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基本情報
| 登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-2944 | |||||||||
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| タイトル | Structural characterization of the Olfactomedin-1 disulfide-linked tetramer | |||||||||
マップデータ | Subtomogram of an Olfactomedin-1 tetramer | |||||||||
試料 |
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キーワード | Olfactomedin-1 (Olfm1) / neurobiology / tetramer / X-ray crystallography / small-angle X-ray scattering (SAXS) / electron tomography / analytical ultracentrifugation (AUC) / coiled coil / calcium / disulfide | |||||||||
| 生物種 | ![]() | |||||||||
| 手法 | 電子線トモグラフィー法 / ネガティブ染色法 | |||||||||
データ登録者 | Sharp TH / Pronker MF / Bos TG / Thies-Weesie DM / Janssen BJC | |||||||||
引用 | ジャーナル: J Biol Chem / 年: 2015タイトル: Olfactomedin-1 Has a V-shaped Disulfide-linked Tetrameric Structure. 著者: Matti F Pronker / Trusanne G A A Bos / Thomas H Sharp / Dominique M E Thies-Weesie / Bert J C Janssen / ![]() 要旨: Olfactomedin-1 (Olfm1; also known as noelin and pancortin) is a member of the olfactomedin domain-containing superfamily and a highly expressed neuronal glycoprotein important for nervous system ...Olfactomedin-1 (Olfm1; also known as noelin and pancortin) is a member of the olfactomedin domain-containing superfamily and a highly expressed neuronal glycoprotein important for nervous system development. It binds a number of secreted proteins and cell surface-bound receptors to induce cell signaling processes. Using a combined approach of x-ray crystallography, solution scattering, analytical ultracentrifugation, and electron microscopy we determined that full-length Olfm1 forms disulfide-linked tetramers with a distinctive V-shaped architecture. The base of the "V" is formed by two disulfide-linked dimeric N-terminal domains. Each of the two V legs consists of a parallel dimeric disulfide-linked coiled coil with a C-terminal β-propeller dimer at the tips. This agrees with our crystal structure of a C-terminal coiled-coil segment and β-propeller combination (Olfm1(coil-Olf)) that reveals a disulfide-linked dimeric arrangement with the β-propeller top faces in an outward exposed orientation. Similar to its family member myocilin, Olfm1 is stabilized by calcium. The dimer-of-dimers architecture suggests a role for Olfm1 in clustering receptors to regulate signaling and sheds light on the conformation of several other olfactomedin domain family members. | |||||||||
| 履歴 |
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構造の表示
| ムービー |
ムービービューア |
|---|---|
| 構造ビューア | EMマップ: SurfView Molmil Jmol/JSmol |
| 添付画像 |
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ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
| マップデータ | emd_2944.map.gz | 418.4 KB | EMDBマップデータ形式 | |
|---|---|---|---|---|
| ヘッダ (付随情報) | emd-2944-v30.xml emd-2944.xml | 11.7 KB 11.7 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
| 画像 | 2944.png | 73.5 KB | ||
| アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-2944 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-2944 | HTTPS FTP |
-検証レポート
| 文書・要旨 | emd_2944_validation.pdf.gz | 126 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
|---|---|---|---|---|
| 文書・詳細版 | emd_2944_full_validation.pdf.gz | 125.1 KB | 表示 | |
| XML形式データ | emd_2944_validation.xml.gz | 5.4 KB | 表示 | |
| アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-2944 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-2944 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
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リンク
| EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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マップ
| ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_2944.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 3.7 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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| 注釈 | Subtomogram of an Olfactomedin-1 tetramer | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 4.57 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 密度 |
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| 対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
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試料の構成要素
-全体 : Olfactomedin-1 disulfide-linked tetramer
| 全体 | 名称: Olfactomedin-1 disulfide-linked tetramer |
|---|---|
| 要素 |
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-超分子 #1000: Olfactomedin-1 disulfide-linked tetramer
| 超分子 | 名称: Olfactomedin-1 disulfide-linked tetramer / タイプ: sample / ID: 1000 / 集合状態: Tetramer / Number unique components: 1 |
|---|---|
| 分子量 | 実験値: 242 KDa / 理論値: 256 KDa / 手法: AUC |
-超分子 #1: Olfactomedin-1
| 超分子 | 名称: Olfactomedin-1 / タイプ: organelle_or_cellular_component / ID: 1 / Name.synonym: Olfm1, noelin, pancortin 詳細: Purified recombinant full-length glycoslated Olfactomedin-1 tetramers were negatively stained with uranyl formate. コピー数: 1 / 集合状態: Tetramer / 組換発現: Yes |
|---|---|
| Ref INTERPRO | 0: IPR022082 |
| Ref INTERPRO | 0: IPR003112 |
| 由来(天然) | 生物種: ![]() |
| 分子量 | 実験値: 242 KDa / 理論値: 256 KDa |
| 組換発現 | 生物種: Homo sapiens (ヒト) / 組換細胞: HEK293ES / 組換プラスミド: pUPE107.03 |
-実験情報
-構造解析
| 手法 | ネガティブ染色法 |
|---|---|
解析 | 電子線トモグラフィー法 |
| 試料の集合状態 | particle |
-
試料調製
| 濃度 | 0.065 mg/mL |
|---|---|
| 緩衝液 | pH: 7.5 / 詳細: 150 mM NaCl, 20 mM HEPES |
| 染色 | タイプ: NEGATIVE 詳細: Full-length Olfm1 was adsorbed to grids for 30 sec. Grids were briefly washed with water and then stained for 30 sec with a freshly prepared filtered 2% uranyl formate solution. |
| グリッド | 詳細: Carbon-coated mesh copper grids glow discharged for 15 sec |
| 凍結 | 凍結剤: NONE / 装置: OTHER |
-
電子顕微鏡法
| 顕微鏡 | FEI TECNAI F20 |
|---|---|
| アライメント法 | Legacy - 非点収差: Objective lens astigmatism was corrected at 30,000 times magnification |
| 詳細 | Weak beam illumination |
| 日付 | 2015年2月12日 |
| 撮影 | カテゴリ: CCD フィルム・検出器のモデル: GATAN ULTRASCAN 4000 (4k x 4k) 実像数: 58 / ビット/ピクセル: 32 |
| 電子線 | 加速電圧: 200 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
| 電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 2.0 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 2.0 µm / 倍率(公称値): 30000 |
| 試料ステージ | 試料ホルダーモデル: SIDE ENTRY, EUCENTRIC / Tilt series - Axis1 - Min angle: -58 ° / Tilt series - Axis1 - Max angle: 58 ° / Tilt series - Axis1 - Angle increment: 2 ° |
| 実験機器 | ![]() モデル: Tecnai F20 / 画像提供: FEI Company |
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画像解析
| 詳細 | Tilt series were collected from -58 to 58 degrees in 2 degree increments. The first and last image was discarded. CTF correction was performed on each projection |
|---|---|
| 最終 再構成 | アルゴリズム: OTHER / ソフトウェア - 名称: IMOD, EMAN2 詳細: Sub-tomogram particles were manually picked using e2spt_boxer.py from EMAN2. Each particle was normalized and masked with a sharp spherical mask to remove background density not associated ...詳細: Sub-tomogram particles were manually picked using e2spt_boxer.py from EMAN2. Each particle was normalized and masked with a sharp spherical mask to remove background density not associated with the protein. Particles were then filtered to 20 A with a low-pass Gaussian filter, before a tight mask was applied to the remaining density using e2proc3d.py from EMAN2. 使用した粒子像数: 57 |
| CTF補正 | 詳細: IMOD, each tilt image |
-原子モデル構築 1
| 初期モデル | PDB ID: Chain - #0 - Chain ID: A / Chain - #1 - Chain ID: B |
|---|---|
| ソフトウェア | 名称: Chimera |
| 詳細 | Each coiled-coil dimer of the tetramer was fitted as a rigid body. |
| 精密化 | 空間: REAL / プロトコル: RIGID BODY FIT |
ムービー
コントローラー
万見について



キーワード
データ登録者
引用
UCSF Chimera









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Homo sapiens (ヒト)
