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基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-5638 | |||||||||
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タイトル | 3D Cryo-negative EM structure of nucleosome-bound SWR1 | |||||||||
![]() | Cryo-EM structure of SWR1 (S.c.) bound to recombinant nucleosomes | |||||||||
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![]() | chromatin remodeling / SWR1 / INO80 / nucleosome / Rvb1 / Rvb2 / AAA+ ATPase / histone / dimer exchange / H2A.Z | |||||||||
生物種 | ![]() ![]() | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / ネガティブ染色法 / 解像度: 34.0 Å | |||||||||
![]() | Nguyen VQ / Ranjan A / Stengel F / Wei D / Aebersold R / Wu C / Leschziner AE | |||||||||
![]() | ![]() タイトル: Molecular architecture of the ATP-dependent chromatin-remodeling complex SWR1. 著者: Vu Q Nguyen / Anand Ranjan / Florian Stengel / Debbie Wei / Ruedi Aebersold / Carl Wu / Andres E Leschziner / ![]() 要旨: The ATP-dependent chromatin-remodeling complex SWR1 exchanges a variant histone H2A.Z/H2B dimer for a canonical H2A/H2B dimer at nucleosomes flanking histone-depleted regions, such as promoters. This ...The ATP-dependent chromatin-remodeling complex SWR1 exchanges a variant histone H2A.Z/H2B dimer for a canonical H2A/H2B dimer at nucleosomes flanking histone-depleted regions, such as promoters. This localization of H2A.Z is conserved throughout eukaryotes. SWR1 is a 1 megadalton complex containing 14 different polypeptides, including the AAA+ ATPases Rvb1 and Rvb2. Using electron microscopy, we obtained the three-dimensional structure of SWR1 and mapped its major functional components. Our data show that SWR1 contains a single heterohexameric Rvb1/Rvb2 ring that, together with the catalytic subunit Swr1, brackets two independently assembled multisubunit modules. We also show that SWR1 undergoes a large conformational change upon engaging a limited region of the nucleosome core particle. Our work suggests an important structural role for the Rvbs and a distinct substrate-handling mode by SWR1, thereby providing a structural framework for understanding the complex dimer-exchange reaction. | |||||||||
履歴 |
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構造の表示
ムービー |
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構造ビューア | EMマップ: ![]() ![]() ![]() |
添付画像 |
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ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | ![]() | 11.6 MB | ![]() | |
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ヘッダ (付随情報) | ![]() ![]() | 10 KB 10 KB | 表示 表示 | ![]() |
画像 | ![]() | 65.6 KB | ||
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | ![]() | 78.6 KB | 表示 | ![]() |
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文書・詳細版 | ![]() | 77.7 KB | 表示 | |
XML形式データ | ![]() | 495 B | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-関連構造データ
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リンク
EMDBのページ | ![]() ![]() |
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マップ
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注釈 | Cryo-EM structure of SWR1 (S.c.) bound to recombinant nucleosomes | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 3.45 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
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試料の構成要素
-全体 : SWR1 (S.c.) bound to recombinant nucleosomes
全体 | 名称: SWR1 (S.c.) bound to recombinant nucleosomes |
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要素 |
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-超分子 #1000: SWR1 (S.c.) bound to recombinant nucleosomes
超分子 | 名称: SWR1 (S.c.) bound to recombinant nucleosomes / タイプ: sample / ID: 1000 / Number unique components: 15 |
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分子量 | 理論値: 1.2 MDa |
-分子 #1: SWR1
分子 | 名称: SWR1 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / 組換発現: No / データベース: NCBI |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() |
分子量 | 理論値: 1.2 MDa |
-実験情報
-構造解析
手法 | ネガティブ染色法, クライオ電子顕微鏡法 |
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![]() | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
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試料調製
緩衝液 | pH: 7.4 詳細: 25 mM HEPES-KOH, pH 7.6, 1 mM EDTA, 2 mM MgCl2, 0.01% NP-40, 1 mM DTT, 100 mM KCl |
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染色 | タイプ: NEGATIVE 詳細: Cryo-negative staining with 2% uranyl formate followed by freezing in liquid nitrogen |
グリッド | 詳細: 200 mesh Quantifoil with glow-discharged thin carbon support |
凍結 | 凍結剤: NITROGEN / 装置: OTHER 手法: Cryo-negative stain with 2% uranyl formate. Blotted and frozen in liquid nitrogen. |
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電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TECNAI F20 |
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温度 | 平均: 100 K |
詳細 | Low-dose imaging |
日付 | 2012年5月20日 |
撮影 | カテゴリ: CCD フィルム・検出器のモデル: GATAN ULTRASCAN 4000 (4k x 4k) デジタル化 - サンプリング間隔: 15 µm / 実像数: 300 / 平均電子線量: 20 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 120 kV / 電子線源: ![]() |
電子光学系 | 倍率(補正後): 86700 / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.0 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 2.0 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 0.5 µm / 倍率(公称値): 62000 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: GATAN LIQUID NITROGEN |
実験機器 | ![]() モデル: Tecnai F20 / 画像提供: FEI Company |
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画像解析
詳細 | The dataset was classified using the maximum-likelihood based method in the RELION program. A selected 3D class was then refined against particles assigned to the class using RELION's "Autorefine" function. |
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CTF補正 | 詳細: EMAN2 |
最終 再構成 | アルゴリズム: OTHER / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 34.0 Å / 解像度の算出法: OTHER / ソフトウェア - 名称: RELION / 使用した粒子像数: 12000 |