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基本情報
| 登録情報 | データベース: PDB / ID: 6qw6 | |||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| タイトル | Structure of the human U5.U4/U6 tri-snRNP at 2.9A resolution. | |||||||||
要素 |
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キーワード | SPLICING / RNP complex / RNA / protein / spliceosome | |||||||||
| 機能・相同性 | 機能・相同性情報Lsm2-8 complex / U6 snRNA 3'-end binding / spliceosomal snRNP complex / ribonucleoprotein complex localization / U4atac snRNP / positive regulation of cytotoxic T cell differentiation / maturation of 5S rRNA / RNA localization / U4atac snRNA binding / mRNA decay by 5' to 3' exoribonuclease ...Lsm2-8 complex / U6 snRNA 3'-end binding / spliceosomal snRNP complex / ribonucleoprotein complex localization / U4atac snRNP / positive regulation of cytotoxic T cell differentiation / maturation of 5S rRNA / RNA localization / U4atac snRNA binding / mRNA decay by 5' to 3' exoribonuclease / Lsm1-7-Pat1 complex / R-loop processing / U6 snRNP / box C/D sno(s)RNA binding / PH domain binding / U2 snRNP binding / U7 snRNA binding / histone pre-mRNA DCP binding / U7 snRNP / dense fibrillar component / histone pre-mRNA 3'end processing complex / cis assembly of pre-catalytic spliceosome / SLBP independent Processing of Histone Pre-mRNAs / SLBP Dependent Processing of Replication-Dependent Histone Pre-mRNAs / spliceosome conformational change to release U4 (or U4atac) and U1 (or U11) / box C/D methylation guide snoRNP complex / protein methylation / U4/U6 snRNP / U12-type spliceosomal complex / 7-methylguanosine cap hypermethylation / U1 snRNP binding / methylosome / RNA splicing, via transesterification reactions / pICln-Sm protein complex / U2-type catalytic step 1 spliceosome / snRNP binding / sno(s)RNA-containing ribonucleoprotein complex / SMN-Sm protein complex / small nuclear ribonucleoprotein complex / spliceosomal tri-snRNP complex / U4 snRNA binding / P granule / telomerase holoenzyme complex / U2-type precatalytic spliceosome / commitment complex / mRNA cis splicing, via spliceosome / telomerase RNA binding / U2-type spliceosomal complex / U2-type prespliceosome assembly / U2-type catalytic step 2 spliceosome / box C/D snoRNP assembly / RNA Polymerase II Transcription Termination / P-body assembly / U2 snRNP / U1 snRNP / U4 snRNP / U2-type prespliceosome / rRNA modification in the nucleus and cytosol / U3 snoRNA binding / tRNA processing / K63-linked polyubiquitin modification-dependent protein binding / precatalytic spliceosome / mRNA catabolic process / spliceosomal complex assembly / mRNA Splicing - Minor Pathway / negative regulation of mRNA splicing, via spliceosome / nuclear-transcribed mRNA catabolic process / MLL1 complex / spliceosomal tri-snRNP complex assembly / U5 snRNA binding / protein deubiquitination / U5 snRNP / U2 snRNA binding / U6 snRNA binding / pre-mRNA intronic binding / single fertilization / Major pathway of rRNA processing in the nucleolus and cytosol / spliceosomal snRNP assembly / ribonucleoprotein complex binding / RNA processing / U1 snRNA binding / Cajal body / U4/U6 x U5 tri-snRNP complex / catalytic step 2 spliceosome / mRNA Splicing - Major Pathway / RNA splicing / response to cocaine / maturation of SSU-rRNA / response to bacterium / spliceosomal complex / small-subunit processome / P-body / helicase activity / mRNA splicing, via spliceosome / small GTPase binding / cellular response to xenobiotic stimulus / mRNA processing / osteoblast differentiation / cellular response to tumor necrosis factor / cellular response to lipopolysaccharide 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
| 生物種 | Homo sapiens (ヒト) | |||||||||
| 手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.92 Å | |||||||||
データ登録者 | Charenton, C. / Wilkinson, M.E. / Nagai, K. | |||||||||
| 資金援助 | 英国, 2件
