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基本情報
登録情報 | ![]() | |||||||||
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タイトル | Structure of Tomato spotted wilt virus L protein contained endoH domain binding to 3'5'vRNA | |||||||||
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![]() | Tomato spotted wilt virus / L protein / VIRAL PROTEIN / VIRAL PROTEIN-RNA complex | |||||||||
機能・相同性 | ![]() RNA-directed RNA polymerase / viral RNA genome replication / RNA-directed RNA polymerase activity / DNA-templated transcription 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | ![]() | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.7 Å | |||||||||
![]() | Cao L / Wang X | |||||||||
資金援助 | 1件
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![]() | ![]() タイトル: Structural basis for the activation of plant bunyavirus replication machinery and its dual-targeted inhibition by ribavirin. 著者: Jia Li / Lei Cao / Yaqian Zhao / Jinghan Shen / Lei Wang / Mingfeng Feng / Min Zhu / Yonghao Ye / Richard Kormelink / Xiaorong Tao / Xiangxi Wang / ![]() ![]() 要旨: Despite the discovery of plant viruses as a new class of pathogens over a century ago, the structure of plant virus replication machinery and antiviral pesticide remains lacking. Here we report five ...Despite the discovery of plant viruses as a new class of pathogens over a century ago, the structure of plant virus replication machinery and antiviral pesticide remains lacking. Here we report five cryogenic electron microscopy structures of a ~330-kDa RNA-dependent RNA polymerase (RdRp) from a devastating plant bunyavirus, tomato spotted wilt orthotospovirus (TSWV), including the apo, viral-RNA-bound, base analogue ribavirin-bound and ribavirin-triphosphate-bound states. They reveal that a flexible loop of RdRp's motif F functions as 'sensor' to perceive viral RNA and further acts as an 'adaptor' to promote the formation of a complete catalytic centre. A ten-base RNA 'hook' structure is sufficient to trigger major conformational changes and activate RdRp. Chemical screening showed that ribavirin is effective against TSWV, and structural data revealed that ribavirin disrupts both hook-binding and catalytic core formation, locking polymerase in its inactive state. This work provides structural insights into the mechanisms of plant bunyavirus RdRp activation and its dual-targeted site inhibition, facilitating the development of pesticides against plant viruses. | |||||||||
履歴 |
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構造の表示
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ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | ![]() | 38.3 MB | ![]() | |
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ヘッダ (付随情報) | ![]() ![]() | 19.2 KB 19.2 KB | 表示 表示 | ![]() |
画像 | ![]() | 105.5 KB | ||
Filedesc metadata | ![]() | 7.3 KB | ||
その他 | ![]() ![]() | 37.8 MB 37.8 MB | ||
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-関連構造データ
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リンク
EMDBのページ | ![]() ![]() |
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マップ
ファイル | ![]() | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.04 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
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試料の構成要素
-全体 : Structure of Tomato spotted wilt virus L protein contained endoH ...
全体 | 名称: Structure of Tomato spotted wilt virus L protein contained endoH domain binding to 3'5'vRNA |
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要素 |
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-超分子 #1: Structure of Tomato spotted wilt virus L protein contained endoH ...
超分子 | 名称: Structure of Tomato spotted wilt virus L protein contained endoH domain binding to 3'5'vRNA タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: all |
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由来(天然) | 生物種: ![]() |
-分子 #1: RNA-directed RNA polymerase L
分子 | 名称: RNA-directed RNA polymerase L / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO / EC番号: RNA-directed RNA polymerase |
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由来(天然) | 生物種: ![]() 株: Bulgarian L3 |
分子量 | 理論値: 240.378375 KDa |
組換発現 | 生物種: ![]() ![]() |
