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- EMDB-42732: Constituent EM map: Focused refinement NTD+SPRY+Calstabin-2 of th... -

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基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-42732
タイトルConstituent EM map: Focused refinement NTD+SPRY+Calstabin-2 of the Structure of PKA phosphorylated human RyR2-R420W in the primed state in the presence of calcium
マップデータConstituent EM map: Focused refinement NTD SPRY Calstabin-2 of the Structure of PKA phosphorylated human RyR2-R420W in the primed state in the presence of calcium
試料
  • 複合体: Complex of RyR2-R420W and Calstabin-2
    • 複合体: Ryanodine Receptor 2
    • 複合体: Peptidyl- cis-trans isomerase FKBP1B
キーワードcalcium channel / MEMBRANE PROTEIN
生物種Homo sapiens (ヒト)
手法単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.15 Å
データ登録者Miotto MC / Marks AR
資金援助 米国, 1件
OrganizationGrant number国
National Institutes of Health/National Heart, Lung, and Blood Institute (NIH/NHLBI)R01HL145473 米国
引用ジャーナル: Nat Commun / 年: 2024
タイトル: Structural basis for ryanodine receptor type 2 leak in heart failure and arrhythmogenic disorders.
著者: Marco C Miotto / Steven Reiken / Anetta Wronska / Qi Yuan / Haikel Dridi / Yang Liu / Gunnar Weninger / Carl Tchagou / Andrew R Marks /
要旨: Heart failure, the leading cause of mortality and morbidity in the developed world, is characterized by cardiac ryanodine receptor 2 channels that are hyperphosphorylated, oxidized, and depleted of ...Heart failure, the leading cause of mortality and morbidity in the developed world, is characterized by cardiac ryanodine receptor 2 channels that are hyperphosphorylated, oxidized, and depleted of the stabilizing subunit calstabin-2. This results in a diastolic sarcoplasmic reticulum Ca leak that impairs cardiac contractility and triggers arrhythmias. Genetic mutations in ryanodine receptor 2 can also cause Ca leak, leading to arrhythmias and sudden cardiac death. Here, we solved the cryogenic electron microscopy structures of ryanodine receptor 2 variants linked either to heart failure or inherited sudden cardiac death. All are in the primed state, part way between closed and open. Binding of Rycal drugs to ryanodine receptor 2 channels reverts the primed state back towards the closed state, decreasing Ca leak, improving cardiac function, and preventing arrhythmias. We propose a structural-physiological mechanism whereby the ryanodine receptor 2 channel primed state underlies the arrhythmias in heart failure and arrhythmogenic disorders.
履歴
登録2023年11月9日-
ヘッダ(付随情報) 公開2023年11月22日-
マップ公開2023年11月22日-
更新2024年9月25日-
現状2024年9月25日処理サイト: RCSB / 状態: 公開

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構造の表示

添付画像

emd_42732.png

ダウンロードとリンク

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マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_42732.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 512 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
注釈Constituent EM map: Focused refinement NTD SPRY Calstabin-2 of the Structure of PKA phosphorylated human RyR2-R420W in the primed state in the presence of calcium
投影像・断面図

画像のコントロール

大きさ
明度
コントラスト
その他
軸Z (Sec.)Y (Row.)X (Col.)
1.88 Å/pix.
x 128 pix.
= 240.64 Å		1.88 Å/pix.
x 128 pix.
= 240.64 Å		1.88 Å/pix.
x 128 pix.
= 240.64 Å

表面

投影像

断面 (1/3)

断面 (1/2)

断面 (2/3)

画像は Spider により作成

ボクセルのサイズ
XYZ
EMDB情報0.830.830.83
CCP4マップ ヘッダ情報1.881.881.88
密度

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)
表面レベル登録者による: 0.16
最小 - 最大-0.2569485 - 0.6233242
平均 (標準偏差)0.0013079828 (±0.017415341)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderXYZ
Origin000
サイズ512512512
Spacing512512512
セルA=B=C: 424.96 Å
α=β=γ: 90.0 °

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添付データ

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ハーフマップ: #1

ファイルemd_42732_half_map_1.map
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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試料の構成要素

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全体 : Complex of RyR2-R420W and Calstabin-2

全体名称: Complex of RyR2-R420W and Calstabin-2
要素
  • 複合体: Complex of RyR2-R420W and Calstabin-2
    • 複合体: Ryanodine Receptor 2
    • 複合体: Peptidyl- cis-trans isomerase FKBP1B

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超分子 #1: Complex of RyR2-R420W and Calstabin-2

超分子名称: Complex of RyR2-R420W and Calstabin-2 / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: #1-#2

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超分子 #2: Ryanodine Receptor 2

超分子名称: Ryanodine Receptor 2 / タイプ: complex / ID: 2 / 親要素: 1 / 含まれる分子: #1
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト)

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超分子 #3: Peptidyl- cis-trans isomerase FKBP1B

超分子名称: Peptidyl- cis-trans isomerase FKBP1B / タイプ: complex / ID: 3 / 親要素: 1 / 含まれる分子: #2
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト)

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実験情報

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構造解析

手法クライオ電子顕微鏡法
解析単粒子再構成法
試料の集合状態particle

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試料調製

濃度2.5 mg/mL
緩衝液pH: 7.4
構成要素:
濃度式名称
230.0 mMNaClsodium chloride
10.0 mMHEPESHEPES
0.4 %CHAPSCHAPS
1.0 mMEGTAEGTA
0.5 mMTCEPtris(2-carboxyethyl)phosphine
0.001 %DOPCDOPC
10.0 mMATPATP
1.7 mMCaCl2calcium chloride
凍結凍結剤: ETHANE

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電子顕微鏡法

顕微鏡FEI TITAN KRIOS
温度最低: 80.0 K / 最高: 100.0 K
特殊光学系エネルギーフィルター - 名称: GIF Bioquantum / エネルギーフィルター - スリット幅: 20 eV
撮影フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 BIOQUANTUM (6k x 4k)
デジタル化 - サイズ - 横: 5760 pixel / デジタル化 - サイズ - 縦: 4092 pixel / 平均電子線量: 58.0 e/Å2
電子線加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN
電子光学系C2レンズ絞り径: 100.0 µm / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス（公称値）: 1.2 µm / 最小 デフォーカス（公称値）: 0.5 µm
試料ステージ試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER
ホルダー冷却材: NITROGEN
実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company

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画像解析

初期モデルモデルのタイプ: INSILICO MODEL / In silico モデル: CryoSPARC ab initio
最終 再構成解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 3.15 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: cryoSPARC / 使用した粒子像数: 223544
初期 角度割当タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD / ソフトウェア - 名称: cryoSPARC
最終 角度割当タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD

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原子モデル構築 1

初期モデルPDB ID:

7ua5


Chain - Source name: PDB / Chain - Initial model type: experimental model

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
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関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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