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引用 | ジャーナル: Science / 年: 2019タイトル: Mechanism of 5' splice site transfer for human spliceosome activation. 著者: Clément Charenton / Max E Wilkinson / Kiyoshi Nagai / ![]() 要旨: The prespliceosome, comprising U1 and U2 small nuclear ribonucleoproteins (snRNPs) bound to the precursor messenger RNA 5' splice site (5'SS) and branch point sequence, associates with the U4/U6.U5 ...The prespliceosome, comprising U1 and U2 small nuclear ribonucleoproteins (snRNPs) bound to the precursor messenger RNA 5' splice site (5'SS) and branch point sequence, associates with the U4/U6.U5 tri-snRNP to form the fully assembled precatalytic pre-B spliceosome. Here, we report cryo-electron microscopy structures of the human pre-B complex captured before U1 snRNP dissociation at 3.3-angstrom core resolution and the human tri-snRNP at 2.9-angstrom resolution. U1 snRNP inserts the 5'SS-U1 snRNA helix between the two RecA domains of the Prp28 DEAD-box helicase. Adenosine 5'-triphosphate-dependent closure of the Prp28 RecA domains releases the 5'SS to pair with the nearby U6 ACAGAGA-box sequence presented as a mobile loop. The structures suggest that formation of the 5'SS-ACAGAGA helix triggers remodeling of an intricate protein-RNA network to induce Brr2 helicase relocation to its loading sequence in U4 snRNA, enabling Brr2 to unwind the U4/U6 snRNA duplex to allow U6 snRNA to form the catalytic center of the spliceosome. | |||||||||
| 履歴 |
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| ムービー |
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|---|---|
| 構造ビューア | 分子: Molmil Jmol/JSmol |
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| PDBx/mmCIF形式 | 6qw6.cif.gz | 2 MB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
|---|---|---|---|---|
| PDB形式 | pdb6qw6.ent.gz | 表示 | PDB形式 | |
| PDBx/mmJSON形式 | 6qw6.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
| その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
| 文書・要旨 | 6qw6_validation.pdf.gz | 1.6 MB | 表示 | wwPDB検証レポート |
|---|---|---|---|---|
| 文書・詳細版 | 6qw6_full_validation.pdf.gz | 1.8 MB | 表示 | |
| XML形式データ | 6qw6_validation.xml.gz | 272.7 KB | 表示 | |
| CIF形式データ | 6qw6_validation.cif.gz | 433.4 KB | 表示 | |
| アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/qw/6qw6 ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/qw/6qw6 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
| 関連構造データ | ![]() 4658MC ![]() 4665C ![]() 4672C ![]() 4673C ![]() 4674C ![]() 4675C ![]() 4676C ![]() 4686C ![]() 4687C ![]() 4688C ![]() 4689C ![]() 4690C ![]() 6qx9C M: このデータのモデリングに利用したマップデータ C: 同じ文献を引用 ( |
|---|---|
| 類似構造データ | |
| 電子顕微鏡画像生データ | EMPIAR-10307 (タイトル: Human pre-B spliceosome and U4/U6.U5 tri-snRNPData size: 2.3 TB Data #1: Dataset 1 of human pre-B spliceosome; motion-corrected micrographs [micrographs - single frame] Data #2: Dataset 2 of human pre-B spliceosome; motion-corrected micrographs [micrographs - single frame] Data #3: Dataset 3 of human pre-B spliceosome; motion-corrected micrographs [micrographs - single frame] Data #4: Dataset 4 of human pre-B spliceosome; motion-corrected micrographs [micrographs - single frame] Data #5: Dataset 5 of human pre-B spliceosome; motion-corrected micrographs [micrographs - single frame] Data #6: Selected U4/U6.U5 tri-snRNP particles after Bayesian polishing [picked particles - single frame - processed] Data #7: Crude shifted preB particles [picked particles - single frame - unprocessed]) |
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リンク
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集合体
| 登録構造単位 | ![]()
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|---|---|
| 1 |
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要素
-タンパク質 , 9種, 10分子 X4D4b5b5A5C5D5J5XR
| #1: タンパク質 | 分子量: 18915.414 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q8WVK2 | ||||||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| #9: タンパク質 | 分子量: 14191.524 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P55769 | ||||||||||||
| #10: タンパク質 | 分子量: 24642.131 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P14678#15: タンパク質 | | 分子量: 271508.281 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q6P2Q9#17: タンパク質 | | 分子量: 95836.836 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q15029#18: タンパク質 | | 分子量: 16807.346 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P83876#19: タンパク質 | | 分子量: 107092.242 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: O94906#21: タンパク質 | | 分子量: 95785.148 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: DDX23 / 発現宿主: ![]() #30: タンパク質 | | 分子量: 50477.922 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q9BTD8 |
-RNA鎖 , 3種, 3分子 456
| #2: RNA鎖 | 分子量: 46997.742 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) |
|---|---|
| #14: RNA鎖 | 分子量: 37254.855 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) |
| #22: RNA鎖 | 分子量: 28342.910 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) |
-Small nuclear ribonucleoprotein ... , 6種, 12分子 4151425243534e5e4f5f4g5g
| #3: タンパク質 | 分子量: 13310.653 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P62314#4: タンパク質 | 分子量: 13551.928 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P62316#5: タンパク質 | 分子量: 13940.308 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P62318#11: タンパク質 | 分子量: 10817.601 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P62304#12: タンパク質 | 分子量: 9734.171 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P62306#13: タンパク質 | 分子量: 8508.084 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P62308 |
|---|
-U4/U6 small nuclear ribonucleoprotein ... , 3種, 3分子 4A4B4C
| #6: タンパク質 | 分子量: 77669.188 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: O43395 |
|---|---|
| #7: タンパク質 | 分子量: 58536.105 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: O43172 |
| #8: タンパク質 | 分子量: 55528.969 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q8WWY3 |
-U5 small nuclear ribonucleoprotein ... , 2種, 2分子 5B5O
| #16: タンパク質 | 分子量: 244823.422 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: O75643, RNA helicase |
|---|---|
| #20: タンパク質 | 分子量: 39359.492 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q96DI7 |
-U6 snRNA-associated Sm-like protein ... , 7種, 7分子 62636465666768
| #23: タンパク質 | 分子量: 10847.495 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q9Y333 |
|---|---|
| #24: タンパク質 | 分子量: 11859.390 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P62310 |
| #25: タンパク質 | 分子量: 15375.775 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q9Y4Z0 |
| #26: タンパク質 | 分子量: 9945.448 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q9Y4Y9 |
| #27: タンパク質 | 分子量: 9139.571 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P62312 |
| #28: タンパク質 | 分子量: 11617.363 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q9UK45 |
| #29: タンパク質 | 分子量: 10410.589 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: O95777 |
-U4/U6.U5 tri-snRNP-associated protein ... , 2種, 2分子 SU
| #31: タンパク質 | 分子量: 90414.117 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: O43290 |
|---|---|
| #32: タンパク質 | 分子量: 64408.445 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q53GS9 |
-非ポリマー , 4種, 4分子 






| #33: 化合物 | ChemComp-IHP / |
|---|---|
| #34: 化合物 | ChemComp-MG / |
| #35: 化合物 | ChemComp-GTP / |
| #36: 化合物 | ChemComp-ZN / |
-詳細
| Has protein modification | Y |
|---|
-実験情報
-実験
| 実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
|---|---|
| EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
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試料調製
| 構成要素 |
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|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 分子量 | 値: 1.7 MDa / 実験値: NO | ||||||||||||||||||||||||
| 由来(天然) |
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| 由来(組換発現) | 生物種: ![]() | ||||||||||||||||||||||||
| 緩衝液 | pH: 7.9 | ||||||||||||||||||||||||
| 緩衝液成分 |
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| 試料 | 濃度: 1.3 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES | ||||||||||||||||||||||||
| 試料支持 | グリッドの材料: COPPER / グリッドのサイズ: 300 divisions/in. / グリッドのタイプ: Quantifoil R2/2 | ||||||||||||||||||||||||
| 急速凍結 | 装置: FEI VITROBOT MARK III / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 100 % / 凍結前の試料温度: 277 K / 詳細: Wait 30s, blot for 2s to 3s. |
-
電子顕微鏡撮影
| 実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
|---|---|
| 顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
| 電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
| 電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 倍率(公称値): 130000 X / Cs: 2.7 mm / C2レンズ絞り径: 70 µm |
| 試料ホルダ | 凍結剤: NITROGEN 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER |
| 撮影 | 平均露光時間: 6 sec. / 電子線照射量: 50 e/Å2 / 検出モード: COUNTING フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) |
| 電子光学装置 | エネルギーフィルター名称: GIF Bioquantum / エネルギーフィルタースリット幅: 20 eV |
| 画像スキャン | 動画フレーム数/画像: 40 / 利用したフレーム数/画像: 1-40 |
-
解析
| EMソフトウェア |
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|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | ||||||||||||||||||||||||||||||||
| 粒子像の選択 | 選択した粒子像数: 1147653 | ||||||||||||||||||||||||||||||||
| 対称性 | 点対称性: C1 (非対称) | ||||||||||||||||||||||||||||||||
| 3次元再構成 | 解像度: 2.92 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 585488 / アルゴリズム: FOURIER SPACE / クラス平均像の数: 1 / 対称性のタイプ: POINT |
ムービー
コントローラー
万見について




Homo sapiens (ヒト)
英国, 2件
引用
UCSF Chimera



















PDBj














































