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基本情報
| 登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-4255 | |||||||||
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| タイトル | human Bact spliceosome core structure | |||||||||
マップデータ | ||||||||||
試料 |
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キーワード | spliceosome / human / HELA / BACT / dynamics / SPLICING | |||||||||
| 機能・相同性 | 機能・相同性情報RES complex / negative regulation of chemokine-mediated signaling pathway / snoRNA splicing / U11/U12 snRNP / regulation of retinoic acid receptor signaling pathway / post-mRNA release spliceosomal complex / regulation of vitamin D receptor signaling pathway / B-WICH complex / nuclear retinoic acid receptor binding / embryonic brain development ...RES complex / negative regulation of chemokine-mediated signaling pathway / snoRNA splicing / U11/U12 snRNP / regulation of retinoic acid receptor signaling pathway / post-mRNA release spliceosomal complex / regulation of vitamin D receptor signaling pathway / B-WICH complex / nuclear retinoic acid receptor binding / embryonic brain development / U12-type spliceosomal complex / mRNA 3'-end processing / C2H2 zinc finger domain binding / U2-type catalytic step 1 spliceosome / RNA splicing, via transesterification reactions / pre-mRNA binding / positive regulation of mRNA splicing, via spliceosome / regulation of mRNA splicing, via spliceosome / blastocyst formation / splicing factor binding / host-mediated activation of viral transcription / U2-type precatalytic spliceosome / mRNA cis splicing, via spliceosome / positive regulation of vitamin D receptor signaling pathway / U2-type prespliceosome assembly / U2-type spliceosomal complex / nuclear vitamin D receptor binding / Notch binding / Transport of Mature mRNA derived from an Intron-Containing Transcript / U2-type catalytic step 2 spliceosome / Regulation of gene expression in late stage (branching morphogenesis) pancreatic bud precursor cells / RUNX3 regulates NOTCH signaling / NOTCH4 Intracellular Domain Regulates Transcription / U2 snRNP / RNA Polymerase II Transcription Termination / SAGA complex / positive regulation of neurogenesis / RHOBTB1 GTPase cycle / NOTCH3 Intracellular Domain Regulates Transcription / U2-type prespliceosome / positive regulation of transcription by RNA polymerase III / protein peptidyl-prolyl isomerization / K63-linked polyubiquitin modification-dependent protein binding / nuclear androgen receptor binding / WD40-repeat domain binding / precatalytic spliceosome / Notch-HLH transcription pathway / Formation of paraxial mesoderm / SMAD binding / positive regulation of transforming growth factor beta receptor signaling pathway / regulation of RNA splicing / spliceosomal complex assembly / mRNA Splicing - Minor Pathway / mRNA 3'-splice site recognition / positive regulation of transcription by RNA polymerase I / spliceosomal tri-snRNP complex assembly / Prp19 complex / U5 snRNA binding / U5 snRNP / intrinsic apoptotic signaling pathway in response to DNA damage by p53 class mediator / U2 snRNA binding / positive regulation of G1/S transition of mitotic cell cycle / U6 snRNA binding / protein localization to nucleus / pre-mRNA intronic binding / RHOBTB2 GTPase cycle / U1 snRNA binding / Cajal body / regulation of DNA repair / retinoic acid receptor signaling pathway / U4/U6 x U5 tri-snRNP complex / cellular response to retinoic acid / catalytic step 2 spliceosome / mRNA Splicing - Major Pathway / RNA splicing / DNA damage checkpoint signaling / positive regulation of RNA splicing / positive regulation of protein export from nucleus / nuclear receptor binding / RNA polymerase II transcription regulatory region sequence-specific DNA binding / response to cocaine / stem cell differentiation / peptidylprolyl isomerase / spliceosomal complex / peptidyl-prolyl cis-trans isomerase activity / Downregulation of SMAD2/3:SMAD4 