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- EMDB-6581: 3D structure determination of the human *U4/U6.U5* tri-snRNP complex -

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基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-6581
タイトル3D structure determination of the human *U4/U6.U5* tri-snRNP complex
マップデータReconstruction of human tri-snRNP
試料
  • 試料: human U4/U6.U5 tri-snRNP
  • タンパク質・ペプチド: U4/U6.U5 tri-snRNP
キーワードsnRNP / splicing / spliceosome / human
機能・相同性
機能・相同性情報


Lsm2-8 complex / U6 snRNA 3'-end binding / spliceosomal snRNP complex / ribonucleoprotein complex localization / U4atac snRNP / RNA localization / U4atac snRNA binding / R-loop processing / mRNA decay by 5' to 3' exoribonuclease / Lsm1-7-Pat1 complex ...Lsm2-8 complex / U6 snRNA 3'-end binding / spliceosomal snRNP complex / ribonucleoprotein complex localization / U4atac snRNP / RNA localization / U4atac snRNA binding / R-loop processing / mRNA decay by 5' to 3' exoribonuclease / Lsm1-7-Pat1 complex / box C/D sno(s)RNA binding / U6 snRNP / PH domain binding / U2 snRNP binding / U7 snRNA binding / histone pre-mRNA DCP binding / U7 snRNP / dense fibrillar component / histone pre-mRNA 3'end processing complex / cis assembly of pre-catalytic spliceosome / SLBP independent Processing of Histone Pre-mRNAs / SLBP Dependent Processing of Replication-Dependent Histone Pre-mRNAs / box C/D methylation guide snoRNP complex / spliceosome conformational change to release U4 (or U4atac) and U1 (or U11) / U4/U6 snRNP / protein methylation / U12-type spliceosomal complex / 7-methylguanosine cap hypermethylation / RNA splicing, via transesterification reactions / U1 snRNP binding / sno(s)RNA-containing ribonucleoprotein complex / methylosome / pICln-Sm protein complex / U2-type catalytic step 1 spliceosome / U4 snRNA binding / snRNP binding / small nuclear ribonucleoprotein complex / SMN-Sm protein complex / P granule / spliceosomal tri-snRNP complex / U2-type precatalytic spliceosome / telomerase holoenzyme complex / U2-type spliceosomal complex / telomerase RNA binding / commitment complex / U2-type prespliceosome assembly / U2-type catalytic step 2 spliceosome / box C/D snoRNP assembly / U4 snRNP / U2 snRNP / RNA Polymerase II Transcription Termination / P-body assembly / U1 snRNP / U3 snoRNA binding / U2-type prespliceosome / tRNA processing / rRNA modification in the nucleus and cytosol / K63-linked polyubiquitin modification-dependent protein binding / precatalytic spliceosome / spliceosomal complex assembly / mRNA catabolic process / mRNA Splicing - Minor Pathway / nuclear-transcribed mRNA catabolic process / MLL1 complex / spliceosomal tri-snRNP complex assembly / protein deubiquitination / U5 snRNA binding / U5 snRNP / U2 snRNA binding / U6 snRNA binding / single fertilization / pre-mRNA intronic binding / Major pathway of rRNA processing in the nucleolus and cytosol / spliceosomal snRNP assembly / RNA processing / ribonucleoprotein complex binding / Cajal body / U1 snRNA binding / U4/U6 x U5 tri-snRNP complex / catalytic step 2 spliceosome / mRNA Splicing - Major Pathway / RNA splicing / maturation of SSU-rRNA / response to cocaine / response to bacterium / spliceosomal complex / small-subunit processome / P-body / helicase activity / mRNA splicing, via spliceosome / small GTPase binding / cellular response to xenobiotic stimulus / mRNA processing / osteoblast differentiation / cellular response to tumor necrosis factor / ATPase binding / cellular response to lipopolysaccharide / ribosomal small subunit biogenesis / snRNP Assembly / protein-macromolecule adaptor activity
