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基本情報
登録情報 | ![]() | ||||||||||||
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タイトル | Structure of Mycobacterium smegmatis 50S ribosomal subunit bound to delNTE-HflX | ||||||||||||
![]() | Structure of Mycobacterium smegmatis 50S ribosomal subunit bound to delNTE-HflX | ||||||||||||
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![]() | ribosome splitting / Mycobacterium smegmatis 50S / HflX / TRANSLATION / RIBOSOME | ||||||||||||
機能・相同性 | ![]() large ribosomal subunit / transferase activity / ribosome binding / 5S rRNA binding / ribosomal large subunit assembly / large ribosomal subunit rRNA binding / cytosolic large ribosomal subunit / cytoplasmic translation / tRNA binding / negative regulation of translation ...large ribosomal subunit / transferase activity / ribosome binding / 5S rRNA binding / ribosomal large subunit assembly / large ribosomal subunit rRNA binding / cytosolic large ribosomal subunit / cytoplasmic translation / tRNA binding / negative regulation of translation / rRNA binding / ribosome / structural constituent of ribosome / translation / ribonucleoprotein complex / GTPase activity / mRNA binding / GTP binding / metal ion binding / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | ||||||||||||
生物種 | ![]() | ||||||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.44 Å | ||||||||||||
![]() | Majumdar S / Koripella RK / Sharma MR / Manjari SR / Banavali NK / Agrawal RK | ||||||||||||
資金援助 | ![]()
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![]() | ![]() タイトル: HflX-mediated drug resistance through ribosome splitting and rRNA disordering in mycobacteria. 著者: Soneya Majumdar / Amuliya Kashyap / Ravi K Koripella / Manjuli R Sharma / Kelley Hurst-Hess / Swati R Manjari / Nilesh K Banavali / Pallavi Ghosh / Rajendra K Agrawal / ![]() 要旨: HflX is a highly conserved ribosome-associated GTPase implicated in rescuing stalled ribosomes and mediating antibiotic resistance in several bacteria, including macrolide-lincosamide antibiotic ...HflX is a highly conserved ribosome-associated GTPase implicated in rescuing stalled ribosomes and mediating antibiotic resistance in several bacteria, including macrolide-lincosamide antibiotic resistance in mycobacteria. Mycobacterial HflXs carry a distinct N-terminal extension (NTE) and a small insertion, as compared to their eubacterial homologs. Here, we present several high-resolution cryo-EM structures of mycobacterial HflX in complex with the 70S ribosome and its 50S subunit, with and without antibiotics. These structures reveal a distinct mechanism for HflX-mediated ribosome splitting and antibiotic resistance in mycobacteria. Our findings indicate that the NTE of mycobacterial HflX induces persistent disordering of multiple 23S rRNA helices, facilitating the dissociation of the 70S ribosome and generating an inactive pool of 50S subunits. During this process, HflX undergoes a large conformational change that stabilizes its NTE. Mycobacterial HflX also acts as an anti-association factor by binding to predissociated 50S subunits. Our structures show that a mycobacteria-specific insertion in HflX reaches far into the peptidyl transferase center (PTC), such that it would overlap with the ribosome-bound macrolide antibiotics. However, in the presence of antibiotics, this insertion retracts, adjusts around, and interacts with the antibiotic molecules. These results suggest that mycobacterial HflX is agnostic to antibiotic presence in the PTC. It mediates antibiotic resistance by splitting antibiotic-stalled 70S ribosomes and inactivating the resulting 50S subunits. | ||||||||||||
履歴 |
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構造の表示
添付画像 |
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ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | ![]() | 229.8 MB | ![]() | |
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ヘッダ (付随情報) | ![]() ![]() | 54.9 KB 54.9 KB | 表示 表示 | ![]() |
FSC (解像度算出) | ![]() | 13.9 KB | 表示 | ![]() |
画像 | ![]() | 73 KB | ||
Filedesc metadata | ![]() | 12.2 KB | ||
その他 | ![]() ![]() | 226.7 MB 226.7 MB | ||
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | ![]() 8vkwMC ![]() 8vioC ![]() 8vk0C ![]() 8vk7C ![]() 8vkiC ![]() 8vpkC ![]() 8vr4C ![]() 8vr8C ![]() 8vrlC M: このマップから作成された原子モデル C: 同じ文献を引用 ( |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性 ![]() |
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リンク
EMDBのページ | ![]() ![]() |
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「今月の分子」の関連する項目 |
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マップ
ファイル | ![]() | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | Structure of Mycobacterium smegmatis 50S ribosomal subunit bound to delNTE-HflX | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 0.846 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-ハーフマップ: Structure of Mycobacterium smegmatis 50S ribosomal subunit bound...
