+
データを開く
-
基本情報
| 登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-6407 | |||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| タイトル | In situ structures of the segmented genome and RNA polymerase complex inside a dsRNA virus | |||||||||
マップデータ | Whole map of quiescent CPV | |||||||||
試料 |
| |||||||||
キーワード | cryo-EM / dsRNA genome organization / viral polymerase | |||||||||
| 生物種 | ![]() ![]() Bombyx mori cypovirus 1 (ウイルス) | |||||||||
| 手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.3 Å | |||||||||
データ登録者 | Zhang X / Ding K / Yu XK / Chang W / Sun JC / Zhou ZH | |||||||||
引用 | ジャーナル: Nature / 年: 2015タイトル: In situ structures of the segmented genome and RNA polymerase complex inside a dsRNA virus. 著者: Xing Zhang / Ke Ding / Xuekui Yu / Winston Chang / Jingchen Sun / Z Hong Zhou / ![]() 要旨: Viruses in the Reoviridae, like the triple-shelled human rotavirus and the single-shelled insect cytoplasmic polyhedrosis virus (CPV), all package a genome of segmented double-stranded RNAs (dsRNAs) ...Viruses in the Reoviridae, like the triple-shelled human rotavirus and the single-shelled insect cytoplasmic polyhedrosis virus (CPV), all package a genome of segmented double-stranded RNAs (dsRNAs) inside the viral capsid and carry out endogenous messenger RNA synthesis through a transcriptional enzyme complex (TEC). By direct electron-counting cryoelectron microscopy and asymmetric reconstruction, we have determined the organization of the dsRNA genome inside quiescent CPV (q-CPV) and the in situ atomic structures of TEC within CPV in both quiescent and transcribing (t-CPV) states. We show that the ten segmented dsRNAs in CPV are organized with ten TECs in a specific, non-symmetric manner, with each dsRNA segment attached directly to a TEC. The TEC consists of two extensively interacting subunits: an RNA-dependent RNA polymerase (RdRP) and an NTPase VP4. We find that the bracelet domain of RdRP undergoes marked conformational change when q-CPV is converted to t-CPV, leading to formation of the RNA template entry channel and access to the polymerase active site. An amino-terminal helix from each of two subunits of the capsid shell protein (CSP) interacts with VP4 and RdRP. These findings establish the link between sensing of environmental cues by the external proteins and activation of endogenous RNA transcription by the TEC inside the virus. | |||||||||
| 履歴 |
|
-
構造の表示
| ムービー |
ムービービューア |
|---|---|
| 構造ビューア | EMマップ: SurfView Molmil Jmol/JSmol |
| 添付画像 |
-
ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
| マップデータ | emd_6407.map.gz | 864.4 MB | EMDBマップデータ形式 | |
|---|---|---|---|---|
| ヘッダ (付随情報) | emd-6407-v30.xml emd-6407.xml | 9.6 KB 9.6 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
| 画像 | emd_6407.jpg | 3.5 MB | ||
| アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-6407 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-6407 | HTTPS FTP |
-検証レポート
| 文書・要旨 | emd_6407_validation.pdf.gz | 78.7 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
|---|---|---|---|---|
| 文書・詳細版 | emd_6407_full_validation.pdf.gz | 77.8 KB | 表示 | |
| XML形式データ | emd_6407_validation.xml.gz | 494 B | 表示 | |
| アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-6407 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-6407 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-
リンク
| EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
|---|
-
マップ
| ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_6407.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 1.2 GB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 注釈 | Whole map of quiescent CPV | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.01 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 密度 |
| ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
| ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
-添付データ
-
試料の構成要素
-全体 : CPV capsid with VP4 + polymerase complex (TEC)
| 全体 | 名称: CPV capsid with VP4 + polymerase complex (TEC) |
|---|---|
| 要素 |
|
-超分子 #1000: CPV capsid with VP4 + polymerase complex (TEC)
| 超分子 | 名称: CPV capsid with VP4 + polymerase complex (TEC) / タイプ: sample / ID: 1000 / Number unique components: 2 |
|---|
-超分子 #1: Bombyx mori cypovirus 1
| 超分子 | 名称: Bombyx mori cypovirus 1 / タイプ: virus / ID: 1 / Name.synonym: Cytoplasmic polyhedrosis virus / NCBI-ID: 110829 / 生物種: Bombyx mori cypovirus 1 / データベース: NCBI / ウイルスタイプ: VIRION / ウイルス・単離状態: SPECIES / ウイルス・エンベロープ: No / ウイルス・中空状態: No / Syn species name: Cytoplasmic polyhedrosis virus |
|---|---|
| 宿主 | 生物種: ![]() |
-分子 #1: RNA polymerase
| 分子 | 名称: RNA polymerase / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / 組換発現: No / データベース: NCBI |
|---|---|
| 由来(天然) | 生物種: ![]() |
-実験情報
-構造解析
| 手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
|---|---|
解析 | 単粒子再構成法 |
| 試料の集合状態 | particle |
-
試料調製
| 緩衝液 | pH: 8 / 詳細: 70 mM Tris-Cl, 10 mM MgCl2, 100 mM NaCl, 2 mM GTP |
|---|---|
| グリッド | 詳細: 200 mesh Quantifoil holey carbon film |
| 凍結 | 凍結剤: ETHANE / 装置: FEI VITROBOT MARK II |
-
電子顕微鏡法
| 顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
|---|---|
| 温度 | 平均: 80 K |
| アライメント法 | Legacy - Electron beam tilt params: 0 |
| 日付 | 2013年7月26日 |
| 撮影 | カテゴリ: CCD / フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 (4k x 4k) / デジタル化 - サンプリング間隔: 5 µm / 実像数: 4385 / 平均電子線量: 25 e/Å2 |
| 電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
| 電子光学系 | 倍率(補正後): 49500 / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 4.5 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 0.6 µm / 倍率(公称値): 49000 |
| 試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER |
| 実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
-
画像解析
| CTF補正 | 詳細: Each particle |
|---|---|
| 最終 再構成 | 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 3.3 Å / 解像度の算出法: OTHER / ソフトウェア - 名称: Frealign / 使用した粒子像数: 68526 |
| 最終 2次元分類 | クラス数: 1 |
ムービー
コントローラー
万見について




Bombyx mori cypovirus 1 (ウイルス)
キーワード
データ登録者
引用

UCSF Chimera
















Z (Sec.)
Y (Row.)
X (Col.)






















