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基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 3flo | ||||||
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タイトル | Crystal structure of the carboxyl-terminal domain of yeast DNA polymerase alpha in complex with its B subunit | ||||||
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![]() | TRANSFERASE / Protein-protein complex / phosphoesterase fold / OB fold / Zinc-binding motif / DNA replication / Nucleus / Phosphoprotein / DNA-binding / DNA-directed DNA polymerase / Nucleotidyltransferase | ||||||
機能・相同性 | ![]() Inhibition of replication initiation of damaged DNA by RB1/E2F1 / H3-H4 histone complex chaperone activity / DNA replication initiation / RNA-templated DNA biosynthetic process / Processive synthesis on the lagging strand / Removal of the Flap Intermediate / Polymerase switching / premeiotic DNA replication / alpha DNA polymerase:primase complex / Activation of the pre-replicative complex ...Inhibition of replication initiation of damaged DNA by RB1/E2F1 / H3-H4 histone complex chaperone activity / DNA replication initiation / RNA-templated DNA biosynthetic process / Processive synthesis on the lagging strand / Removal of the Flap Intermediate / Polymerase switching / premeiotic DNA replication / alpha DNA polymerase:primase complex / Activation of the pre-replicative complex / telomere capping / lagging strand elongation / mitotic DNA replication initiation / DNA biosynthetic process / DNA synthesis involved in DNA repair / leading strand elongation / DNA replication origin binding / DNA replication initiation / replication fork / nuclear envelope / double-strand break repair / single-stranded DNA binding / 4 iron, 4 sulfur cluster binding / DNA-directed DNA polymerase / DNA-directed DNA polymerase activity / DNA replication / nucleotide binding / chromatin binding / mitochondrion / DNA binding / zinc ion binding / nucleus 類似検索 - 分子機能 | ||||||
生物種 | ![]() ![]() | ||||||
手法 | ![]() ![]() ![]() | ||||||
![]() | Klinge, S.N. / Pellegrini, L. | ||||||
![]() | ![]() タイトル: 3D architecture of DNA Pol alpha reveals the functional core of multi-subunit replicative polymerases. 著者: Sebastian Klinge / Rafael Núñez-Ramírez / Oscar Llorca / Luca Pellegrini / ![]() 要旨: Eukaryotic DNA replication requires the coordinated activity of the multi-subunit DNA polymerases: Pol alpha, Pol delta and Pol epsilon. The conserved catalytic and regulatory B subunits associate in ...Eukaryotic DNA replication requires the coordinated activity of the multi-subunit DNA polymerases: Pol alpha, Pol delta and Pol epsilon. The conserved catalytic and regulatory B subunits associate in a constitutive heterodimer that represents the functional core of all three replicative polymerases. Here, we combine X-ray crystallography and electron microscopy (EM) to describe subunit interaction and 3D architecture of heterodimeric yeast Pol alpha. The crystal structure of the C-terminal domain (CTD) of the catalytic subunit bound to the B subunit illustrates a conserved mechanism of accessory factor recruitment by replicative polymerases. The EM reconstructions of Pol alpha reveal a bilobal shape with separate catalytic and regulatory modules. Docking of the B-CTD complex in the EM reconstruction shows that the B subunit is tethered to the polymerase domain through a structured but flexible linker. Our combined findings provide a structural template for the common functional architecture of the three major replicative DNA polymerases. | ||||||
履歴 |
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構造の表示
構造ビューア | 分子: ![]() ![]() |
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PDBx/mmCIF形式 | ![]() | 1016.9 KB | 表示 | ![]() |
