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基本情報
| 登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-4658 | |||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| タイトル | Structure of the human U5.U4/U6 tri-snRNP at 2.9A resolution. | |||||||||
マップデータ | Human U4.U5/U6 tri-snRNP, overall map. | |||||||||
試料 |
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キーワード | RNP complex / splicing / RNA / protein / spliceosome | |||||||||
| 機能・相同性 | 機能・相同性情報Lsm2-8 complex / U6 snRNA 3'-end binding / spliceosomal snRNP complex / ribonucleoprotein complex localization / U4atac snRNP / positive regulation of cytotoxic T cell differentiation / maturation of 5S rRNA / RNA localization / U4atac snRNA binding / mRNA decay by 5' to 3' exoribonuclease ...Lsm2-8 complex / U6 snRNA 3'-end binding / spliceosomal snRNP complex / ribonucleoprotein complex localization / U4atac snRNP / positive regulation of cytotoxic T cell differentiation / maturation of 5S rRNA / RNA localization / U4atac snRNA binding / mRNA decay by 5' to 3' exoribonuclease / Lsm1-7-Pat1 complex / R-loop processing / U6 snRNP / box C/D sno(s)RNA binding / PH domain binding / U2 snRNP binding / U7 snRNA binding / histone pre-mRNA DCP binding / U7 snRNP / dense fibrillar component / histone pre-mRNA 3'end processing complex / cis assembly of pre-catalytic spliceosome / SLBP independent Processing of Histone Pre-mRNAs / SLBP Dependent Processing of Replication-Dependent Histone Pre-mRNAs / spliceosome conformational change to release U4 (or U4atac) and U1 (or U11) / box C/D methylation guide snoRNP complex / protein methylation / U4/U6 snRNP / U12-type spliceosomal complex / 7-methylguanosine cap hypermethylation / U1 snRNP binding / methylosome / pICln-Sm protein complex / U2-type catalytic step 1 spliceosome / RNA splicing, via transesterification reactions / snRNP binding / small nuclear ribonucleoprotein complex / sno(s)RNA-containing ribonucleoprotein complex / SMN-Sm protein complex / spliceosomal tri-snRNP complex / P granule / U4 snRNA binding / telomerase holoenzyme complex / U2-type precatalytic spliceosome / commitment complex / mRNA cis splicing, via spliceosome / telomerase RNA binding / U2-type prespliceosome assembly / U2-type spliceosomal complex / U2-type catalytic step 2 spliceosome / box C/D snoRNP assembly / U2 snRNP / P-body assembly / RNA Polymerase II Transcription Termination / U1 snRNP / U4 snRNP / U2-type prespliceosome / U3 snoRNA binding / tRNA processing / K63-linked polyubiquitin modification-dependent protein binding / rRNA modification in the nucleus and cytosol / precatalytic spliceosome / spliceosomal complex assembly / mRNA Splicing - Minor Pathway / mRNA catabolic process / negative regulation of mRNA splicing, via spliceosome / nuclear-transcribed mRNA catabolic process / spliceosomal tri-snRNP complex assembly / MLL1 complex / U5 snRNA binding / U5 snRNP / protein deubiquitination / U2 snRNA binding / U6 snRNA binding / pre-mRNA intronic binding / spliceosomal snRNP assembly / single fertilization / ribonucleoprotein complex binding / RNA processing / U1 snRNA binding / Major pathway of rRNA processing in the nucleolus and cytosol / Cajal body / U4/U6 x U5 tri-snRNP complex / catalytic step 2 spliceosome / mRNA Splicing - Major Pathway / RNA splicing / response to cocaine / response to bacterium / spliceosomal complex / maturation of SSU-rRNA / P-body / small-subunit processome / helicase activity / mRNA splicing, via spliceosome / small GTPase binding / cellular response to xenobiotic stimulus / mRNA processing / osteoblast differentiation / cellular response to tumor necrosis factor / cellular response to lipopolysaccharide 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
| 生物種 | Homo sapiens (ヒト) | |||||||||
| 手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.92 Å | |||||||||
データ登録者 | Charenton C / Wilkinson ME | |||||||||
| 資金援助 | 英国, 2件
