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基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-7827 | |||||||||
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タイトル | AprA Methyltransferase 1 - GNAT - Methyltransferase 2 tridomain | |||||||||
![]() | AprA Methyltransferase 1 - GNAT - Methyltransferase 2 tridomain | |||||||||
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生物種 | ![]() | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / ネガティブ染色法 / 解像度: 26.0 Å | |||||||||
![]() | Su M / Skiba MA / Smith JL | |||||||||
![]() | ![]() タイトル: Biosynthesis of t-Butyl in Apratoxin A: Functional Analysis and Architecture of a PKS Loading Module. 著者: Meredith A Skiba / Andrew P Sikkema / Nathan A Moss / Andrew N Lowell / Min Su / Rebecca M Sturgis / Lena Gerwick / William H Gerwick / David H Sherman / Janet L Smith / ![]() 要旨: The unusual feature of a t-butyl group is found in several marine-derived natural products including apratoxin A, a Sec61 inhibitor produced by the cyanobacterium Moorea bouillonii PNG 5-198. Here, ...The unusual feature of a t-butyl group is found in several marine-derived natural products including apratoxin A, a Sec61 inhibitor produced by the cyanobacterium Moorea bouillonii PNG 5-198. Here, we determine that the apratoxin A t-butyl group is formed as a pivaloyl acyl carrier protein (ACP) by AprA, the polyketide synthase (PKS) loading module of the apratoxin A biosynthetic pathway. AprA contains an inactive "pseudo" GCN5-related N-acetyltransferase domain (ΨGNAT) flanked by two methyltransferase domains (MT1 and MT2) that differ distinctly in sequence. Structural, biochemical, and precursor incorporation studies reveal that MT2 catalyzes unusually coupled decarboxylation and methylation reactions to transform dimethylmalonyl-ACP, the product of MT1, to pivaloyl-ACP. Further, pivaloyl-ACP synthesis is primed by the fatty acid synthase malonyl acyltransferase (FabD), which compensates for the ΨGNAT and provides the initial acyl-transfer step to form AprA malonyl-ACP. Additionally, images of AprA from negative stain electron microscopy reveal multiple conformations that may facilitate the individual catalytic steps of the multienzyme module. | |||||||||
履歴 |
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構造の表示
ムービー |
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構造ビューア | EMマップ: ![]() ![]() ![]() |
添付画像 |
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ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | ![]() | 1.5 MB | ![]() | |
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ヘッダ (付随情報) | ![]() ![]() | 10.5 KB 10.5 KB | 表示 表示 | ![]() |
画像 | ![]() | 42.2 KB | ||
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | ![]() | 77.5 KB | 表示 | ![]() |
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文書・詳細版 | ![]() | 76.6 KB | 表示 | |
XML形式データ | ![]() | 494 B | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-関連構造データ
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リンク
EMDBのページ | ![]() ![]() |
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マップ
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注釈 | AprA Methyltransferase 1 - GNAT - Methyltransferase 2 tridomain | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 4.32 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
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試料の構成要素
-全体 : AprA Polyketide Synthase
全体 | 名称: AprA Polyketide Synthase |
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要素 |
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-超分子 #1: AprA Polyketide Synthase
超分子 | 名称: AprA Polyketide Synthase / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: all |
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由来(天然) | 生物種: ![]() |
組換発現 | 生物種: ![]() ![]() |
-分子 #1: AprA
分子 | 名称: AprA / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / 光学異性体: DEXTRO |
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由来(天然) | 生物種: ![]() |
組換発現 | 生物種: ![]() ![]() |
配列 | 文字列: MHHHHHHSSG VDLGTENLYF QSNALDKIN RYAHGFVAVP VICACSEAGV FELLSQKKSL KLEEIVEHLA ANSG HLMVA MRLLESLSFL YRSQAEEYIL TEQSQQHQII PKALMSLYKY PFELY LKGE VETGISNWIN CSSRRWDTEN SLLSDLLDGV LLIPLLLELK ...文字列: MHHHHHHSSG VDLGTENLYF QSNALDKIN RYAHGFVAVP VICACSEAGV FELLSQKKSL KLEEIVEHLA ANSG HLMVA MRLLESLSFL YRSQAEEYIL TEQSQQHQII PKALMSLYKY PFELY LKGE VETGISNWIN CSSRRWDTEN SLLSDLLDGV LLIPLLLELK KQNLLD ESK KIFNTLTNSL KQELSTLFIN LGWAEEKTEG LYLTDIGRFM RDRSLNL GT TASYAPMLLQ MKELLFGNPQ RVFQRNKTEK ERHVNRTLNV VASGFQHE K FFADTDKIII SIFNQQPIEE QPSYIVDMGC GDGTLLKRIY KIIKQFSAR GKVLTEYPII MVGVDYNQEA LDVTDKNLVD IPHLVIPGDI GAPEKLLEQL KAQGIEPEK VLHIRSFLDH DRPFIAPKNT EIAQARSQLD YQVVDVDREG K LIPPHIAV QSLVEHLERW SSIITRHGLL LLEVHSLTPA VVKKYIDESE SL HFDAYHA FSMQHLVEAD VFLMAAAEVG LFSRKEAFRK YPKTLPLTRI TVN HFEKRK YQIRYATVND IPNLLKCATF NQPVNEPFFQ VLLKQTPTAH LLLE YQGEL VAAIFTETKN SNEVLGIREF LVRTSVENWQ VLAKDLLEFV EQWGV VKPG IKEIEGLLKY HEAISNFQKS KWYQSSVLNK KLIEKITLHE LATLEL CNL MAPEYELEAF AARWLLRVFQ DMGVFLREGE SYQESELVSQ LNISPRY QR LLGALLQILH KRGILKIEKD RVFTLARCKT FALENISSEV SAFYDYFS E KYPAHLSWLT VVKRCLEKYP LILRGEVDVN EVVFTDGDME LFAGLFLGH RVADYFNELL ADGVCWEVEQ RLLEEKRAQP IRILEIGAGT GGVTGILLEK LASHAEQIE FWFTDISSVF TRYGESKFKQ FPWVKYQTFD IEKSLDAQGI K SESFDVVI ANNVLHNTKL IHQTLNNSNS LLNTGGLLAL LEFTQPIDIL LY FGGLLQG FWLFEDPEYR LEVGCLLSIP LWQKVLSDCG FDEIIPLGLP CEM HALSKA RESVIFARKH QVQEKTFSEK IKQNLTEN |
-実験情報
-構造解析
手法 | ネガティブ染色法 |
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![]() | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
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試料調製
緩衝液 | pH: 7 |
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染色 | タイプ: NEGATIVE / 材質: uranyl formate |
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電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TECNAI 12 |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN ULTRASCAN 4000 (4k x 4k) 平均電子線量: 30.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 120 kV / 電子線源: LAB6 |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD |
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画像解析
CTF補正 | ソフトウェア - 名称: RELION (ver. 1.4) |
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最終 再構成 | 想定した対称性 - 点群: C2 (2回回転対称) / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 26.0 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: RELION (ver. 1.4) / 使用した粒子像数: 4000 |
初期 角度割当 | タイプ: COMMON LINE / ソフトウェア - 名称: EMAN2 (ver. 2.1) |
最終 角度割当 | タイプ: ANGULAR RECONSTITUTION / ソフトウェア - 名称: RELION (ver. 1.4) |