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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 4v1o | |||||||||
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タイトル | Architecture of the RNA polymerase II-Mediator core transcription initiation complex | |||||||||
要素 |
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キーワード | TRANSCRIPTION / TRANSCRIPTION INITIATION / RNA POLYMERASE II / GENERAL TRANSCRIPTION FACTORS | |||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 RNA polymerase II complex recruiting activity / TFIIA-class transcription factor complex binding / transcription factor TFIIIB complex / RNA polymerase III preinitiation complex assembly / RNA polymerase III transcription regulatory region sequence-specific DNA binding / TFIIH-class transcription factor complex binding / core mediator complex / regulation of transcription by RNA polymerase III / RNA polymerase I general transcription initiation factor binding / negative regulation of ribosomal protein gene transcription by RNA polymerase II ...RNA polymerase II complex recruiting activity / TFIIA-class transcription factor complex binding / transcription factor TFIIIB complex / RNA polymerase III preinitiation complex assembly / RNA polymerase III transcription regulatory region sequence-specific DNA binding / TFIIH-class transcription factor complex binding / core mediator complex / regulation of transcription by RNA polymerase III / RNA polymerase I general transcription initiation factor binding / negative regulation of ribosomal protein gene transcription by RNA polymerase II / transcription open complex formation at RNA polymerase II promoter / transcriptional start site selection at RNA polymerase II promoter / RPB4-RPB7 complex / transcription factor TFIIF complex / mediator complex / transcription factor TFIIA complex / RNA polymerase I preinitiation complex assembly / transcription preinitiation complex / DNA binding, bending / RNA Polymerase I Transcription Initiation / Processing of Capped Intron-Containing Pre-mRNA / nuclear-transcribed mRNA catabolic process, deadenylation-dependent decay / RNA Polymerase III Transcription Initiation From Type 2 Promoter / RNA Pol II CTD phosphorylation and interaction with CE / Formation of the Early Elongation Complex / mRNA Capping / RNA polymerase II transcribes snRNA genes / TP53 Regulates Transcription of DNA Repair Genes / termination of RNA polymerase II transcription / transcription factor TFIID complex / RNA Polymerase II Promoter Escape / RNA Polymerase II Transcription Pre-Initiation And Promoter Opening / RNA Polymerase II Transcription Initiation / RNA Polymerase II Transcription Initiation And Promoter Clearance / RNA polymerase II general transcription initiation factor activity / RNA-templated transcription / RNA Polymerase II Pre-transcription Events / termination of RNA polymerase III transcription / Formation of TC-NER Pre-Incision Complex / transcription initiation at RNA polymerase III promoter / maintenance of transcriptional fidelity during transcription elongation by RNA polymerase II / termination of RNA polymerase I transcription / RNA Polymerase I Promoter Escape / nucleolar large rRNA transcription by RNA polymerase I / RNA polymerase II complex binding / Gap-filling DNA repair synthesis and ligation in TC-NER / transcription by RNA polymerase I / transcription initiation at RNA polymerase I promoter / Estrogen-dependent gene expression / TFIID-class transcription factor complex binding / nuclear-transcribed mRNA catabolic process / positive regulation of nuclear-transcribed mRNA poly(A) tail shortening / transcription by RNA polymerase III / RNA polymerase II activity / Dual incision in TC-NER / transcription elongation by RNA polymerase I / positive regulation of transcription initiation by RNA