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基本情報
| 登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-8741 | |||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| タイトル | Thermoplasma acidophilum 20S Proteasome using 200keV with stage position | |||||||||
マップデータ | Final sharpened map of T. acidophilum 20S proteasome collected using stage position navigation | |||||||||
試料 |
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キーワード | Proteasome / hydrolase | |||||||||
| 機能・相同性 | 機能・相同性情報proteasome endopeptidase complex / proteasome core complex, beta-subunit complex / threonine-type endopeptidase activity / proteasome core complex, alpha-subunit complex / proteasomal protein catabolic process / ubiquitin-dependent protein catabolic process / endopeptidase activity / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
| 生物種 | ![]() Thermoplasma acidophilum (好酸性) | |||||||||
| 手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.1 Å | |||||||||
データ登録者 | Herzik Jr MA / Wu M / Lander GC | |||||||||
| 資金援助 | 米国, 1件
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引用 | ジャーナル: Nat Methods / 年: 2017タイトル: Achieving better-than-3-Å resolution by single-particle cryo-EM at 200 keV. 著者: Mark A Herzik / Mengyu Wu / Gabriel C Lander / ![]() 要旨: Nearly all single-particle cryo-EM structures resolved to better than 4-Å resolution have been determined using 300-keV transmission electron microscopes (TEMs). We demonstrate that it is possible ...Nearly all single-particle cryo-EM structures resolved to better than 4-Å resolution have been determined using 300-keV transmission electron microscopes (TEMs). We demonstrate that it is possible to obtain reconstructions of macromolecular complexes of different sizes to better than 3-Å resolution using a 200-keV TEM. These structures are of sufficient quality to unambiguously assign amino acid rotameric conformations and identify ordered water molecules. | |||||||||
| 履歴 |
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構造の表示
| ムービー |
ムービービューア |
|---|---|
| 構造ビューア | EMマップ: SurfView Molmil Jmol/JSmol |
| 添付画像 |
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ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
| マップデータ | emd_8741.map.gz | 59.5 MB | EMDBマップデータ形式 | |
|---|---|---|---|---|
| ヘッダ (付随情報) | emd-8741-v30.xml emd-8741.xml | 22.5 KB 22.5 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
| FSC (解像度算出) | emd_8741_fsc.xml | 17.8 KB | 表示 | FSCデータファイル |
| 画像 | emd_8741.png | 38.9 KB | ||
| Filedesc metadata | emd-8741.cif.gz | 6.6 KB | ||
| その他 | emd_8741_additional.map.gz emd_8741_half_map_1.map.gz emd_8741_half_map_2.map.gz | 59 MB 409.8 MB 409.9 MB | ||
| アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-8741 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-8741 | HTTPS FTP |
-検証レポート
| 文書・要旨 | emd_8741_validation.pdf.gz | 914.7 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
|---|---|---|---|---|
| 文書・詳細版 | emd_8741_full_validation.pdf.gz | 914.3 KB | 表示 | |
| XML形式データ | emd_8741_validation.xml.gz | 24.5 KB | 表示 | |
| CIF形式データ | emd_8741_validation.cif.gz | 32.3 KB | 表示 | |
| アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-8741 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-8741 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
| 関連構造データ | ![]() 5vy3MC ![]() 8742C ![]() 8743C ![]() 5vy4C ![]() 5vy5C C: 同じ文献を引用 ( M: このマップから作成された原子モデル |
|---|---|
| 類似構造データ | |
| 電子顕微鏡画像生データ | EMPIAR-10185 (タイトル: T. acidophilum 20S proteasome core movies obtained using Talos Arctica operating at 200 kV equipped with a K2 – stage position used for exposure target navigationData size: 1.1 TB Data #1: Raw, unaligned movie stacks of T. acidophilum 20S proteasome core acquired on a Talos Arctica using a K2 direct electron detector - stage position used for exposure navigation [micrographs - multiframe]) |
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リンク
| EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
|---|---|
| 「今月の分子」の関連する項目 |
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マップ
| ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_8741.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 64 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 注釈 | Final sharpened map of T. acidophilum 20S proteasome collected using stage position navigation | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 0.91 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 密度 |
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| 対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
| ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
-添付データ
-追加マップ: Unsharpened map of T. acidophilum 20S proteasome collected...