transcriptional activity / positive regulation of neuron projection development / mRNA splicing, via spliceosome / negative regulation of protein catabolic process / RING-type E3 ubiquitin transferase / B-WICH complex positively regulates rRNA expression / positive regulation of protein import into nucleus / NOTCH1 Intracellular Domain Regulates Transcription / Pre-NOTCH Transcription and Translation / cellular response to xenobiotic stimulus / Constitutive Signaling by NOTCH1 PEST Domain Mutants / Constitutive Signaling by NOTCH1 HD+PEST Domain Mutants / nuclear matrix / fibrillar center / mRNA processing 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
| 生物種 | Homo sapiens (ヒト) | |||||||||
| 手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.4 Å | |||||||||
データ登録者 | Haselbach D / Komarov I / Agafonov D / Hartmuth K / Graf B / Kastner B | |||||||||
引用 | ジャーナル: Cell / 年: 2018タイトル: Structure and Conformational Dynamics of the Human Spliceosomal B Complex. 著者: David Haselbach / Ilya Komarov / Dmitry E Agafonov / Klaus Hartmuth / Benjamin Graf / Olexandr Dybkov / Henning Urlaub / Berthold Kastner / Reinhard Lührmann / Holger Stark / ![]() 要旨: The spliceosome is a highly dynamic macromolecular complex that precisely excises introns from pre-mRNA. Here we report the cryo-EM 3D structure of the human B spliceosome at 3.4 Å resolution. In ...The spliceosome is a highly dynamic macromolecular complex that precisely excises introns from pre-mRNA. Here we report the cryo-EM 3D structure of the human B spliceosome at 3.4 Å resolution. In the B state, the spliceosome is activated but not catalytically primed, so that it is functionally blocked prior to the first catalytic step of splicing. The spliceosomal core is similar to the yeast B spliceosome; important differences include the presence of the RNA helicase aquarius and peptidyl prolyl isomerases. To examine the overall dynamic behavior of the purified spliceosome, we developed a principal component analysis-based approach. Calculating the energy landscape revealed eight major conformational states, which we refined to higher resolution. Conformational differences of the highly flexible structural components between these eight states reveal how spliceosomal components contribute to the assembly of the spliceosome, allowing it to generate a dynamic interaction network required for its subsequent catalytic activation. | |||||||||
| 履歴 |
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構造の表示
| ムービー |
ムービービューア |
|---|---|
| 構造ビューア | EMマップ: SurfView Molmil Jmol/JSmol |
| 添付画像 |
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ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
| マップデータ | emd_4255.map.gz | 25.1 MB | EMDBマップデータ形式 | |
|---|---|---|---|---|
| ヘッダ (付随情報) | emd-4255-v30.xml emd-4255.xml | 65 KB 65 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
| 画像 | emd_4255.png | 53.1 KB | ||
| Filedesc metadata | emd-4255.cif.gz | 19.7 KB | ||
| アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-4255 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-4255 | HTTPS FTP |
-検証レポート
| 文書・要旨 | emd_4255_validation.pdf.gz | 391.8 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
|---|---|---|---|---|
| 文書・詳細版 | emd_4255_full_validation.pdf.gz | 391.3 KB | 表示 | |
| XML形式データ | emd_4255_validation.xml.gz | 7.4 KB | 表示 | |
| CIF形式データ | emd_4255_validation.cif.gz | 8.6 KB | 表示 | |
| アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-4255 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-4255 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
| 関連構造データ | ![]() 6ff4MC ![]() 4233C ![]() 4234C ![]() 4235C ![]() 4236C ![]() 4237C ![]() 4238C ![]() 4239C ![]() 4240C ![]() 4247C ![]() 4248C ![]() 4249C ![]() 4250C ![]() 4251C ![]() 4252C ![]() 4253C ![]() 4254C ![]() 6ff7C C: 同じ文献を引用 ( M: このマップから作成された原子モデル |
|---|---|
| 類似構造データ |
-
リンク
| EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