polymerase II / transcription-coupled nucleotide-excision repair / tRNA transcription by RNA polymerase III / RNA polymerase II core promoter sequence-specific DNA binding / RNA polymerase I activity / RNA polymerase I complex / RNA polymerase III complex / positive regulation of translational initiation / translesion synthesis / cellular response to nutrient levels / RNA polymerase II, core complex / RNA polymerase II preinitiation complex assembly / translation initiation factor binding / TBP-class protein binding / DNA-templated transcription initiation / transcription initiation at RNA polymerase II promoter / positive regulation of transcription elongation by RNA polymerase II / transcription elongation by RNA polymerase II / transcription coregulator activity / P-body / ribonucleoside binding / DNA-directed 5'-3' RNA polymerase activity / DNA-directed RNA polymerase / cytoplasmic stress granule / mRNA processing / transcription corepressor activity / disordered domain specific binding / peroxisome / ribosome biogenesis / single-stranded DNA binding / cellular response to heat / protein-macromolecule adaptor activity / DNA-binding transcription factor binding / RNA polymerase II-specific DNA-binding transcription factor binding / transcription regulator complex / transcription by RNA polymerase II / nucleic acid binding / transcription coactivator activity / single-stranded RNA binding / protein dimerization activity / RNA polymerase II cis-regulatory region sequence-specific DNA binding / protein domain specific binding / negative regulation of DNA-templated transcription / mRNA binding 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | SACCHAROMYCES CEREVISIAE (パン酵母) SACCHAROMYCES MIKATAE (酵母) SYNTHETIC CONSTRUCT (人工物) | |||||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 9.7 Å | |||||||||
データ登録者 | Plaschka, C. / Lariviere, L. / Wenzeck, L. / Hemann, M. / Tegunov, D. / Petrotchenko, E.V. / Borchers, C.H. / Baumeister, W. / Herzog, F. / Villa, E. / Cramer, P. | |||||||||
引用 | ジャーナル: Nature / 年: 2015 タイトル: Architecture of the RNA polymerase II-Mediator core initiation complex. 著者: C Plaschka / L Larivière / L Wenzeck / M Seizl / M Hemann / D Tegunov / E V Petrotchenko / C H Borchers / W Baumeister / F Herzog / E Villa / P Cramer / 要旨: The conserved co-activator complex Mediator enables regulated transcription initiation by RNA polymerase (Pol) II. Here we reconstitute an active 15-subunit core Mediator (cMed) comprising all ...The conserved co-activator complex Mediator enables regulated transcription initiation by RNA polymerase (Pol) II. Here we reconstitute an active 15-subunit core Mediator (cMed) comprising all essential Mediator subunits from Saccharomyces cerevisiae. The cryo-electron microscopic structure of cMed bound to a core initiation complex was determined at 9.7 Å resolution. cMed binds Pol II around the Rpb4-Rpb7 stalk near the carboxy-terminal domain (CTD). The Mediator head module binds the Pol II dock and the TFIIB ribbon and stabilizes the initiation complex. The Mediator middle module extends to the Pol II foot with a 'plank' that may influence polymerase conformation. The Mediator subunit Med14 forms a 'beam' between the head and middle modules and connects to the tail module that is predicted to bind transcription activators located on upstream DNA. The Mediator 'arm' and 'hook' domains contribute to a 'cradle' that may position the CTD and TFIIH kinase to stimulate Pol II phosphorylation. | |||||||||
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構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
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PDBx/mmCIF形式 | 4v1o.cif.gz | 1.2 MB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb4v1o.ent.gz | 923.9 KB | 表示 | PDB形式 |
PDBx/mmJSON形式 | 4v1o.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
