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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-3224 | |||||||||
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タイトル | Mammalian 40S HCV-IRES complex | |||||||||
マップデータ | Reconstruction of ribosome complex | |||||||||
試料 |
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キーワード | ribosome / translation initiation / Hepatitis C Virus internal ribosome entry site | |||||||||
生物種 | Oryctolagus cuniculus (ウサギ) / Hepatitis C virus (ウイルス) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 6.7 Å | |||||||||
データ登録者 | Yamamoto H / Collier M / Loerke J / Ismer J / Schmidt A / Hilal T / Sprink T / Yamamoto K / Mielke T / Burger J ...Yamamoto H / Collier M / Loerke J / Ismer J / Schmidt A / Hilal T / Sprink T / Yamamoto K / Mielke T / Burger J / Shaikh TR / Dabrowski M / Hildebrand PW / Scheerer P / Spahn CMT | |||||||||
引用 | ジャーナル: EMBO J / 年: 2015 タイトル: Molecular architecture of the ribosome-bound Hepatitis C Virus internal ribosomal entry site RNA. 著者: Hiroshi Yamamoto / Marianne Collier / Justus Loerke / Jochen Ismer / Andrea Schmidt / Tarek Hilal / Thiemo Sprink / Kaori Yamamoto / Thorsten Mielke / Jörg Bürger / Tanvir R Shaikh / ...著者: Hiroshi Yamamoto / Marianne Collier / Justus Loerke / Jochen Ismer / Andrea Schmidt / Tarek Hilal / Thiemo Sprink / Kaori Yamamoto / Thorsten Mielke / Jörg Bürger / Tanvir R Shaikh / Marylena Dabrowski / Peter W Hildebrand / Patrick Scheerer / Christian M T Spahn / 要旨: Internal ribosomal entry sites (IRESs) are structured cis-acting RNAs that drive an alternative, cap-independent translation initiation pathway. They are used by many viruses to hijack the ...Internal ribosomal entry sites (IRESs) are structured cis-acting RNAs that drive an alternative, cap-independent translation initiation pathway. They are used by many viruses to hijack the translational machinery of the host cell. IRESs facilitate translation initiation by recruiting and actively manipulating the eukaryotic ribosome using only a subset of canonical initiation factor and IRES transacting factors. Here we present cryo-EM reconstructions of the ribosome 80S- and 40S-bound Hepatitis C Virus (HCV) IRES. The presence of four subpopulations for the 80S•HCV IRES complex reveals dynamic conformational modes of the complex. At a global resolution of 3.9 Å for the most stable complex, a derived atomic model reveals a complex fold of the IRES RNA and molecular details of its interaction with the ribosome. The comparison of obtained structures explains how a modular architecture facilitates mRNA loading and tRNA binding to the P-site. This information provides the structural foundation for understanding the mechanism of HCV IRES RNA-driven translation initiation. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_3224.map.gz | 7.4 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-3224-v30.xml emd-3224.xml | 10.7 KB 10.7 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | EMD-3224.png | 194.3 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-3224 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-3224 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_3224_validation.pdf.gz | 225.4 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_3224_full_validation.pdf.gz | 224.5 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_3224_validation.xml.gz | 7.3 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-3224 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-3224 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_3224.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 204.4 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | Reconstruction of ribosome complex | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.07 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-試料の構成要素