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引用 | ジャーナル: Science / 年: 2019タイトル: Mechanism of 5' splice site transfer for human spliceosome activation. 著者: Clément Charenton / Max E Wilkinson / Kiyoshi Nagai / ![]() 要旨: The prespliceosome, comprising U1 and U2 small nuclear ribonucleoproteins (snRNPs) bound to the precursor messenger RNA 5' splice site (5'SS) and branch point sequence, associates with the U4/U6.U5 ...The prespliceosome, comprising U1 and U2 small nuclear ribonucleoproteins (snRNPs) bound to the precursor messenger RNA 5' splice site (5'SS) and branch point sequence, associates with the U4/U6.U5 tri-snRNP to form the fully assembled precatalytic pre-B spliceosome. Here, we report cryo-electron microscopy structures of the human pre-B complex captured before U1 snRNP dissociation at 3.3-angstrom core resolution and the human tri-snRNP at 2.9-angstrom resolution. U1 snRNP inserts the 5'SS-U1 snRNA helix between the two RecA domains of the Prp28 DEAD-box helicase. Adenosine 5'-triphosphate-dependent closure of the Prp28 RecA domains releases the 5'SS to pair with the nearby U6 ACAGAGA-box sequence presented as a mobile loop. The structures suggest that formation of the 5'SS-ACAGAGA helix triggers remodeling of an intricate protein-RNA network to induce Brr2 helicase relocation to its loading sequence in U4 snRNA, enabling Brr2 to unwind the U4/U6 snRNA duplex to allow U6 snRNA to form the catalytic center of the spliceosome. | |||||||||
| 履歴 |
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構造の表示
| ムービー |
ムービービューア |
|---|---|
| 構造ビューア | EMマップ: SurfView Molmil Jmol/JSmol |
| 添付画像 |
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ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
| マップデータ | emd_4658.map.gz | 260.2 MB | EMDBマップデータ形式 | |
|---|---|---|---|---|
| ヘッダ (付随情報) | emd-4658-v30.xml emd-4658.xml | 60.5 KB 60.5 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
| FSC (解像度算出) | emd_4658_fsc.xml | 14.8 KB | 表示 | FSCデータファイル |
| 画像 | emd_4658.png | 181.4 KB | ||
| Filedesc metadata | emd-4658.cif.gz | 16.6 KB | ||
| その他 | emd_4658_additional.map.gz | 260.1 MB | ||
| アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-4658 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-4658 | HTTPS FTP |
-検証レポート
| 文書・要旨 | emd_4658_validation.pdf.gz | 624.6 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
|---|---|---|---|---|
| 文書・詳細版 | emd_4658_full_validation.pdf.gz | 624.2 KB | 表示 | |
| XML形式データ | emd_4658_validation.xml.gz | 14 KB | 表示 | |
| CIF形式データ | emd_4658_validation.cif.gz | 19.3 KB | 表示 | |
| アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-4658 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-4658 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
| 関連構造データ | ![]() 6qw6MC ![]() 4665C ![]() 4672C ![]() 4673C ![]() 4674C ![]() 4675C ![]() 4676C ![]() 4686C ![]() 4687C ![]() 4688C ![]() 4689C ![]() 4690C ![]() 6qx9C M: このマップから作成された原子モデル C: 同じ文献を引用 ( |
|---|---|
| 類似構造データ | |
| 電子顕微鏡画像生データ | EMPIAR-10307 (タイトル: Human pre-B spliceosome and U4/U6.U5 tri-snRNPData size: 2.3 TB Data #1: Dataset 1 of human pre-B spliceosome; motion-corrected micrographs [micrographs - single frame] Data #2: Dataset 2 of human pre-B spliceosome; motion-corrected micrographs [micrographs - single frame] Data #3: Dataset 3 of human pre-B spliceosome; motion-corrected micrographs [micrographs - single frame] Data #4: Dataset 4 of human pre-B spliceosome; motion-corrected micrographs [micrographs - single frame] Data #5: Dataset 5 of human pre-B spliceosome; motion-corrected micrographs [micrographs - single frame] Data #6: Selected U4/U6.U5 tri-snRNP particles after Bayesian polishing [picked particles - single frame - processed] Data #7: Crude shifted preB particles [picked particles - single frame - unprocessed]) |
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リンク
| EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
|---|---|
| 「今月の分子」の関連する項目 |
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マップ
| ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_4658.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 282.6 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 注釈 | Human U4.U5/U6 tri-snRNP, overall map. | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.022 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 密度 |
| ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
| ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
-添付データ
-追加マップ: Composite map from the multi body refinement. For...
