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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-26745 | |||||||||
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タイトル | Plasmodium falciparum merozoite with two rhoptries and an associated apical vesicle | |||||||||
マップデータ | Plasmodium falciparum merozoite with two rhoptries associated with an apical vesicle | |||||||||
試料 |
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キーワード | Rhoptry / Parasite / CELL INVASION | |||||||||
生物種 | Plasmodium falciparum 3D7 (マラリア病原虫) | |||||||||
手法 | 電子線トモグラフィー法 / クライオ電子顕微鏡法 | |||||||||
データ登録者 | Martinez M / Chang Y-W | |||||||||
資金援助 | 米国, 1件
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引用 | ジャーナル: Nat Microbiol / 年: 2022 タイトル: Rhoptry secretion system structure and priming in Plasmodium falciparum revealed using in situ cryo-electron tomography. 著者: Matthew Martinez / William David Chen / Marta Mendonça Cova / Petra Molnár / Shrawan Kumar Mageswaran / Amandine Guérin / Audrey R Odom John / Maryse Lebrun / Yi-Wei Chang / 要旨: Apicomplexan parasites secrete contents of the rhoptries, club-shaped organelles in the apical region, into host cells to permit their invasion and establishment of infection. The rhoptry secretory ...Apicomplexan parasites secrete contents of the rhoptries, club-shaped organelles in the apical region, into host cells to permit their invasion and establishment of infection. The rhoptry secretory apparatus (RSA), which is critical for rhoptry secretion, was recently discovered in Toxoplasma and Cryptosporidium. It is unknown whether a similar molecular machinery exists in the malaria parasite Plasmodium. In this study, we use in situ cryo-electron tomography to investigate the rhoptry secretion system in P. falciparum merozoites. We identify the presence of an RSA at the cell apex and a morphologically distinct apical vesicle docking the tips of the two rhoptries to the RSA. We also discover two additional rhoptry organizations that lack the apical vesicle. Using subtomogram averaging, we reveal different conformations of the RSA structure corresponding to different rhoptry organizations. Our results highlight previously unknown steps in the process of rhoptry secretion and indicate a regulatory role for the conserved apical vesicle in host invasion by apicomplexan parasites. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
添付画像 |
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-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_26745.map.gz | 739 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-26745-v30.xml emd-26745.xml | 10.4 KB 10.4 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_26745.png | 250.7 KB | ||
Filedesc metadata | emd-26745.cif.gz | 4.2 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-26745 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-26745 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_26745_validation.pdf.gz | 569 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_26745_full_validation.pdf.gz | 568.5 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_26745_validation.xml.gz | 4.9 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_26745_validation.cif.gz | 5.9 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-26745 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-26745 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_26745.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 1.1 GB / タイプ: IMAGE STORED AS SIGNED BYTE | ||||||||||||||||||||
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注釈 | Plasmodium falciparum merozoite with two rhoptries associated with an apical vesicle | ||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 10.6 Å | ||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-試料の構成要素
-全体 : Plasmodium falciparum merozoite apical complex
全体 | 名称: Plasmodium falciparum merozoite apical complex |
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要素 |
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-超分子 #1: Plasmodium falciparum merozoite apical complex
超分子 | 名称: Plasmodium falciparum merozoite apical complex / タイプ: cell / ID: 1 / 親要素: 0 詳細: Two separate rhoptries with an associated apical vesicle |
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由来(天然) | 生物種: Plasmodium falciparum 3D7 (マラリア病原虫) |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 電子線トモグラフィー法 |
試料の集合状態 | cell |
-試料調製
緩衝液 | pH: 7.4 詳細: RPMI-1640 supplemented with 27 mM NaHCO3, 11 mM glucose, 5 mM HEPES, 0.01 mM thymidine, 1 mM sodium pyruvate, 0.37 mM hypoxanthine, 10 ug/mL gentamicin |
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グリッド | モデル: Quantifoil R2/2 / 材質: COPPER / メッシュ: 200 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: HOLEY / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE |
凍結 | 凍結剤: ETHANE-PROPANE / チャンバー内湿度: 95 % / チャンバー内温度: 297 K / 装置: LEICA EM GP / 詳細: Front blot for 4-6 seconds before plunging. |
詳細 | Mechanically isolated merozoites from synchronized schizonts |
切片作成 | その他: NO SECTIONING |
位置合わせマーカー | Manufacturer: Ted Pella, Inc / 直径: 10 nm |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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特殊光学系 | 位相板: VOLTA PHASE PLATE / エネルギーフィルター - 名称: GIF Bioquantum / エネルギーフィルター - スリット幅: 20 eV |
撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) / 平均露光時間: 0.5 sec. / 平均電子線量: 140.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | C2レンズ絞り径: 100.0 µm / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 5.0 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 1.5 µm / 倍率(公称値): 33000 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER ホルダー冷却材: NITROGEN |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
-画像解析
詳細 | Raw frames were gain normalized in serialEM and motion corrected using the alignframes command in IMOD |
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最終 再構成 | アルゴリズム: BACK PROJECTION / ソフトウェア - 名称: IMOD / 詳細: Reconstruction was performed in IMOD / 使用した粒子像数: 61 |