類似検索 - 分子機能
USP39 / DDX23-like domain / PRP4-like superfamily / pre-mRNA processing factor 4 (PRP4) like / Sm-like protein Lsm8 / PWI domain superfamily / PWI domain / PWI domain profile. / Pre-mRNA processing factor 4 (PRP4)-like / U6 snRNA-associated Sm-like protein LSm2 ...USP39 / DDX23-like domain / PRP4-like superfamily / pre-mRNA processing factor 4 (PRP4) like / Sm-like protein Lsm8 / PWI domain superfamily / PWI domain / PWI domain profile. / Pre-mRNA processing factor 4 (PRP4)-like / U6 snRNA-associated Sm-like protein LSm2 / Sm-like protein Lsm4 / Splicing Factor Motif, present in Prp18 and Pr04 / Sm-like protein Lsm7 / U6 snRNA-associated Sm-like protein Lsm1/8 / Sm-like protein LSm5 / Sm-like protein Lsm3 / U6 snRNA-associated Sm-like protein Lsm3 / Pre-mRNA-splicing factor 3 / U4/U6 small nuclear ribonucleoprotein Prp3 / pre-mRNA processing factor 3 domain / Prp31 C-terminal / U4/U6 small nuclear ribonucleoprotein Prp31 / Prp31 C terminal domain / Small nuclear ribonucleoprotein Prp3, C-terminal domain / Small nuclear ribonucleoprotein Prp3, C-terminal domain / PWI domain / PWI, domain in splicing factors / Dim1 family / Mitosis protein DIM1 / Mitosis protein DIM1 / PRP1 splicing factor, N-terminal / PRP1 splicing factor, N-terminal / : / : / Small ribonucleoprotein associated, SmB/SmN / NOSIC / NOSIC (NUC001) domain / Nop domain / Small nuclear ribonucleoprotein D1 / Nop domain superfamily / Nop, C-terminal domain / snoRNA binding domain, fibrillarin / Nop domain profile. / H/ACA ribonucleoprotein complex, subunit Nhp2-like / Brr2, N-terminal helicase PWI domain / : / N-terminal helicase PWI domain / Pre-mRNA-splicing helicase BRR2 plug domain / Ubiquitin Carboxyl-terminal Hydrolase-like zinc finger / Zinc finger, UBP-type / Zn-finger in ubiquitin-hydrolases and other protein / Zinc finger UBP-type profile. / Winged Helix-turn-helix domain / Sec63 Brl domain / Tetratricopeptide repeat / : / 116kDa U5 small nuclear ribonucleoprotein component, N-terminal / 116kDa U5 small nuclear ribonucleoprotein component, C-terminal / Snu114, GTP-binding domain / 116 kDa U5 small nuclear ribonucleoprotein component N-terminus / Pre-mRNA-splicing factor Syf1-like / Sec63 domain / Sec63 Brl domain / Small nuclear ribonucleoprotein Sm D3 / Small nuclear ribonucleoprotein Sm D2 / Small nuclear ribonucleoprotein E / Small nuclear ribonucleoprotein G / Small nuclear ribonucleoprotein F / Sm-like protein Lsm7/SmG / Like-Sm (LSM) domain containing protein, LSm4/SmD1/SmD3 / Sm-like protein Lsm6/SmF / Tetratricopeptide repeat / LSM domain / LSM domain, eukaryotic/archaea-type / snRNP Sm proteins / HAT (Half-A-TPR) repeat / HAT (Half-A-TPR) repeats / Peptidase C19, ubiquitin carboxyl-terminal hydrolase / Ubiquitin carboxyl-terminal hydrolase / DEAD-box subfamily ATP-dependent helicases signature. / Ubiquitin specific protease domain / Ubiquitin specific protease (USP) domain profile. / ATP-dependent RNA helicase DEAD-box, conserved site / RNA helicase, DEAD-box type, Q motif / : / Sm domain profile. / DEAD-box RNA helicase Q motif profile. / Elongation Factor G, domain II / Elongation Factor G, domain III / LSM domain superfamily / JAB1/Mov34/MPN/PAD-1 ubiquitin protease / Translation elongation factor EFG/EF2, domain IV / Elongation factor G, domain IV / Elongation factor G, domain IV / Elongation factor G C-terminus / Elongation factor EFG, domain V-like / Elongation factor G C-terminus / EF-G domain III/V-like / PROCT domain / Prp8 RNase domain IV, fingers region