配列 | 文字列: MNIQKIQKLI ENGTTLLLSI EDCVGSNYDL ALDLHKRNSD EIPEDVIINN NAKNYETMRE LIVKITADGE GLNKGMATVD VKKLSEMVS LFEQKYLETE LARHDIFGEL ISRHLRIKPK QRSEVEIEHA LREYLDELNK KSCINKLSDD EFERINKEYV A TNATPDNY ...文字列: MNIQKIQKLI ENGTTLLLSI EDCVGSNYDL ALDLHKRNSD EIPEDVIINN NAKNYETMRE LIVKITADGE GLNKGMATVD VKKLSEMVS LFEQKYLETE LARHDIFGEL ISRHLRIKPK QRSEVEIEHA LREYLDELNK KSCINKLSDD EFERINKEYV A TNATPDNY VIYKESKNSE LCLIIYDWKI SVDARTETKT MEKYYKNIWK SFKDIKVNGK PFLEDHPVFV SIVILKPIAG MP ITVTSSR VLEKFEDSPS ALHGERIKHA RNAKLLNISH VGQIVGTTPT VVRNYYANTQ KIKSEVRGIL GDDFGSKDVF FSH WTSKYK ERNPTEIAYS EDIERIIDSL VTDEITKEEI IHFLFGNFCF HIETMNDQHI ADKFKGYQSS CINLKIEPKV DLAD LKDHL IQKQQIWESL YGKHLEKIML RIREKKKKEK EIPDITTAFN QNAAEYEEKY PNCFTNDLSE TKTNFSMTWS PSFEK IELS SEVDYNNAII NKFRESFKSS SRVIYNSPYS SINNQTNKAR DITNLVRLCL TELSCDTTKM EKQELEDEID INTGSI KVE RTKKSKEWNK QGSCLTRNKN EFCMKETGRE NKTIYFKGLA VMNIGMSSKK RILKKEEIKE RISKGLEYDT SERQADP ND DYSSIDMSSL THMKKLIRHD NEDSLSWCER IKDSLFVLHN GDIREEGKIT SVYNNYAKNP ECLYIQDSVL KTELETCK K INKLCNDLAI YHYSEDMMQF SKGLMVADRY MTKESFKILT TANTSMMLLA FKGDGMNTGG SGVPYIALHI VDEDMSDQF NICYTKEIYS YFRNGSNYIY IMRPQRLNQV RLLSLFKTPS KVPVCFAQFS KKANEMEKWL KNKDIEKVNV FSMTMTVKQI LINIVFSSV MIGTVTKLSR MGIFDFMRYA GFLPLSDYSN IKEYIRDKFD PDITNVADIY FVNGIKKLLF RMEDLNLSTN A KPVVVDHE NDIIGGITDL NIKCPITGST LLTLEDLYNN VYLAIYMMPK SLHNHVHNLT SLLNVPAEWE LKFRKELGFN IF EDIYPKK AMFDDKDLFS INGALNVKAL SDYYLGNIEN VGLMRSEIEN KEDFLSPCYK ISTLKSSKKC SQSNIISTDE IIE CLQNAK IQDIENWKGN NLAIIKGLIR TYNEEKNRLV EFFEDNCVNS LYLVEKLKEI INSGSITVGK SVTSKFIRNN HPLT VETYL KTKLYYRNNV TVLKSKKVSE ELYDLVKQFH NMMEIDLDSV MNLGKGTEGK KHTFLQMLEF VMSKAKNVTG SVDFL VSVF EKMQRTKTDR EIYLMSMKVK MMLYFIEHTF KHVAQSDPSE AISISGDNKI RALSTLSLDT ITSYNDILNK NSKKSR LAF LSADQSKWSA SDLTYKYVLA IILNPILTTG EASLMIECIL MYVKLKKVCI PTDIFLNLRK AQGTFGQNET AIGLLTK GL TTNTYPVSMN WLQGNLNYLS SVYHSCAMKA YHKTLECYKD CDFQTRWIVH SDDNATSLIA SGEVDKMLTD FSSSSLPE M LFRSIEAHFK SFCITLNPKK SYASSSEVEF ISERIVNGAI IPLYCRHLAN CCTESSHISY FDDLMSLSIH VTMLLRKGC PNEVIPFAYG AVQVQALSIY SMLPGEVNDS IRIFKKLGVS LKSNEIPTNM GGWLTSPIEP LSILGPSSND QIIYYNVIRD FLNKKSLEE VKDSVSSSSY LQMRFRELKG KYEKGTLEEK DKKMIFLINL FEKASVSEDS DVLTIGMKFQ TMLTQIIKLP N FINENALN KMSSYKDFSK LYPNLKKNED LYKSTKNLKI DEDAILEEDE LYEKIASSLE MESVHDIMIK NPETILIAPL ND RDFLLSQ LFMYTSPSKR NQLSNQSTEK LALDRVLRSK ARTFVDISST VKMTYEENME KKILEMLKFD LDSYCSFKTC VNL VIKDVN FSMLIPILDS AYPCESRKRD NYNFRWFQTE KWIPVVEGSP GLVVMHAVYG SNYIENLGLK NIPLTDDSIN VLTS TFGTG LIMEDVKSLV KGKDSFETEA FSNSNECQRL VKACNYMIAA QNRLLAINTC FTRKSFPFYS KFNLGRGFIS NTLAL LSTI YSKEES UniProtKB: RNA-directed RNA polymerase L |
-分子 #2: RNA (5'-R(P*AP*GP*AP*GP*CP*AP*AP*UP*CP*A)-3')
分子 | 名称: RNA (5'-R(P*AP*GP*AP*GP*CP*AP*AP*UP*CP*A)-3') / タイプ: rna / ID: 2 / コピー数: 1 |
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由来(天然) | 生物種: synthetic construct (人工物) |
分子量 | 理論値: 3.208012 KDa |
配列 | 文字列: AGAGCAAUCA |
-分子 #3: RNA (5'-R(P*GP*CP*AP*AP*UP*CP*AP*GP*G)-3')
分子 | 名称: RNA (5'-R(P*GP*CP*AP*AP*UP*CP*AP*GP*G)-3') / タイプ: rna / ID: 3 / コピー数: 1 |
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由来(天然) | 生物種: synthetic construct (人工物) |
分子量 | 理論値: 2.894807 KDa |
配列 | 文字列: GCAAUCAGG |
-分子 #4: RNA (5'-R(P*AP*CP*CP*UP*GP*AP*UP*UP*GP*CP*UP*CP*U)-3')
分子 | 名称: RNA (5'-R(P*AP*CP*CP*UP*GP*AP*UP*UP*GP*CP*UP*CP*U)-3') タイプ: rna / ID: 4 / コピー数: 1 |
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由来(天然) | 生物種: synthetic construct (人工物) |
分子量 | 理論値: 4.055421 KDa |
配列 | 文字列: ACCUGAUUGC UCU |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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![]() | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
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試料調製
緩衝液 | pH: 7.5 |
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凍結 | 凍結剤: ETHANE |
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電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 QUANTUM (4k x 4k) 平均電子線量: 60.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: ![]() |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 1.8 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 1.2 µm |
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画像解析
初期モデル | モデルのタイプ: NONE |
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最終 再構成 | 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 3.7 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 使用した粒子像数: 156980 |
初期 角度割当 | タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD |
最終 角度割当 | タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD |