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- EMDB-52063: Translation-initiation state of human mitochondrial ribosome smal... -

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基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-52063
タイトルTranslation-initiation state of human mitochondrial ribosome small subunit (State D)
マップデータHead-focused map of state D
試料
  • 複合体: Translation-initiation state of human mitochondrial ribosome small subunit (State D)
キーワードmitochondrial ribosomal small subunit / translation-initiation intermediate / immature h44 / single-particle cryo-EM / RIBOSOME
生物種Homo sapiens (ヒト)
手法単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.3 Å
データ登録者Finke AF / Heinrichs M / Aibara S / Richter-Dennerlein R / Hillen HS
資金援助 ドイツ, European Union, 6件
OrganizationGrant number国
German Research Foundation (DFG)EXC 2067/1- 390729940 ドイツ
German Research Foundation (DFG)RI 2715/1- 1 ドイツ
German Research Foundation (DFG)FOR2848 ドイツ
German Research Foundation (DFG)SFB1190 ドイツ
German Research Foundation (DFG)SFB1565 ドイツ
European Research Council (ERC)101116869European Union
引用ジャーナル: Nat Commun / 年: 2025
タイトル: Coupling of ribosome biogenesis and translation initiation in human mitochondria.
著者: Marleen Heinrichs / Anna Franziska Finke / Shintaro Aibara / Angelique Krempler / Angela Boshnakovska / Peter Rehling / Hauke S Hillen / Ricarda Richter-Dennerlein /
要旨: Biogenesis of mitoribosomes requires dedicated chaperones, RNA-modifying enzymes, and GTPases, and defects in mitoribosome assembly lead to severe mitochondriopathies in humans. Here, we characterize ...Biogenesis of mitoribosomes requires dedicated chaperones, RNA-modifying enzymes, and GTPases, and defects in mitoribosome assembly lead to severe mitochondriopathies in humans. Here, we characterize late-step assembly states of the small mitoribosomal subunit (mtSSU) by combining genetic perturbation and mutagenesis analysis with biochemical and structural approaches. Isolation of native mtSSU biogenesis intermediates via a FLAG-tagged variant of the GTPase MTG3 reveals three distinct assembly states, which show how factors cooperate to mature the 12S rRNA. In addition, we observe four distinct primed initiation mtSSU states with an incompletely matured rRNA, suggesting that biogenesis and translation initiation are not mutually exclusive processes but can occur simultaneously. Together, these results provide insights into mtSSU biogenesis and suggest a functional coupling between ribosome biogenesis and translation initiation in human mitochondria.
履歴
登録2024年11月12日-
ヘッダ(付随情報) 公開2025年4月23日-
マップ公開2025年4月23日-
更新2025年4月30日-
現状2025年4月30日処理サイト: PDBe / 状態: 公開

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構造の表示

添付画像

emd_52063.png

ダウンロードとリンク

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マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_52063.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 325 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
注釈Head-focused map of state D
投影像・断面図

画像のコントロール

大きさ
明度
コントラスト
その他
軸Z (Sec.)Y (Row.)X (Col.)
1.05 Å/pix.
x 440 pix.
= 462. Å		1.05 Å/pix.
x 440 pix.
= 462. Å		1.05 Å/pix.
x 440 pix.
= 462. Å

表面

投影像

断面 (1/3)

断面 (1/2)

断面 (2/3)

画像は Spider により作成

ボクセルのサイズX=Y=Z: 1.05 Å
密度

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)
表面レベル登録者による: 0.467
最小 - 最大-1.7537451 - 3.2220745
平均 (標準偏差)0.00062957965 (±0.075081915)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderXYZ
Origin000
サイズ440440440
Spacing440440440
セルA=B=C: 461.99997 Å
α=β=γ: 90.0 °

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添付データ

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マスク #1

ファイルemd_52063_msk_1.map
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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ハーフマップ: Half-map 2 of head-focused map of state D

ファイルemd_52063_half_map_1.map
注釈Half-map 2 of head-focused map of state D
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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ハーフマップ: Half-map 1 of head-focused map of state D

ファイルemd_52063_half_map_2.map
注釈Half-map 1 of head-focused map of state D
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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試料の構成要素

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全体 : Translation-initiation state of human mitochondrial ribosome smal...

全体名称: Translation-initiation state of human mitochondrial ribosome small subunit (State D)
要素
  • 複合体: Translation-initiation state of human mitochondrial ribosome small subunit (State D)

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超分子 #1: Translation-initiation state of human mitochondrial ribosome smal...

超分子名称: Translation-initiation state of human mitochondrial ribosome small subunit (State D)
タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0
詳細: Translation-initiation mtSSU intermediate with immature h44 and in complex with mtIF3.
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト) / 株: HEK293T
分子量理論値: 990 KDa

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実験情報

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構造解析

手法クライオ電子顕微鏡法
解析単粒子再構成法
試料の集合状態particle

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試料調製

緩衝液pH: 7.4
構成要素:
濃度名称
20.0 mMHepes-HCl
100.0 mMPotassium chloride
20.0 mMMagnesium chloride
0.02 %DDM
1.0 mMPMSF
1.0 Xprotease-inhibitor mix
0.5 mMGMP-PNP

詳細: 20mM HEPES-HCl, 100mM KCl, 20mM MgCl2, 0.02% DDM, 1mM PMSF, 1x protease-inhibitor mix, 0.5mM GMP-PNP
グリッドモデル: Quantifoil R3.5/1 / 材質: COPPER / 支持フィルム - #0 - Film type ID: 1 / 支持フィルム - #0 - 材質: CARBON / 支持フィルム - #0 - トポロジー: HOLEY / 支持フィルム - #1 - Film type ID: 2 / 支持フィルム - #1 - 材質: CARBON / 支持フィルム - #1 - トポロジー: CONTINUOUS / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 詳細: The grid was precoated with a 2-3 nm carbon layer.
凍結凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 95 % / チャンバー内温度: 277.15 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV
詳細The sample was crosslinked with 0.15% glutaraldehyde for 10 min on ice. The reaction was stopped by adding 50 mM lysine pH 7.5 and 50 mM aspartate pH 7.5, and subsequently desalted against the final buffer prior to vitrification.

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電子顕微鏡法

顕微鏡TFS KRIOS
撮影フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 BIOCONTINUUM (6k x 4k)
平均露光時間: 3.0 sec. / 平均電子線量: 40.0 e/Å2
電子線加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN
電子光学系照射モード: OTHER / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス（公称値）: 1.6 µm / 最小 デフォーカス（公称値）: 0.6 µm / 倍率（公称値）: 81000
試料ステージ試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER
ホルダー冷却材: NITROGEN
実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company

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画像解析

粒子像選択選択した数: 5730547
初期モデルモデルのタイプ: NONE / 詳細: ab initio reconstruction after 2D classification
最終 再構成使用したクラス数: 1 / アルゴリズム: FOURIER SPACE / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 3.3 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: cryoSPARC (ver. 4.4.1.) / 使用した粒子像数: 80262
初期 角度割当タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD / ソフトウェア - 名称: RELION (ver. 3.0)
最終 角度割当タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD / ソフトウェア - 名称: RELION (ver. 3.0)
最終 3次元分類クラス数: 3 / 平均メンバー数/クラス: 109367 / ソフトウェア - 名称: RELION (ver. 3.0)

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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