| ファイル | emd_8741_additional.map | ||||||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 注釈 | Unsharpened map of T. acidophilum 20S proteasome collected using stage position navigation | ||||||||||||
| 投影像・断面図 |
| ||||||||||||
| 密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: Thermoplasma acidophilum 20S Proteasome, odd half map
| ファイル | emd_8741_half_map_1.map | ||||||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 注釈 | Thermoplasma acidophilum 20S Proteasome, odd half map | ||||||||||||
| 投影像・断面図 |
| ||||||||||||
| 密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: Thermoplasma acidophilum 20S Proteasome, even half map
| ファイル | emd_8741_half_map_2.map | ||||||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 注釈 | Thermoplasma acidophilum 20S Proteasome, even half map | ||||||||||||
| 投影像・断面図 |
| ||||||||||||
| 密度ヒストグラム |
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試料の構成要素
-全体 : Thermoplasma acidophilum 20S proteasome
| 全体 | 名称: Thermoplasma acidophilum 20S proteasome |
|---|---|
| 要素 |
|
-超分子 #1: Thermoplasma acidophilum 20S proteasome
| 超分子 | 名称: Thermoplasma acidophilum 20S proteasome / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: all 詳細: Thermoplasma acidophilum 20S proteasome purified from Escherichia coli |
|---|---|
| 由来(天然) | 生物種: ![]() Thermoplasma acidophilum (好酸性) |
| 分子量 | 理論値: 700 KDa |
-分子 #1: Proteasome subunit alpha
| 分子 | 名称: Proteasome subunit alpha / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 14 / 光学異性体: LEVO / EC番号: proteasome endopeptidase complex |
|---|---|
| 由来(天然) | 生物種: ![]() Thermoplasma acidophilum (好酸性) |
| 分子量 | 理論値: 24.776281 KDa |
| 組換発現 | 生物種: ![]() |
| 配列 | 文字列: RAITVFSPDG RLFQVEYARE AVKKGSTALG MKFANGVLLI SDKKVRSRLI EQNSIEKIQL IDDYVAAVTS GLVADARVLV DFARISAQQ EKVTYGSLVN IENLVKRVAD QMQQYTQYGG VRPYGVSLIF AGIDQIGPRL FDCDPAGTIN EYKATAIGSG K DAVVSFLE ...文字列: RAITVFSPDG RLFQVEYARE AVKKGSTALG MKFANGVLLI SDKKVRSRLI EQNSIEKIQL IDDYVAAVTS GLVADARVLV DFARISAQQ EKVTYGSLVN IENLVKRVAD QMQQYTQYGG VRPYGVSLIF AGIDQIGPRL FDCDPAGTIN EYKATAIGSG K DAVVSFLE REYKENLPEK EAVTLGIKAL KSSLEEGEEL KAPEIASITV GNKYRIYDQE EVKKFL UniProtKB: Proteasome subunit alpha |
-分子 #2: Proteasome subunit beta
| 分子 | 名称: Proteasome subunit beta / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / コピー数: 14 / 光学異性体: LEVO / EC番号: proteasome endopeptidase complex |
|---|---|
| 由来(天然) | 生物種: ![]() Thermoplasma acidophilum (好酸性) |
| 分子量 | 理論値: 22.294848 KDa |
| 組換発現 | 生物種: ![]() |
| 配列 | 文字列: TTTVGITLKD AVIMATERRV TMENFIMHKN GKKLFQIDTY TGMTIAGLVG DAQVLVRYMK AELELYRLQR RVNMPIEAVA TLLSNMLNQ VKYMPYMVQL LVGGIDTAPH VFSIDAAGGS VEDIYASTGS GSPFVYGVLE SQYSEKMTVD EGVDLVIRAI S AAKQRDSA ...文字列: TTTVGITLKD AVIMATERRV TMENFIMHKN GKKLFQIDTY TGMTIAGLVG DAQVLVRYMK AELELYRLQR RVNMPIEAVA TLLSNMLNQ VKYMPYMVQL LVGGIDTAPH VFSIDAAGGS VEDIYASTGS GSPFVYGVLE SQYSEKMTVD EGVDLVIRAI S AAKQRDSA SGGMIDVAVI TRKDGYVQLP TDQIESRIRK LGLIL UniProtKB: Proteasome subunit beta |
-実験情報
-構造解析
| 手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
|---|---|
解析 | 単粒子再構成法 |
| 試料の集合状態 | particle |
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試料調製
| 濃度 | 0.5 mg/mL | |||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 緩衝液 | pH: 7.4 構成要素:
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| グリッド | モデル: Quantifoil, UltrAuFoil, R1.2/1.3 / 材質: GOLD / メッシュ: 300 / 前処理 - タイプ: PLASMA CLEANING / 前処理 - 時間: 7 sec. / 前処理 - 雰囲気: OTHER / 前処理 - 気圧: 0.009000000000000001 kPa / 詳細: 15 Watts | |||||||||
| 凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 277.15 K / 装置: HOMEMADE PLUNGER 詳細: 3 uL of sample/grid was manually blotted for 4 seconds prior to immediate plunge-freezing in liquid nitrogen-cooled ethane.. |
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電子顕微鏡法
| 顕微鏡 | FEI TALOS ARCTICA |
|---|---|
| 撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 検出モード: SUPER-RESOLUTION / デジタル化 - サイズ - 横: 7420 pixel / デジタル化 - サイズ - 縦: 7676 pixel / デジタル化 - 画像ごとのフレーム数: 1-68 / 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 629 / 平均露光時間: 17.0 sec. / 平均電子線量: 65.0 e/Å2 詳細: Images were collected using stage position navigation to target exposure. |
| 電子線 | 加速電圧: 200 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
| 電子光学系 | C2レンズ絞り径: 70.0 µm / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm 最大 デフォーカス(公称値): 2.8000000000000003 µm 最小 デフォーカス(公称値): 0.8 µm / 倍率(公称値): 45000 |
| 試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER ホルダー冷却材: NITROGEN |
| 実験機器 | ![]() モデル: Talos Arctica / 画像提供: FEI Company |
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画像解析
-原子モデル構築 1
| 詳細 | Starting model was generated by stripping PDB entry 1YAR of all ligands and alternate conformations, then refining into the EM density using imposed symmetry while adjusting weighting/scoring according to estimated map resolution. The top 10 generated models (ranked based on quality metrics) were real-space refined using Phenix software. |
|---|---|
| 精密化 | 空間: REAL / プロトコル: OTHER / 温度因子: 101 / 当てはまり具合の基準: Maximum Likelihood |
| 得られたモデル | ![]() PDB-5vy3: |
ムービー
コントローラー
万見について



キーワード
Thermoplasma acidophilum (好酸性)
データ登録者
米国, 1件
引用
UCSF Chimera















Z (Sec.)
Y (Row.)
X (Col.)

















































