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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-5141 | |||||||||
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タイトル | Ab initio reconstruction of the E. coli 70S ribosome complex (70S-fMet-tRNAfMet-Phe-tRNAPhe-EF-Tu-GDP-kirromycin) via the asymmetric random-model method. | |||||||||
マップデータ | This is a ab initio starting model for the E. coli 70S ribosome complex (70S-fMet-tRNAfMet-Phe-tRNAPhe-EF-Tu-GDP-kirromycin) | |||||||||
試料 |
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キーワード | Random-model method / ab initio reconstruction / E. coli 70S ribosome | |||||||||
生物種 | Escherichia coli (大腸菌) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 23.0 Å | |||||||||
データ登録者 | Sanz E / Stewart AB / Belnap DM | |||||||||
引用 | ジャーナル: Nat Struct Biol / 年: 2003 タイトル: Incorporation of aminoacyl-tRNA into the ribosome as seen by cryo-electron microscopy. 著者: Mikel Valle / Andrey Zavialov / Wen Li / Scott M Stagg / Jayati Sengupta / Rikke C Nielsen / Poul Nissen / Stephen C Harvey / Måns Ehrenberg / Joachim Frank / 要旨: Aminoacyl-tRNAs (aa-tRNAs) are delivered to the ribosome as part of the ternary complex of aa-tRNA, elongation factor Tu (EF-Tu) and GTP. Here, we present a cryo-electron microscopy (cryo-EM) study, ...Aminoacyl-tRNAs (aa-tRNAs) are delivered to the ribosome as part of the ternary complex of aa-tRNA, elongation factor Tu (EF-Tu) and GTP. Here, we present a cryo-electron microscopy (cryo-EM) study, at a resolution of approximately 9 A, showing that during the incorporation of the aa-tRNA into the 70S ribosome of Escherichia coli, the flexibility of aa-tRNA allows the initial codon recognition and its accommodation into the ribosomal A site. In addition, a conformational change observed in the GTPase-associated center (GAC) of the ribosomal 50S subunit may provide the mechanism by which the ribosome promotes a relative movement of the aa-tRNA with respect to EF-Tu. This relative rearrangement seems to facilitate codon recognition by the incoming aa-tRNA, and to provide the codon-anticodon recognition-dependent signal for the GTPase activity of EF-Tu. From these new findings we propose a mechanism that can explain the sequence of events during the decoding of mRNA on the ribosome. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_5141.map.gz | 4.1 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-5141-v30.xml emd-5141.xml | 9.2 KB 9.2 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_5141_1.tif | 489.2 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-5141 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-5141 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_5141_validation.pdf.gz | 78.2 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_5141_full_validation.pdf.gz | 77.2 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_5141_validation.xml.gz | 493 B | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-5141 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-5141 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_5141.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 8 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | This is a ab initio starting model for the E. coli 70S ribosome complex (70S-fMet-tRNAfMet-Phe-tRNAPhe-EF-Tu-GDP-kirromycin) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 2.82 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-試料の構成要素
-全体 : E. coli 70S ribosome complex, 70S-fMet-tRNAfMet-Phe-tRNAPhe-EF-Tu...
全体 | 名称: E. coli 70S ribosome complex, 70S-fMet-tRNAfMet-Phe-tRNAPhe-EF-Tu-GDP-kirromycin |
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要素 |
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-超分子 #1000: E. coli 70S ribosome complex, 70S-fMet-tRNAfMet-Phe-tRNAPhe-EF-Tu...
超分子 | 名称: E. coli 70S ribosome complex, 70S-fMet-tRNAfMet-Phe-tRNAPhe-EF-Tu-GDP-kirromycin タイプ: sample / ID: 1000 / 集合状態: One ribosome binds two tRNA and one EF-Tu / Number unique components: 6 |
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-超分子 #1: 70S ribosome complex
超分子 | 名称: 70S ribosome complex / タイプ: complex / ID: 1 / 組換発現: No / データベース: NCBI / Ribosome-details: ribosome-prokaryote: ALL |
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由来(天然) | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
凍結 | 凍結剤: ETHANE / 装置: OTHER |
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-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TECNAI F20 |
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撮影 | カテゴリ: FILM / フィルム・検出器のモデル: GENERIC FILM / デジタル化 - スキャナー: ZEISS SCAI / デジタル化 - サンプリング間隔: 14 µm |
電子線 | 加速電圧: 200 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 4.0 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 1.6 µm / 倍率(公称値): 50000 |
試料ステージ | 試料ホルダー: Eucentric / 試料ホルダーモデル: SIDE ENTRY, EUCENTRIC |
実験機器 | モデル: Tecnai F20 / 画像提供: FEI Company |
-画像解析
CTF補正 | 詳細: Phase-flipped per micrograph |
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最終 再構成 | アルゴリズム: OTHER / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 23.0 Å / 解像度の算出法: FSC 0.5 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: PFT3DR, Bsoft 詳細: Random-model method. Angular step-size was initially set to 20 deg. in the first iteration and gradually decreased by 0.19 deg. in each successive iteration, until a lower limit of 1 deg. was reached. 使用した粒子像数: 10000 |