Inflammasomes are cytosolic caspase-1-activation complexes that sense intrinsic and extrinsic danger signals, and trigger inflammatory responses and pyroptotic cell death. Homotypic interactions among Pyrin domains and caspase recruitment domains (CARDs) in inflammasome-complex components mediate oligomerization into filamentous assemblies. Several cytosolic proteins consisting of only interaction domains exert inhibitory effects on inflammasome assembly. In this study, we determined the structure of the human caspase-1 CARD domain (caspase-1(CARD)) filament by cryo-electron microscopy and investigated the biophysical properties of two caspase-1-like CARD-only proteins: human inhibitor of CARD (INCA or CARD17) and ICEBERG (CARD18). Our results reveal that INCA caps caspase-1 filaments, thereby exerting potent inhibition with low-nanomolar Ki on caspase-1(CARD) polymerization in vitro and inflammasome activation in cells. Whereas caspase-1(CARD) uses six complementary surfaces of three types for filament assembly, INCA is defective in two of the six interfaces and thus terminates the caspase-1 filament. | ||||||
履歴 |
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-構造の表示
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構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 5fna.cif.gz | 130 KB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb5fna.ent.gz | 103.8 KB | 表示 | PDB形式 |
PDBx/mmJSON形式 | 5fna.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
文書・要旨 | 5fna_validation.pdf.gz | 851 KB | 表示 | wwPDB検証レポート |
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文書・詳細版 | 5fna_full_validation.pdf.gz | 880.2 KB | 表示 | |
XML形式データ | 5fna_validation.xml.gz | 24.8 KB | 表示 | |
CIF形式データ | 5fna_validation.cif.gz | 36.2 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/fn/5fna ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/fn/5fna | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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-要素
#1: タンパク質 | 分子量: 9590.171 Da / 分子数: 8 / 断片: CARD DOMAIN / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: CASP1, IL1BC, IL1BCE / プラスミド: PDB-HIS-MBP / 発現宿主: ESCHERICHIA COLI (大腸菌) / 株 (発現宿主): BL21(DE3) / 参照: UniProt: P29466, EC: 3.4.22.36 |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: FILAMENT / 3次元再構成法: らせん対称体再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: CASPASE-1 CARD / タイプ: COMPLEX |
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緩衝液 | 名称: 20 MM SODIUM HEPES, 150 MM NACL, 2 MM DTT / pH: 8 / 詳細: 20 MM SODIUM HEPES, 150 MM NACL, 2 MM DTT |
試料 | 濃度: 0.2 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
試料支持 | 詳細: HOLEY CARBON |
急速凍結 | 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE / 詳細: LIQUID ETHANE |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Talos Arctica / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TECNAI ARCTICA / 日付: 2015年2月2日 |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 200 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 倍率(補正後): 28736 X / 最大 デフォーカス(公称値): 6000 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 1000 nm / Cs: 2.7 mm |
撮影 | 電子線照射量: 20 e/Å2 フィルム・検出器のモデル: DIRECT ELECTRON DE-16 (4k x 4k) |
画像スキャン | デジタル画像の数: 200 |
-解析
EMソフトウェア |
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CTF補正 | 詳細: EACH MICROGRAPH | ||||||||||||
3次元再構成 | 手法: IHRSR / 解像度: 4.8 Å / 粒子像の数: 69222 / ピクセルサイズ(実測値): 0.87 Å 詳細: SUBMISSION BASED ON EXPERIMENTAL DATA FROM EMDB EMD-3241. (DEPOSITION ID: 14034). 対称性のタイプ: HELICAL | ||||||||||||
原子モデル構築 | プロトコル: OTHER / 空間: REAL / 詳細: REFINEMENT PROTOCOL--EM | ||||||||||||
精密化 | 最高解像度: 4.8 Å | ||||||||||||
精密化ステップ | サイクル: LAST / 最高解像度: 4.8 Å
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