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PDB形式 | ![]() | 855.8 KB | 表示 | ![]() |
PDBx/mmJSON形式 | ![]() | ツリー表示 | ![]() | |
その他 | ![]() |
-検証レポート
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
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-関連構造データ
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リンク
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集合体
登録構造単位 | ![]()
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単位格子 |
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非結晶学的対称性 (NCS) | NCSドメイン:
NCSドメイン領域:
NCSアンサンブル:
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要素
-タンパク質 , 1種, 4分子 ACEG
#1: タンパク質 | 分子量: 51962.004 Da / 分子数: 4 / 断片: UNP residues 246-705 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) ![]() ![]() 遺伝子: POL12 / プラスミド: RSF1-Duet / 発現宿主: ![]() ![]() |
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-DNA polymerase alpha catalytic subunit ... , 2種, 8分子 IJKLBDFH
#2: タンパク質・ペプチド | 分子量: 273.330 Da / 分子数: 4 / 断片: N-terminal parts of chains B, D, F, H / 由来タイプ: 組換発現 詳細: Co-expressed from the same plasmid as a protein complex 由来: (組換発現) ![]() ![]() 遺伝子: POL1, CDC17 / プラスミド: RSF1-Duet / 発現宿主: ![]() ![]() #3: タンパク質 | 分子量: 23981.221 Da / 分子数: 4 断片: Cysteine-rich C-terminal domain, UNP residues 1263-1468 由来タイプ: 組換発現 詳細: Co-expressed from the same plasmid as a protein complex 由来: (組換発現) ![]() ![]() 遺伝子: POL1, CDC17 / プラスミド: RSF1-Duet / 発現宿主: ![]() ![]() |
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-非ポリマー , 3種, 644分子 




#4: 化合物 | ChemComp-SO4 / #5: 化合物 | ChemComp-ZN / #6: 水 | ChemComp-HOH / | |
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-詳細
配列の詳細 | CHAIN I, J, K, L; THE ELECTRON DENSITY MAP WAS NOT SUFFICIENTLY CLEAR TO ASSIGN UNAMBIGUOUSLY THE ...CHAIN I, J, K, L; THE ELECTRON DENSITY MAP WAS NOT SUFFICIENT |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: ![]() |
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試料調製
結晶 | マシュー密度: 3.42 Å3/Da / 溶媒含有率: 64.04 % |
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結晶化 | 温度: 291 K / 手法: 蒸気拡散法, ハンギングドロップ法 / pH: 6 詳細: 0.1M MES, 1.26M Ammonium Sulfate, 3mM TCEP, pH6.0, VAPOR DIFFUSION, HANGING DROP, temperature 291K |
-データ収集
回折 | 平均測定温度: 100 K |
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放射光源 | 由来: ![]() ![]() ![]() |
検出器 | タイプ: ADSC Q315R / 検出器: CCD / 日付: 2007年6月16日 / 詳細: silicon monochromator |
放射 | モノクロメーター: silicon / プロトコル: SINGLE WAVELENGTH / 単色(M)・ラウエ(L): M / 散乱光タイプ: x-ray |
放射波長 | 波長: 1.2852 Å / 相対比: 1 |
反射 | 解像度: 2.5→31.9 Å / Num. all: 141597 / Num. obs: 141597 / % possible obs: 99.8 % / Observed criterion σ(F): 0 / Observed criterion σ(I): 0 / 冗長度: 7.3 % / Biso Wilson estimate: 58.4 Å2 / Rmerge(I) obs: 0.102 / Rsym value: 0.102 / Net I/σ(I): 5.2 |
反射 シェル | 解像度: 2.5→2.64 Å / 冗長度: 7.4 % / Rmerge(I) obs: 0.652 / Mean I/σ(I) obs: 1.2 / Num. unique all: 20778 / Rsym value: 0.652 / % possible all: 99.7 |
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解析
ソフトウェア |
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精密化 | 構造決定の手法: ![]() 詳細: HYDROGENS HAVE BEEN ADDED IN THE RIDING POSITIONS, ATOM RECORD CONTAINS SUM OF TLS AND RESIDUAL B FACTORS, ANISOU RECORD CONTAINS SUM OF TLS AND RESIDUAL U FACTORS
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溶媒の処理 | イオンプローブ半径: 0.8 Å / 減衰半径: 0.8 Å / VDWプローブ半径: 1.2 Å / 溶媒モデル: MASK | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
原子変位パラメータ | Biso mean: 43.61 Å2
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精密化ステップ | サイクル: LAST / 解像度: 2.5→31.9 Å
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拘束条件 |
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Refine LS restraints NCS | Refine-ID: X-RAY DIFFRACTION
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