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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-5908 | |||||||||
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タイトル | Cryo-EM structure of high salt treated immature 30S ribosomal subunit from rsga and rbfa deleted E.coli strain | |||||||||
マップデータ | the map is normalized to N(0,1) | |||||||||
試料 |
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キーワード | 30S subunit assembly / RsgA / RbfA / 17S rRNA processing | |||||||||
生物種 | Escherichia coli (大腸菌) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / ネガティブ染色法 / 解像度: 21.2 Å | |||||||||
データ登録者 | Yang Z / Guo Q / Goto S / Chen Y / Li N / Yan K / Zhang Y / Muto A / Deng H / Himeno H ...Yang Z / Guo Q / Goto S / Chen Y / Li N / Yan K / Zhang Y / Muto A / Deng H / Himeno H / Lei J / Gao N | |||||||||
引用 | ジャーナル: Protein Cell / 年: 2014 タイトル: Structural insights into the assembly of the 30S ribosomal subunit in vivo: functional role of S5 and location of the 17S rRNA precursor sequence. 著者: Zhixiu Yang / Qiang Guo / Simon Goto / Yuling Chen / Ningning Li / Kaige Yan / Yixiao Zhang / Akira Muto / Haiteng Deng / Hyouta Himeno / Jianlin Lei / Ning Gao / 要旨: The in vivo assembly of ribosomal subunits is a highly complex process, with a tight coordination between protein assembly and rRNA maturation events, such as folding and processing of rRNA ...The in vivo assembly of ribosomal subunits is a highly complex process, with a tight coordination between protein assembly and rRNA maturation events, such as folding and processing of rRNA precursors, as well as modifications of selected bases. In the cell, a large number of factors are required to ensure the efficiency and fidelity of subunit production. Here we characterize the immature 30S subunits accumulated in a factor-null Escherichia coli strain (∆rsgA∆rbfA). The immature 30S subunits isolated with varying salt concentrations in the buffer system show interesting differences on both protein composition and structure. Specifically, intermediates derived under the two contrasting salt conditions (high and low) likely reflect two distinctive assembly stages, the relatively early and late stages of the 3' domain assembly, respectively. Detailed structural analysis demonstrates a mechanistic coupling between the maturation of the 5' end of the 17S rRNA and the assembly of the 30S head domain, and attributes a unique role of S5 in coordinating these two events. Furthermore, our structural results likely reveal the location of the unprocessed terminal sequences of the 17S rRNA, and suggest that the maturation events of the 17S rRNA could be employed as quality control mechanisms on subunit production and protein translation. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_5908.map.gz | 7 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-5908-v30.xml emd-5908.xml | 9.6 KB 9.6 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | 400_5908.gif 80_5908.gif | 44 KB 3.8 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-5908 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-5908 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_5908_validation.pdf.gz | 79.1 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_5908_full_validation.pdf.gz | 78.3 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_5908_validation.xml.gz | 493 B | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-5908 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-5908 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_5908.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 7.5 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | the map is normalized to N(0,1) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 2.62 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-試料の構成要素
-全体 : Cryo-EM structure of high salt treated immature 30S ribosomal sub...
全体 | 名称: Cryo-EM structure of high salt treated immature 30S ribosomal subunit from rsga and rbfa deleted E.coli strain |
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要素 |
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-超分子 #1000: Cryo-EM structure of high salt treated immature 30S ribosomal sub...
超分子 | 名称: Cryo-EM structure of high salt treated immature 30S ribosomal subunit from rsga and rbfa deleted E.coli strain タイプ: sample / ID: 1000 / Number unique components: 1 |
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分子量 | 実験値: 800 KDa / 理論値: 800 KDa |
-超分子 #1: high salt treated immature 30S ribosomal subunit from rsga and rb...
超分子 | 名称: high salt treated immature 30S ribosomal subunit from rsga and rbfa deleted E.coli strain タイプ: complex / ID: 1 / Name.synonym: immature 30S / 組換発現: No / データベース: NCBI / Ribosome-details: ribosome-prokaryote: SSU 30S |
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由来(天然) | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) / 株: A19 |
分子量 | 実験値: 800 KDa / 理論値: 800 KDa |
-実験情報
-構造解析
手法 | ネガティブ染色法, クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
緩衝液 | pH: 7.8 詳細: 10mM Tris-HCl, 60mM NH4Cl,10mM MgCl2, 0.1mM EDTA,1mM DTT |
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染色 | タイプ: NEGATIVE / 詳細: grids were prepared with an FEI Vitrobot Mark IV |
グリッド | 詳細: Quantifoil 2/4 grids were coated with carbon and glow discharged in a Harrick Plasma Cleaner for 30 seconds |
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 手法: blot for 1 second before plunging |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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日付 | 2012年11月7日 |
撮影 | カテゴリ: CCD / フィルム・検出器のモデル: FEI EAGLE (4k x 4k) / 平均電子線量: 20 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 120 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 5.2 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 0.82 µm / 倍率(公称値): 59000 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
-画像解析
詳細 | this is a classification volume using RELION |
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CTF補正 | 詳細: weiner filter |
最終 再構成 | アルゴリズム: OTHER / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 21.2 Å / 解像度の算出法: OTHER / ソフトウェア - 名称: SPIDER / 使用した粒子像数: 7766 |