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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-7819 | |||||||||
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タイトル | Human nuclear exosome-MTR4 RNA complex - overall reconstruction - small class KOW domain closed | |||||||||
マップデータ | Overall reconstruction of a small class for human nuclear exosome-MTR4 complex with the MTR4 KOW domain in a closed conformation | |||||||||
試料 |
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生物種 | Homo sapiens (ヒト) / synthetic construct (人工物) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 8.22 Å | |||||||||
データ登録者 | Weick E-M / Lima CD | |||||||||
引用 | ジャーナル: Cell / 年: 2018 タイトル: Helicase-Dependent RNA Decay Illuminated by a Cryo-EM Structure of a Human Nuclear RNA Exosome-MTR4 Complex. 著者: Eva-Maria Weick / M Rhyan Puno / Kurt Januszyk / John C Zinder / Michael A DiMattia / Christopher D Lima / 要旨: The ribonucleolytic RNA exosome interacts with RNA helicases to degrade RNA. To understand how the 3' to 5' Mtr4 helicase engages RNA and the nuclear exosome, we reconstituted 14-subunit Mtr4- ...The ribonucleolytic RNA exosome interacts with RNA helicases to degrade RNA. To understand how the 3' to 5' Mtr4 helicase engages RNA and the nuclear exosome, we reconstituted 14-subunit Mtr4-containing RNA exosomes from Saccharomyces cerevisiae, Schizosaccharomyces pombe, and human and show that they unwind structured substrates to promote degradation. We loaded a human exosome with an optimized DNA-RNA chimera that stalls MTR4 during unwinding and determined its structure to an overall resolution of 3.45 Å by cryoelectron microscopy (cryo-EM). The structure reveals an RNA-engaged helicase atop the non-catalytic core, with RNA captured within the central channel and DIS3 exoribonuclease active site. MPP6 tethers MTR4 to the exosome through contacts to the RecA domains of MTR4. EXOSC10 remains bound to the core, but its catalytic module and cofactor C1D are displaced by RNA-engaged MTR4. Competition for the exosome core may ensure that RNA is committed to degradation by DIS3 when engaged by MTR4. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_7819.map.gz | 12.9 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-7819-v30.xml emd-7819.xml | 32.6 KB 32.6 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
FSC (解像度算出) | emd_7819_fsc.xml | 13.8 KB | 表示 | FSCデータファイル |
画像 | emd_7819.png | 48.1 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-7819 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-7819 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_7819_validation.pdf.gz | 78 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_7819_full_validation.pdf.gz | 77.1 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_7819_validation.xml.gz | 493 B | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-7819 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-7819 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_7819.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 216 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | Overall reconstruction of a small class for human nuclear exosome-MTR4 complex with the MTR4 KOW domain in a closed conformation | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.07 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-試料の構成要素
+全体 : Human nuclear exosome-MTR4 helicase captured after unwinding a DN...
+超分子 #1: Human nuclear exosome-MTR4 helicase captured after unwinding a DN...
+分子 #1: EXOSC9
+分子 #2: EXOSC4
+分子 #3: EXOSC8
+分子 #4: EXOSC5
+分子 #5: EXOSC7
+分子 #6: EXOSC6
+分子 #7: EXOSC3
+分子 #8: EXOSC2
+分子 #9: EXOSC1
+分子 #10: EXOSC10
+分子 #11: DIS3
+分子 #12: MPP6, MPHOSPH6
+分子 #13: MTR4, MTREX
+分子 #14: C1D, Rrp47
+分子 #15: synthetic RNA
+分子 #16: DNA-RNA chimera
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
濃度 | 1.0 mg/mL | |||||||||||||||||||||
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緩衝液 | pH: 8 構成要素:
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グリッド | モデル: Quantifoil R2/2 / 材質: GOLD / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 前処理 - 雰囲気: AIR / 前処理 - 気圧: 0.037 kPa | |||||||||||||||||||||
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内温度: 298 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 詳細: 30 sec wait time, 2.5 sec blot time. | |||||||||||||||||||||
詳細 | Sample was monodisperse upon elution from gel filtration prior to vitrification. |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 検出モード: SUPER-RESOLUTION / 実像数: 1439 / 平均電子線量: 85.23 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
+画像解析
-原子モデル構築 1
詳細 | Models can be manually docked into this map. |
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