-全体 : Mammalian 40S-HCV-IRES complex
全体 | 名称: Mammalian 40S-HCV-IRES complex |
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要素 |
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-超分子 #1000: Mammalian 40S-HCV-IRES complex
超分子 | 名称: Mammalian 40S-HCV-IRES complex / タイプ: sample / ID: 1000 / Number unique components: 2 |
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分子量 | 理論値: 1.6 MDa |
-超分子 #1: 40S ribosome
超分子 | 名称: 40S ribosome / タイプ: complex / ID: 1 / 組換発現: No / Ribosome-details: ribosome-eukaryote: SSU 40S, SSU RNA 18S |
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由来(天然) | 生物種: Oryctolagus cuniculus (ウサギ) / 別称: rabbit / 組織: reticulocyte lysate |
分子量 | 理論値: 1.5 MDa |
-分子 #1: HCV-IRES
分子 | 名称: HCV-IRES / タイプ: rna / ID: 1 / 分類: OTHER / Structure: DOUBLE HELIX / Synthetic?: Yes |
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由来(天然) | 生物種: Hepatitis C virus (ウイルス) / 別称: HCV |
分子量 | 理論値: 162 KDa |
配列 | 文字列: GCCAGCCCCC UGAUGGGGGC GACACUCCAC CAUGAAUCAC UCCCCUGUGA GGAACUACUG UCUUCACGCA GAAAGCGUCU AGCCAUGGCG UUAGUAUGAG UGUCGUGCAG CCUCCAGGAC CCCCCCUCCC GGGAGAGCCA UAGUGGUCUG CGGAACCGGU GAGUACACCG ...文字列: GCCAGCCCCC UGAUGGGGGC GACACUCCAC CAUGAAUCAC UCCCCUGUGA GGAACUACUG UCUUCACGCA GAAAGCGUCU AGCCAUGGCG UUAGUAUGAG UGUCGUGCAG CCUCCAGGAC CCCCCCUCCC GGGAGAGCCA UAGUGGUCUG CGGAACCGGU GAGUACACCG GAAUUGCCAG GACGACCGGG UCCUUUCUUG GAUAAACCCG CUCAAUGCCU GGAGAUUUGG GCGUGCCCCC GCAAGACUGC UAGCCGAGUA GUGUUGGGUC GCGAAAGGCC UUGUGGUACU GCCUGAUAGG GUGCUUGCGA GUGCCCCGGG AGGUCUCGUA GACCGUGCAC CAUGAGCACG AAUCCUAAAC CUCAAAGAAA AACCAAACGU AACACCAACC GUCGCCCACA GGACGUCAAG UUCCCGGGUG GCGGUCUAGA CGCCGAGAUC AGAAAUCCCU CUCUCGGAUC GCAUUUGGAC UUCUGCCUUC GGGCACCACG GUCGGAUCCG AAUU |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
緩衝液 | pH: 7.6 詳細: 20mM Tris-HCl, 5.0mM MgCl2, 100mM KCl, 0.2mM spermidine, 2mM DTT |
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グリッド | 詳細: Quantifoil R3-3 Cu 300 mesh with 2 nm carbon support film |
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 93 K / 装置: FEI VITROBOT MARK I / 手法: blot for 2-4 seconds before plunging |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI POLARA 300 |
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アライメント法 | Legacy - 非点収差: Objective lens astigmatism was corrected at 115,000 times magnification |
詳細 | automated data collection using Leginon |
日付 | 2014年7月14日 |
撮影 | カテゴリ: CCD フィルム・検出器のモデル: TVIPS TEMCAM-F416 (4k x 4k) 実像数: 5692 / 平均電子線量: 20 e/Å2 / 詳細: Automated data collection on using Leginon / ビット/ピクセル: 16 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 倍率(補正後): 194805 / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.0 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 4.0 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 2.0 µm / 倍率(公称値): 115000 |
試料ステージ | 試料ホルダー: Cartridge system, LN2 cooled / 試料ホルダーモデル: GATAN HELIUM |
実験機器 | モデル: Tecnai Polara / 画像提供: FEI Company |
-画像解析
CTF補正 | 詳細: CTFFIND3 |
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最終 再構成 | 想定した対称性 - 点群: C1 (非対称) / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 6.7 Å / 解像度の算出法: OTHER / ソフトウェア - 名称: spider 詳細: To avoid overfitting, the data was refined in a resolution-limited scheme using SPIDER. 使用した粒子像数: 145286 |