| ファイル | emd_4658_additional.map | ||||||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 注釈 | Composite map from the multi body refinement. For each map voxel, the map value was taken from the body with the highest local resolution as calculated with RELION. | ||||||||||||
| 投影像・断面図 |
| ||||||||||||
| 密度ヒストグラム |
-
試料の構成要素
+全体 : Human U4/U6.U5 tri-snRNP
+超分子 #1: Human U4/U6.U5 tri-snRNP
+超分子 #2: U5.U4/U6 tri-snRNP
+超分子 #3: Probable ATP-dependent RNA helicase DDX23
+分子 #1: U4/U6.U5 small nuclear ribonucleoprotein 27 kDa protein
+分子 #3: Small nuclear ribonucleoprotein Sm D1
+分子 #4: Small nuclear ribonucleoprotein Sm D2
+分子 #5: Small nuclear ribonucleoprotein Sm D3
+分子 #6: U4/U6 small nuclear ribonucleoprotein Prp3
+分子 #7: U4/U6 small nuclear ribonucleoprotein Prp4
+分子 #8: U4/U6 small nuclear ribonucleoprotein Prp31
+分子 #9: NHP2-like protein 1
+分子 #10: Small nuclear ribonucleoprotein-associated proteins B and B'
+分子 #11: Small nuclear ribonucleoprotein E
+分子 #12: Small nuclear ribonucleoprotein F
+分子 #13: Small nuclear ribonucleoprotein G
+分子 #15: Pre-mRNA-processing-splicing factor 8
+分子 #16: U5 small nuclear ribonucleoprotein 200 kDa helicase
+分子 #17: 116 kDa U5 small nuclear ribonucleoprotein component
+分子 #18: Thioredoxin-like protein 4A
+分子 #19: Pre-mRNA-processing factor 6
+分子 #20: U5 small nuclear ribonucleoprotein 40 kDa protein
+分子 #21: Probable ATP-dependent RNA helicase DDX23
+分子 #23: U6 snRNA-associated Sm-like protein LSm2
+分子 #24: U6 snRNA-associated Sm-like protein LSm3
+分子 #25: U6 snRNA-associated Sm-like protein LSm4
+分子 #26: U6 snRNA-associated Sm-like protein LSm5
+分子 #27: U6 snRNA-associated Sm-like protein LSm6
+分子 #28: U6 snRNA-associated Sm-like protein LSm7
+分子 #29: U6 snRNA-associated Sm-like protein LSm8
+分子 #30: RNA-binding protein 42
+分子 #31: U4/U6.U5 tri-snRNP-associated protein 1
+分子 #32: U4/U6.U5 tri-snRNP-associated protein 2
+分子 #2: U4 snRNA
+分子 #14: U5 snRNA
+分子 #22: U6 snRNA
+分子 #33: INOSITOL HEXAKISPHOSPHATE
+分子 #34: MAGNESIUM ION
+分子 #35: GUANOSINE-5'-TRIPHOSPHATE
+分子 #36: ZINC ION
-実験情報
-構造解析
| 手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
|---|---|
解析 | 単粒子再構成法 |
| 試料の集合状態 | particle |
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試料調製
| 濃度 | 1.3 mg/mL | ||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 緩衝液 | pH: 7.9 構成要素:
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| グリッド | モデル: Quantifoil R2/2 / 材質: COPPER / メッシュ: 300 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: CONTINUOUS / 支持フィルム - Film thickness: 6 / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 前処理 - 時間: 20 sec. | ||||||||
| 凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 277 K / 装置: FEI VITROBOT MARK III / 詳細: Wait 30s, blot for 2s to 3s.. |
-
電子顕微鏡法
| 顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
|---|---|
| 特殊光学系 | エネルギーフィルター - 名称: GIF Bioquantum / エネルギーフィルター - スリット幅: 20 eV |
| 撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 検出モード: COUNTING / デジタル化 - 画像ごとのフレーム数: 1-40 / 平均露光時間: 6.0 sec. / 平均電子線量: 50.0 e/Å2 |
| 電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
| 電子光学系 | C2レンズ絞り径: 70.0 µm / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 倍率(公称値): 130000 |
| 試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER ホルダー冷却材: NITROGEN |
| 実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
ムービー
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万見について



キーワード
Homo sapiens (ヒト)
データ登録者
英国, 2件
引用
UCSF Chimera









































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Y (Row.)
X (Col.)
































解析


