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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-6499 | |||||||||
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タイトル | Structural insights into the regulatory mechanism of ATM kinase activation | |||||||||
マップデータ | Reconstruction of monomeric ATM kinase | |||||||||
試料 |
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キーワード | DNA-damage response / ataxia telangiectasia / PIKK | |||||||||
生物種 | Homo sapiens (ヒト) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / ネガティブ染色法 / 解像度: 28.0 Å | |||||||||
データ登録者 | Lau WCY / Li Y / Liu Z / Gao Y / Zhang Q / Huen MSY | |||||||||
引用 | ジャーナル: Cell Cycle / 年: 2016 タイトル: Structure of the human dimeric ATM kinase. 著者: Wilson C Y Lau / Yinyin Li / Zhe Liu / Yuanzhu Gao / Qinfen Zhang / Michael S Y Huen / 要旨: DNA-double strand breaks activate the serine/threonine protein kinase ataxia-telangiectasia mutated (ATM) to initiate DNA damage signal transduction. This activation process involves ...DNA-double strand breaks activate the serine/threonine protein kinase ataxia-telangiectasia mutated (ATM) to initiate DNA damage signal transduction. This activation process involves autophosphorylation and dissociation of inert ATM dimers into monomers that are catalytically active. Using single-particle electron microscopy (EM), we determined the structure of dimeric ATM in its resting state. The EM map could accommodate the crystal structure of the N-terminal truncated mammalian target of rapamycin (mTOR), a closely related enzyme of the phosphatidylinositol 3-kinase-related protein kinase (PIKK) family, allowing for the localization of the N- and the C-terminal regions of ATM. In the dimeric structure, the actives sites are buried, restricting the access of the substrates to these sites. The unanticipated domain organization of ATM provides a basis for understanding its mechanism of inhibition. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_6499.map.gz | 582.9 KB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-6499-v30.xml emd-6499.xml | 9.5 KB 9.5 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | 400_6499.gif 80_6499.gif | 26.5 KB 2.7 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-6499 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-6499 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_6499_validation.pdf.gz | 79.1 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_6499_full_validation.pdf.gz | 78.2 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_6499_validation.xml.gz | 494 B | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-6499 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-6499 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_6499.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 3.7 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | Reconstruction of monomeric ATM kinase | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 4.61 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-試料の構成要素
-全体 : Monomeric ATM kinase
全体 | 名称: Monomeric ATM kinase |
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要素 |
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-超分子 #1000: Monomeric ATM kinase
超分子 | 名称: Monomeric ATM kinase / タイプ: sample / ID: 1000 / 詳細: The sample was mono disperse / 集合状態: Monomer / Number unique components: 1 |
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分子量 | 理論値: 350 KDa |
-分子 #1: Monomeric ATM kinase
分子 | 名称: Monomeric ATM kinase / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 1 / 集合状態: Monomer / 組換発現: Yes |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) / 別称: Human |
分子量 | 理論値: 350 KDa |
組換発現 | 生物種: Homo sapiens (ヒト) / 組換細胞: 293T / 組換プラスミド: pcDNA-FLAG-His-ATM wt |
-実験情報
-構造解析
手法 | ネガティブ染色法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
濃度 | 0.02 mg/mL |
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緩衝液 | pH: 8 / 詳細: 25 mM Tris, 100 mM NaCl, 1 mM TCEP, 10% glycerol |
染色 | タイプ: NEGATIVE / 詳細: 1% w/v uranyl acetate |
グリッド | 詳細: Continuous carbon coated copper grids |
凍結 | 凍結剤: NONE / 装置: OTHER |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | JEOL 2010 |
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温度 | 平均: 296 K |
日付 | 2015年7月1日 |
撮影 | カテゴリ: CCD フィルム・検出器のモデル: GATAN ULTRASCAN 4000 (4k x 4k) 実像数: 251 / 平均電子線量: 25 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 200 kV / 電子線源: LAB6 |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.0 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 4.0 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 1.0 µm / 倍率(公称値): 50000 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: GATAN LIQUID NITROGEN |
-画像解析
CTF補正 | 詳細: class average |
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最終 再構成 | アルゴリズム: OTHER / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 28.0 Å / 解像度の算出法: OTHER / ソフトウェア - 名称: PRIME, EMAN2 / 使用した粒子像数: 6546 |
-原子モデル構築 1
初期モデル | PDB ID: Chain - Chain ID: A |
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ソフトウェア | 名称: Chimera |
詳細 | Residues 2021-2118 are removed |
精密化 | 空間: REAL / プロトコル: RIGID BODY FIT 当てはまり具合の基準: cross correlation coefficient |