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-検証レポート
文書・要旨 | 4v1o_validation.pdf.gz | 1 MB | 表示 | wwPDB検証レポート |
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文書・詳細版 | 4v1o_full_validation.pdf.gz | 1.2 MB | 表示 | |
XML形式データ | 4v1o_validation.xml.gz | 156.7 KB | 表示 | |
CIF形式データ | 4v1o_validation.cif.gz | 248.4 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/v1/4v1o ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/v1/4v1o | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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-要素
-DNA-DIRECTED RNA POLYMERASE II SUBUNIT ... , 7種, 7分子 ABCDGIK
#1: タンパク質 | 分子量: 191821.578 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) SACCHAROMYCES CEREVISIAE (パン酵母) / 株: BJ5464 RPB3 HIS-BIO / 参照: UniProt: P04050, DNA-directed RNA polymerase |
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#2: タンパク質 | 分子量: 138937.297 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) SACCHAROMYCES CEREVISIAE (パン酵母) / 株: BJ5464 RPB3 HIS-BIO / 参照: UniProt: P08518, DNA-directed RNA polymerase |
#3: タンパク質 | 分子量: 35330.457 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) SACCHAROMYCES CEREVISIAE (パン酵母) / 株: BJ5464 RPB3 HIS-BIO / 参照: UniProt: P16370 |
#4: タンパク質 | 分子量: 25451.191 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) SACCHAROMYCES CEREVISIAE (パン酵母) / 株: BJ5464 RPB3 HIS-BIO / 参照: UniProt: P20433 |
#7: タンパク質 | 分子量: 19081.053 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) SACCHAROMYCES CEREVISIAE (パン酵母) / 株: BJ5464 RPB3 HIS-BIO / 参照: UniProt: P34087 |
#9: タンパク質 | 分子量: 14308.161 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) SACCHAROMYCES CEREVISIAE (パン酵母) / 株: BJ5464 RPB3 HIS-BIO / 参照: UniProt: P27999 |
#11: タンパク質 | 分子量: 13633.493 Da / 分子数: 1 / Fragment: 2.7.7.6 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) SACCHAROMYCES CEREVISIAE (パン酵母) / 株: BJ5464 RPB3 HIS-BIO / 参照: UniProt: P38902 |
-DNA-DIRECTED RNA POLYMERASES I, II, AND III SUBUNIT RPABC ... , 5種, 5分子 EFHJL
#5: タンパク質 | 分子量: 25117.094 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) SACCHAROMYCES CEREVISIAE (パン酵母) / 株: BJ5464 RPB3 HIS-BIO / 参照: UniProt: P20434 |
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#6: タンパク質 | 分子量: 17931.834 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) SACCHAROMYCES CEREVISIAE (パン酵母) / 株: BJ5464 RPB3 HIS-BIO / 参照: UniProt: P20435 |
#8: タンパク質 | 分子量: 16525.363 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) SACCHAROMYCES CEREVISIAE (パン酵母) / 株: BJ5464 RPB3 HIS-BIO / 参照: UniProt: P20436 |
#10: タンパク質 | 分子量: 8290.732 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) SACCHAROMYCES CEREVISIAE (パン酵母) / 株: BJ5464 RPB3 HIS-BIO / 参照: UniProt: P22139 |
#12: タンパク質 | 分子量: 7729.969 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) SACCHAROMYCES CEREVISIAE (パン酵母) 発現宿主: ESCHERICHIA COLI (大腸菌) / 参照: UniProt: P40422 |
-タンパク質 , 2種, 2分子 MO
#13: タンパク質 | 分子量: 38257.340 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) SACCHAROMYCES CEREVISIAE (パン酵母) 株: BJ5464 RPB3 HIS-BIO / 発現宿主: ESCHERICHIA COLI (大腸菌) / 参照: UniProt: P29055 |
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#15: タンパク質 | 分子量: 20251.949 Da / 分子数: 1 / Fragment: RESIDUES 61-240 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) SACCHAROMYCES CEREVISIAE (パン酵母) 発現宿主: ESCHERICHIA COLI (大腸菌) / 参照: UniProt: P13393 |
-DNA鎖 , 2種, 2分子 NT
#14: DNA鎖 | 分子量: 15449.937 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 由来: (合成) SYNTHETIC CONSTRUCT (人工物) |
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#20: DNA鎖 | 分子量: 17812.441 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 由来: (合成) SYNTHETIC CONSTRUCT (人工物) |
-RNA鎖 , 1種, 1分子 P
#16: RNA鎖 | 分子量: 1860.173 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 由来: (合成) SYNTHETIC CONSTRUCT (人工物) |
