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万見
- EMDB-6325: 3D reconstruction of TMV at 4.5A from film micrographs using Frealix -

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基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-6325
タイトル3D reconstruction of TMV at 4.5A from film micrographs using Frealix
マップデータTMV map filtered using a negative B-factor, with amplitude matching against density derived from fitted atomic coordinates, a figure-of-merit filter, and subsequent helical symmetrization, as detailed in the primary citation.
試料
  • 試料: Tobacco mosaic virus
  • ウイルス: Tobacco mosaic virus (ウイルス)
生物種Tobacco mosaic virus (ウイルス)
手法らせん対称体再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 4.5 Å
データ登録者Rohou A / Grigorieff N
引用ジャーナル: J Mol Biol / 年: 2007
タイトル: High-resolution electron microscopy of helical specimens: a fresh look at tobacco mosaic virus.
著者: Carsten Sachse / James Z Chen / Pierre-Damien Coureux / M Elizabeth Stroupe / Marcus Fändrich / Nikolaus Grigorieff /
要旨: The treatment of helical objects as a string of single particles has become an established technique to resolve their three-dimensional (3D) structure using electron cryo-microscopy. It can be ...The treatment of helical objects as a string of single particles has become an established technique to resolve their three-dimensional (3D) structure using electron cryo-microscopy. It can be applied to a wide range of helical particles such as viruses, microtubules and helical filaments. We have made improvements to this approach using Tobacco Mosaic Virus (TMV) as a test specimen and obtained a map from 210,000 asymmetric units at a resolution better than 5 A. This was made possible by performing a full correction of the contrast transfer function of the microscope. Alignment of helical segments was helped by constraints derived from the helical symmetry of the virus. Furthermore, symmetrization was implemented by multiple inclusions of symmetry-related views in the 3D reconstruction. We used the density map to build an atomic model of TMV. The model was refined using a real-space refinement strategy that accommodates multiple conformers. The atomic model shows significant deviations from the deposited model for the helical form of TMV at the lower-radius region (residues 88 to 109). This region appears more ordered with well-defined secondary structure, compared with the earlier helical structure. The RNA phosphate backbone is sandwiched between two arginine side-chains, stabilizing the interaction between RNA and coat protein. A cluster of two or three carboxylates is buried in a hydrophobic environment isolating it from neighboring subunits. These carboxylates may represent the so-called Caspar carboxylates that form a metastable switch for viral disassembly. Overall, the observed differences suggest that the new model represents a different, more stable state of the virus, compared with the earlier published model.
履歴
登録2015年4月22日-
ヘッダ(付随情報) 公開2015年4月29日-
マップ公開2015年4月29日-
更新2015年4月29日-
現状2015年4月29日処理サイト: RCSB / 状態: 公開

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構造の表示

ムービー
  • 表面図（断面を密度値に従い着色）
  • 表面レベル: 1.3
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
  • 表面図（円筒半径に従い着色）
  • 表面レベル: 1.3
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
  • 表面図（円筒半径に従い着色）
  • 表面レベル: 1.3
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
ムービービューア
構造ビューアEMマップ:
SurfViewMolmilJmol/JSmol
添付画像

400_6325.gif

ダウンロードとリンク

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マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_6325.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 29.8 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
注釈TMV map filtered using a negative B-factor, with amplitude matching against density derived from fitted atomic coordinates, a figure-of-merit filter, and subsequent helical symmetrization, as detailed in the primary citation.
投影像・断面図

画像のコントロール

大きさ
明度
コントラスト
その他
軸Z (Sec.)Y (Row.)X (Col.)
1.16 Å/pix.
x 200 pix.
= 232.6 Å		1.16 Å/pix.
x 200 pix.
= 232.6 Å		1.16 Å/pix.
x 200 pix.
= 232.6 Å

表面

投影像

断面 (1/3)

断面 (1/2)

断面 (2/3)

画像は Spider により作成

ボクセルのサイズX=Y=Z: 1.163 Å
密度

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)
表面レベル登録者による: 1.3 / ムービー #1: 1.3
最小 - 最大-2.5420177 - 3.56391788
平均 (標準偏差)-0.00057129 (±0.67606211)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderXYZ
Origin000
サイズ200200200
Spacing200200200
セルA=B=C: 232.59999 Å
α=β=γ: 90.0 °

CCP4マップ ヘッダ情報:

modeImage stored as Reals
Å/pix. X/Y/Z1.1631.1631.163
M x/y/z200200200
origin x/y/z0.0000.0000.000
length x/y/z232.600232.600232.600
α/β/γ90.00090.00090.000
MAP C/R/S123
start NC/NR/NS000
NC/NR/NS200200200
D min/max/mean-2.5423.564-0.001

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添付データ

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添付マップデータ: emd 6325 additional 1.map

ファイルemd_6325_additional_1.map
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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試料の構成要素

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全体 : Tobacco mosaic virus

全体名称: Tobacco mosaic virus (ウイルス)
要素
  • 試料: Tobacco mosaic virus
  • ウイルス: Tobacco mosaic virus (ウイルス)

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超分子 #1000: Tobacco mosaic virus

超分子名称: Tobacco mosaic virus / タイプ: sample / ID: 1000 / 集合状態: Helical assembly / Number unique components: 1

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超分子 #1: Tobacco mosaic virus

超分子名称: Tobacco mosaic virus / タイプ: virus / ID: 1 / NCBI-ID: 12242 / 生物種: Tobacco mosaic virus / Sci species strain: vulgare / データベース: NCBI / ウイルスタイプ: VIRION / ウイルス・単離状態: STRAIN / ウイルス・エンベロープ: No / ウイルス・中空状態: No
宿主生物種: Nicotiana tabacum (タバコ) / 別称: PLANTAE(HIGHER PLANTS)
ウイルス殻Shell ID: 1 / 名称: Virus shell 1 / 直径: 180 Å

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実験情報

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構造解析

手法クライオ電子顕微鏡法
解析らせん対称体再構成法
試料の集合状態filament

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試料調製

濃度2.5 mg/mL
緩衝液詳細: Phosphate, 5 mM EDTA
グリッド詳細: Quantifoil grid
凍結凍結剤: ETHANE / 装置: HOMEMADE PLUNGER / 手法: Blot for 2 seconds before plunging

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電子顕微鏡法

顕微鏡FEI TECNAI F30
日付2005年11月22日
撮影カテゴリ: FILM / フィルム・検出器のモデル: KODAK SO-163 FILM / デジタル化 - スキャナー: ZEISS SCAI / デジタル化 - サンプリング間隔: 7.0 µm / 実像数: 7 / 平均電子線量: 15 e/Å2
電子線加速電圧: 200 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN
電子光学系照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.0 mm / 最大 デフォーカス（公称値）: 3.86 µm / 最小 デフォーカス（公称値）: 1.688 µm / 倍率（公称値）: 59000
試料ステージ試料ホルダーモデル: GATAN LIQUID NITROGEN
実験機器
モデル: Tecnai F30 / 画像提供: FEI Company

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画像解析

詳細Filaments were processed using Frealix assuming constant helical parameters and without continuity restraints on the helical parameters.
最終 再構成想定した対称性 - らせんパラメータ - Δz: 1.39259 Å
想定した対称性 - らせんパラメータ - ΔΦ: 22.0318 °
想定した対称性 - らせんパラメータ - 軸対称性: C1 (非対称)
アルゴリズム: OTHER / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 4.5 Å / 解像度の算出法: OTHER / ソフトウェア - 名称: Frealix
詳細: Only data up to 5.5 Angstrom were used during refinement in the final rounds. In earlier rounds, this threshold was set to a lower resolution.
CTF補正詳細: Defocus estimated for each helical subunit
FSC曲線 (解像度の算出)

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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