類似検索 - ドメイン・相同性
U4/U6 small nuclear ribonucleoprotein Prp4 / U4/U6 small nuclear ribonucleoprotein Prp3 / U5 small nuclear ribonucleoprotein 200 kDa helicase / Pre-mRNA-processing factor 6 / U6 snRNA-associated Sm-like protein LSm8 / Small nuclear ribonucleoprotein-associated proteins B and B' / NHP2-like protein 1 / Small nuclear ribonucleoprotein E / Small nuclear ribonucleoprotein F / Small nuclear ribonucleoprotein G ...U4/U6 small nuclear ribonucleoprotein Prp4 / U4/U6 small nuclear ribonucleoprotein Prp3 / U5 small nuclear ribonucleoprotein 200 kDa helicase / Pre-mRNA-processing factor 6 / U6 snRNA-associated Sm-like protein LSm8 / Small nuclear ribonucleoprotein-associated proteins B and B' / NHP2-like protein 1 / Small nuclear ribonucleoprotein E / Small nuclear ribonucleoprotein F / Small nuclear ribonucleoprotein G / U6 snRNA-associated Sm-like protein LSm3 / U6 snRNA-associated Sm-like protein LSm6 / Small nuclear ribonucleoprotein Sm D1 / Small nuclear ribonucleoprotein Sm D2 / Small nuclear ribonucleoprotein Sm D3 / Thioredoxin-like protein 4A / 116 kDa U5 small nuclear ribonucleoprotein component / Ubiquitin carboxyl-terminal hydrolase 39 / U4/U6 small nuclear ribonucleoprotein Prp4 / Pre-mRNA-processing-splicing factor 8 / U4/U6 small nuclear ribonucleoprotein Prp31 / U5 small nuclear ribonucleoprotein 40 kDa protein / Probable ATP-dependent RNA helicase DDX23 / U6 snRNA-associated Sm-like protein LSm7 / U6 snRNA-associated Sm-like protein LSm2 / U6 snRNA-associated Sm-like protein LSm5 / U6 snRNA-associated Sm-like protein LSm4
類似検索 - 構成要素
生物種Homo sapiens (ヒト)
手法単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 7.0 Å
データ登録者Agafonov DE / Kastner B / Dybkov O / Hofele RV / Liu WT / Urlaub H / Luhrmann R / Stark H
引用ジャーナル: Science / 年: 2016
タイトル: Molecular architecture of the human U4/U6.U5 tri-snRNP.
著者: Dmitry E Agafonov / Berthold Kastner / Olexandr Dybkov / Romina V Hofele / Wen-Ti Liu / Henning Urlaub / Reinhard Lührmann / Holger Stark /
要旨: The U4/U6.U5 triple small nuclear ribonucleoprotein (tri-snRNP) is a major spliceosome building block. We obtained a three-dimensional structure of the 1.8-megadalton human tri-snRNP at a resolution ...The U4/U6.U5 triple small nuclear ribonucleoprotein (tri-snRNP) is a major spliceosome building block. We obtained a three-dimensional structure of the 1.8-megadalton human tri-snRNP at a resolution of 7 angstroms using single-particle cryo-electron microscopy (cryo-EM). We fit all known high-resolution structures of tri-snRNP components into the EM density map and validated them by protein cross-linking. Our model reveals how the spatial organization of Brr2 RNA helicase prevents premature U4/U6 RNA unwinding in isolated human tri-snRNPs and how the ubiquitin C-terminal hydrolase-like protein Sad1 likely tethers the helicase Brr2 to its preactivation position. Comparison of our model with cryo-EM three-dimensional structures of the Saccharomyces cerevisiae tri-snRNP and Schizosaccharomyces pombe spliceosome indicates that Brr2 undergoes a marked conformational change during spliceosome activation, and that the scaffolding protein Prp8 is also rearranged to accommodate the spliceosome's catalytic RNA network.
履歴
登録2016年1月15日-
ヘッダ(付随情報) 公開2016年3月9日-
マップ公開2016年3月9日-
更新2016年4月27日-
現状2016年4月27日処理サイト: RCSB / 状態: 公開