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-TRANSCRIPTION INITIATION FACTOR IIF SUBUNIT ... , 2種, 2分子 QR
#17: タンパク質 | 分子量: 82366.148 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) SACCHAROMYCES MIKATAE (酵母) / 発現宿主: ESCHERICHIA COLI (大腸菌) / 参照: UniProt: A0A0H2UKZ8*PLUS |
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#18: タンパク質 | 分子量: 37918.438 Da / 分子数: 1 / Fragment: RESIDUES 1-140,210-400 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) SACCHAROMYCES CEREVISIAE (パン酵母) 発現宿主: ESCHERICHIA COLI (大腸菌) / 参照: UniProt: P41896, DNA helicase |
-MEDIATOR OF RNA POLYMERASE II TRANSCRIPTION SUBUNIT ... , 7種, 7分子 SUVWXYZ
#19: タンパク質 | 分子量: 32844.746 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) SACCHAROMYCES CEREVISIAE (パン酵母) 発現宿主: ESCHERICHIA COLI (大腸菌) / 参照: UniProt: P38782 |
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#21: タンパク質 | 分子量: 25166.039 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) SACCHAROMYCES CEREVISIAE (パン酵母) 発現宿主: ESCHERICHIA COLI (大腸菌) / 参照: UniProt: P38304 |
#22: タンパク質 | 分子量: 13324.189 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) SACCHAROMYCES CEREVISIAE (パン酵母) 発現宿主: ESCHERICHIA COLI (大腸菌) / 参照: UniProt: Q99278 |
#23: タンパク質 | 分子量: 78508.695 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) SACCHAROMYCES CEREVISIAE (パン酵母) 発現宿主: ESCHERICHIA COLI (大腸菌) / 参照: UniProt: P32569 |
#24: タンパク質 | 分子量: 34316.539 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) SACCHAROMYCES CEREVISIAE (パン酵母) 発現宿主: ESCHERICHIA COLI (大腸菌) / 参照: UniProt: P32585 |
#25: タンパク質 | 分子量: 22786.869 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) SACCHAROMYCES CEREVISIAE (パン酵母) 発現宿主: ESCHERICHIA COLI (大腸菌) / 参照: UniProt: P34162 |
#26: タンパク質 | 分子量: 13744.537 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) SACCHAROMYCES CEREVISIAE (パン酵母) 発現宿主: ESCHERICHIA COLI (大腸菌) / 参照: UniProt: P32570 |
-非ポリマー , 2種, 10分子
#27: 化合物 | ChemComp-ZN / #28: 化合物 | ChemComp-MG / | |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: CITC-CMED / タイプ: COMPLEX |
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緩衝液 | 名称: 25 MM HEPES-KOH PH 7.5, 180 MM POTASSIUM ACETATE, 5 % GLYCEROL, 5 MM DTT pH: 7.5 詳細: 25 MM HEPES-KOH PH 7.5, 180 MM POTASSIUM ACETATE, 5 % GLYCEROL, 5 MM DTT |
試料 | 濃度: 0.15 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
試料支持 | 詳細: CARBON |
急速凍結 | 凍結剤: ETHANE 詳細: GRIDS WERE GLOW- DISCHARGED FOR 20 S BEFORE DEPOSITION OF 4 MICROLITERS SAMPLE AND INCUBATED FOR 30 S. GRIDS WERE WASHED TWICE WITH 4 MICROLITERS DISTILLED WATER, BLOTTED, AND VITRIFIED BY ...詳細: GRIDS WERE GLOW- DISCHARGED FOR 20 S BEFORE DEPOSITION OF 4 MICROLITERS SAMPLE AND INCUBATED FOR 30 S. GRIDS WERE WASHED TWICE WITH 4 MICROLITERS DISTILLED WATER, BLOTTED, AND VITRIFIED BY PLUNGING INTO LIQUID ETHANE WITH A MANUAL PLUNGER. |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS / 日付: 2013年8月1日 |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 倍率(公称値): 37000 X / 倍率(補正後): 37169 X / 最大 デフォーカス(公称値): 2500 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 1000 nm / Cs: 2 mm |
撮影 | 電子線照射量: 25 e/Å2 / フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 (4k x 4k) |
放射波長 | 相対比: 1 |
-解析
EMソフトウェア | 名称: RELION / バージョン: 1.2 / カテゴリ: 3次元再構成 | ||||||||||||
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CTF補正 | 詳細: EACH PARTICLE | ||||||||||||
対称性 | 点対称性: C1 (非対称) | ||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 9.7 Å / 粒子像の数: 3267 / ピクセルサイズ(公称値): 1.35 Å / ピクセルサイズ(実測値): 1.35 Å 詳細: SUBMISSION BASED ON EXPERIMENTAL DATA FROM EMDB EMD -2786. (DEPOSITION ID: 12827). 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||
原子モデル構築 | プロトコル: RIGID BODY FIT / 空間: REAL / Target criteria: Cross-correlation coefficient / 詳細: METHOD--RIGID BODY | ||||||||||||
精密化 | 最高解像度: 9.7 Å | ||||||||||||
精密化ステップ | サイクル: LAST / 最高解像度: 9.7 Å
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