|---|---|
| 「今月の分子」の関連する項目 |
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マップ
| ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_4255.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 282.6 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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| 投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.16 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 密度 |
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| 対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
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試料の構成要素
+全体 : human Bact spliceosome state 1 unmasked
+超分子 #1: human Bact spliceosome state 1 unmasked
+分子 #1: RNA-binding motif protein, X-linked 2
+分子 #3: BUD13 homolog
+分子 #6: Splicing factor 3A subunit 2
+分子 #7: Splicing factor 3B subunit 2
+分子 #8: Pre-mRNA-processing-splicing factor 8
+分子 #9: 116 kDa U5 small nuclear ribonucleoprotein component
+分子 #10: SNW domain-containing protein 1
+分子 #11: Pleiotropic regulator 1
+分子 #12: Pre-mRNA-processing factor 17
+分子 #13: Cell division cycle 5-like protein
+分子 #14: Crooked neck-like protein 1
+分子 #15: Pre-mRNA-splicing factor RBM22
+分子 #16: Protein BUD31 homolog
+分子 #17: Spliceosome-associated protein CWC15 homolog
+分子 #18: Serine/arginine repetitive matrix protein 2
+分子 #19: Peptidyl-prolyl cis-trans isomerase-like 1
+分子 #20: Serine/arginine repetitive matrix protein 1
+分子 #22: Peptidyl-prolyl cis-trans isomerase CWC27 homolog
+分子 #23: RING finger protein 113A
+分子 #24: Splicing factor 3B subunit 1
+分子 #25: Splicing factor 3B subunit 3
+分子 #26: Splicing factor 3B subunit 5
+分子 #27: PHD finger-like domain-containing protein 5A
+分子 #28: Splicing factor 3B subunit 6
+分子 #2: U2 snRNA
+分子 #4: U5 snRNA
+分子 #5: U6 snRNA
+分子 #21: pre mRNA
+分子 #29: MAGNESIUM ION
+分子 #30: INOSITOL HEXAKISPHOSPHATE
+分子 #31: GUANOSINE-5'-TRIPHOSPHATE
+分子 #32: ZINC ION
-実験情報
-構造解析
| 手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
|---|---|
解析 | 単粒子再構成法 |
| 試料の集合状態 | particle |
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試料調製
| 濃度 | 0.05 mg/mL | ||||||||||||
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| 緩衝液 | pH: 7.9 構成要素:
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| グリッド | モデル: Quantifoil R3.5/1 / 材質: COPPER / メッシュ: 400 / 支持フィルム - #0 - Film type ID: 1 / 支持フィルム - #0 - 材質: CARBON / 支持フィルム - #0 - トポロジー: HOLEY / 支持フィルム - #1 - Film type ID: 2 / 支持フィルム - #1 - 材質: CARBON / 支持フィルム - #1 - トポロジー: CONTINUOUS | ||||||||||||
| 凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 75 % / チャンバー内温度: 277 K / 装置: LEICA EM GP / 詳細: blot with blotting sensor. |
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電子顕微鏡法
| 顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
|---|---|
| アライメント法 | Coma free - Residual tilt: 14.0 mrad |
| 特殊光学系 | 球面収差補正装置: Microscope was modified with a Cs corrector with two hexapoles elements |
| 撮影 | フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON III (4k x 4k) 検出モード: INTEGRATING / デジタル化 - サイズ - 横: 4096 pixel / デジタル化 - サイズ - 縦: 4096 pixel / 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 32000 / 平均露光時間: 1.0 sec. / 平均電子線量: 40.0 e/Å2 |
| 電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
| 電子光学系 | C2レンズ絞り径: 70.0 µm / 照射モード: SPOT SCAN / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 0.001 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 4.5 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 0.8 µm / 倍率(公称値): 59000 |
| 試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER ホルダー冷却材: NITROGEN |
| 実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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画像解析
-原子モデル構築 1
| 精密化 | プロトコル: RIGID BODY FIT |
|---|---|
| 得られたモデル | ![]() PDB-6ff4: |
ムービー
コントローラー
万見について



キーワード
Homo sapiens (ヒト)
データ登録者
引用
UCSF Chimera












































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