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構造の表示

ムービー
  • 表面図（断面を密度値に従い着色）
  • 表面レベル: 0.13
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
  • 表面図（半径に従い着色）
  • 表面レベル: 0.13
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
  • あてはめたモデルとの重ね合わせ
  • 原子モデル: PDB-3jcr
  • 表面レベル: 0.13
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
ムービービューア
構造ビューアEMマップ:
SurfViewMolmilJmol/JSmol
添付画像

emd_6581.jpg

ダウンロードとリンク

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マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_6581.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 39.7 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
注釈Reconstruction of human tri-snRNP
投影像・断面図

画像のコントロール

大きさ
明度
コントラスト
その他
軸Z (Sec.)Y (Row.)X (Col.)
2 Å/pix.
x 220 pix.
= 440. Å		2 Å/pix.
x 220 pix.
= 440. Å		2 Å/pix.
x 220 pix.
= 440. Å

表面

投影像

断面 (1/3)

断面 (1/2)

断面 (2/3)

画像は Spider により作成

ボクセルのサイズX=Y=Z: 2 Å
密度

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)
表面レベル登録者による: 0.13 / ムービー #1: 0.13
最小 - 最大-0.38244939 - 0.65330416
平均 (標準偏差)0.0014018 (±0.02677352)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderXYZ
Origin000
サイズ220220220
Spacing220220220
セルA=B=C: 440.0 Å
α=β=γ: 90.0 °

CCP4マップ ヘッダ情報:

modeImage stored as Reals
Å/pix. X/Y/Z222
M x/y/z220220220
origin x/y/z0.0000.0000.000
length x/y/z440.000440.000440.000
α/β/γ90.00090.00090.000
MAP C/R/S123
start NC/NR/NS000
NC/NR/NS220220220
D min/max/mean-0.3820.6530.001

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添付データ

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試料の構成要素

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全体 : human U4/U6.U5 tri-snRNP

全体名称: human U4/U6.U5 tri-snRNP
要素
  • 試料: human U4/U6.U5 tri-snRNP
  • タンパク質・ペプチド: U4/U6.U5 tri-snRNP

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超分子 #1000: human U4/U6.U5 tri-snRNP

超分子名称: human U4/U6.U5 tri-snRNP / タイプ: sample / ID: 1000 / 集合状態: monomer / Number unique components: 1
分子量実験値: 1.8 MDa

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分子 #1: U4/U6.U5 tri-snRNP

分子名称: U4/U6.U5 tri-snRNP / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / 組換発現: No / データベース: NCBI
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト) / 別称: Human / 細胞: Hela / 細胞中の位置: Nucleus
分子量実験値: 1.8 MDa

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実験情報

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構造解析

手法クライオ電子顕微鏡法
解析単粒子再構成法
試料の集合状態particle

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試料調製

濃度0.1 mg/mL
緩衝液pH: 7.9
詳細: 20 mM HEPES, pH 7.9, 100 mM KCl, 5 mM MgCl2, 0.1 mM EDTA
グリッド詳細: 200 mesh copper grid with carbon support film
凍結凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 95 % / 装置: FEI VITROBOT MARK IV

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電子顕微鏡法

顕微鏡FEI TITAN KRIOS
日付2015年9月10日
撮影カテゴリ: CCD
フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON II (4k x 4k)
実像数: 4688 / 平均電子線量: 45 e/Å2
電子線加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN
電子光学系倍率（補正後）: 74000 / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 0.0001 mm / 最大 デフォーカス（公称値）: 5.35 µm / 最小 デフォーカス（公称値）: 1.0 µm
試料ステージ試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER
実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company

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画像解析

最終 再構成解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 7.0 Å / 解像度の算出法: OTHER / ソフトウェア - 名称: Relion / 使用した粒子像数: 141109

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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