ファイル | emd_43333_half_map_1.map | ||||||||||||
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注釈 | Structure of Mycobacterium smegmatis 50S ribosomal subunit bound to delNTE-HflX half map A | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: Structure of Mycobacterium smegmatis 50S ribosomal subunit bound...
ファイル | emd_43333_half_map_2.map | ||||||||||||
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注釈 | Structure of Mycobacterium smegmatis 50S ribosomal subunit bound to delNTE-HflX half map B | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
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試料の構成要素
+全体 : Mycobacterium smegmatis 50S ribosome bound to delNTE-HflX-GMPPCP ...
+超分子 #1: Mycobacterium smegmatis 50S ribosome bound to delNTE-HflX-GMPPCP ...
+分子 #1: 50S ribosomal protein L30
+分子 #2: 50S Ribosomal Protein L37
+分子 #3: GTPase HflX
+分子 #6: 50S ribosomal protein L2
+分子 #7: 50S ribosomal protein L3
+分子 #8: 50S Ribosomal Protein L4
+分子 #9: 50S Ribosomal Protein L5
+分子 #10: 50S ribosomal protein L6
+分子 #11: 50S ribosomal protein L9
+分子 #12: 50S ribosomal protein L11
+分子 #13: 50S Ribosomal Protein L13
+分子 #14: 50S ribosomal protein L14
+分子 #15: 50S ribosomal protein L15
+分子 #16: Large ribosomal subunit protein uL16
+分子 #17: 50S ribosomal protein L17
+分子 #18: 50S Ribosomal Protein L18
+分子 #19: 50S ribosomal protein L19
+分子 #20: 50S Ribosomal Protein L20
+分子 #21: 50S Ribosomal Protein L21
+分子 #22: 50S Ribosomal Protein L22
+分子 #23: 50S Ribosomal Protein L23
+分子 #24: 50S ribosomal protein L24
+分子 #25: 50S ribosomal protein L25
+分子 #26: 50S ribosomal protein L27
+分子 #27: 50S Ribosomal Protein L28
+分子 #28: 50S ribosomal protein L29
+分子 #29: 50S ribosomal protein L32
+分子 #30: 50S Ribosomal Protein L33
+分子 #31: 50S ribosomal protein L34
+分子 #32: 50S ribosomal protein L35
+分子 #33: 50S ribosomal protein L36
+分子 #34: 50S Ribosomal Protein L31
+分子 #4: 23S ribosomal RNA
+分子 #5: 5S ribosomal RNA
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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![]() | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
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試料調製
緩衝液 | pH: 7.5 構成要素:
詳細: 20 mM HEPES-K at pH 7.5, 30 mM ammonium chloride, 10 mM magnesium chloride, and 5 mM beta-mercaptoethanol | |||||||||||||||
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グリッド | モデル: Quantifoil R1.2/1.3 / 材質: COPPER / メッシュ: 300 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: HOLEY / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 前処理 - 時間: 30 sec. / 前処理 - 雰囲気: AIR | |||||||||||||||
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 277.15 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV |
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電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 検出モード: COUNTING / デジタル化 - 画像ごとのフレーム数: 1-28 / 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 8700 / 平均電子線量: 60.64 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: ![]() |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 0.001 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 2.5 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 0.8 µm / 倍率(公称値): 81000 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER |
実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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画像解析
-原子モデル構築 1
初期モデル |
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精密化 | 空間: REAL / プロトコル: FLEXIBLE FIT / 温度因子: 67.4 当てはまり具合の基準: Cross-correlation coefficient | ||||||
得られたモデル | ![]() PDB-8vkw: |