+データを開く
-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-23783 | |||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
タイトル | LolCDE nucleotide-free | |||||||||
マップデータ | Cryo-EM map of LolCDE in the nucleotide-free conformation | |||||||||
試料 |
| |||||||||
キーワード | ATP binding cassette transporter / ABC transporter / inner membrane / protein transport / MEMBRANE PROTEIN | |||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 lipoprotein releasing activity / protein localization to outer membrane / lipoprotein localization to outer membrane / plasma membrane protein complex / トランスロカーゼ; 他の化合物の輸送を触媒; ヌクレオシド三リン酸の加水分解に伴う / lipoprotein transport / transmembrane transporter activity / ATP-binding cassette (ABC) transporter complex / transmembrane transport / outer membrane-bounded periplasmic space ...lipoprotein releasing activity / protein localization to outer membrane / lipoprotein localization to outer membrane / plasma membrane protein complex / トランスロカーゼ; 他の化合物の輸送を触媒; ヌクレオシド三リン酸の加水分解に伴う / lipoprotein transport / transmembrane transporter activity / ATP-binding cassette (ABC) transporter complex / transmembrane transport / outer membrane-bounded periplasmic space / ATP hydrolysis activity / ATP binding / plasma membrane 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Escherichia coli (大腸菌) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.8 Å | |||||||||
データ登録者 | Sharma S / Liao M | |||||||||
資金援助 | 米国, 1件
| |||||||||
引用 | ジャーナル: Nat Commun / 年: 2021 タイトル: Mechanism of LolCDE as a molecular extruder of bacterial triacylated lipoproteins. 著者: Stuti Sharma / Ruoyu Zhou / Li Wan / Shan Feng / KangKang Song / Chen Xu / Yanyan Li / Maofu Liao / 要旨: Lipoproteins are important for bacterial growth and antibiotic resistance. These proteins use lipid acyl chains attached to the N-terminal cysteine residue to anchor on the outer surface of ...Lipoproteins are important for bacterial growth and antibiotic resistance. These proteins use lipid acyl chains attached to the N-terminal cysteine residue to anchor on the outer surface of cytoplasmic membrane. In Gram-negative bacteria, many lipoproteins are transported to the outer membrane (OM), a process dependent on the ATP-binding cassette (ABC) transporter LolCDE which extracts the OM-targeted lipoproteins from the cytoplasmic membrane. Lipid-anchored proteins pose a unique challenge for transport machinery as they have both hydrophobic lipid moieties and soluble protein component, and the underlying mechanism is poorly understood. Here we determined the cryo-EM structures of nanodisc-embedded LolCDE in the nucleotide-free and nucleotide-bound states at 3.8-Å and 3.5-Å resolution, respectively. The structural analyses, together with biochemical and mutagenesis studies, uncover how LolCDE recognizes its substrate by interacting with the lipid and N-terminal peptide moieties of the lipoprotein, and identify the amide-linked acyl chain as the key element for LolCDE interaction. Upon nucleotide binding, the transmembrane helices and the periplasmic domains of LolCDE undergo large-scale, asymmetric movements, resulting in extrusion of the captured lipoprotein. Comparison of LolCDE and MacB reveals the conserved mechanism of type VII ABC transporters and emphasizes the unique properties of LolCDE as a molecule extruder of triacylated lipoproteins. | |||||||||
履歴 |
|
-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
---|---|
構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_23783.map.gz | 14.2 MB | EMDBマップデータ形式 | |
---|---|---|---|---|
ヘッダ (付随情報) | emd-23783-v30.xml emd-23783.xml | 14.3 KB 14.3 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_23783.png | 52.6 KB | ||
Filedesc metadata | emd-23783.cif.gz | 6.1 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-23783 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-23783 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_23783_validation.pdf.gz | 418 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
---|---|---|---|---|
文書・詳細版 | emd_23783_full_validation.pdf.gz | 417.6 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_23783_validation.xml.gz | 5.8 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_23783_validation.cif.gz | 6.6 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-23783 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-23783 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
---|---|
「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_23783.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 27 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
注釈 | Cryo-EM map of LolCDE in the nucleotide-free conformation | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.06 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
| ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
|
-添付データ
-試料の構成要素
-全体 : Lipo-releasing system transmembrane protein lolC (E.C.3.6.3.-), L...
全体 | 名称: Lipo-releasing system transmembrane protein lolC (E.C.3.6.3.-), Lipoprotein-releasing system transmembrane protein (E.C.3.6.3.-), Lipoprotein-releasing system ATP-binding protein LolD (E.C.7. ...名称: Lipo-releasing system transmembrane protein lolC (E.C.3.6.3.-), Lipoprotein-releasing system transmembrane protein (E.C.3.6.3.-), Lipoprotein-releasing system ATP-binding protein LolD (E.C.7.6.2.-), Triacyl-lipoprotein |
---|---|
要素 |
|
-超分子 #1: Lipo-releasing system transmembrane protein lolC (E.C.3.6.3.-), L...
超分子 | 名称: Lipo-releasing system transmembrane protein lolC (E.C.3.6.3.-), Lipoprotein-releasing system transmembrane protein (E.C.3.6.3.-), Lipoprotein-releasing system ATP-binding protein LolD (E.C.7. ...名称: Lipo-releasing system transmembrane protein lolC (E.C.3.6.3.-), Lipoprotein-releasing system transmembrane protein (E.C.3.6.3.-), Lipoprotein-releasing system ATP-binding protein LolD (E.C.7.6.2.-), Triacyl-lipoprotein タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: #1-#3 |
---|---|
由来(天然) | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
分子量 | 理論値: 130 kDa/nm |
-分子 #1: Lipoprotein-releasing system transmembrane protein LolC
分子 | 名称: Lipoprotein-releasing system transmembrane protein LolC タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
---|---|
由来(天然) | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
分子量 | 理論値: 42.530609 KDa |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
配列 | 文字列: YQPVALFIGL RYMRGRAADR FGRFVSWLST IGITLGVMAL VTVLSVMNGF ERELQNNILG LMPQAILSSE HGSLNPQQLP ETAVKLDGV NRVAPITTGD VVLQSARSVA VGVMLGIDPA QKDPLTPYLV NVKQTDLEPG KYNVILGEQL ASQLGVNRGD Q IRVMVPSA ...文字列: YQPVALFIGL RYMRGRAADR FGRFVSWLST IGITLGVMAL VTVLSVMNGF ERELQNNILG LMPQAILSSE HGSLNPQQLP ETAVKLDGV NRVAPITTGD VVLQSARSVA VGVMLGIDPA QKDPLTPYLV NVKQTDLEPG KYNVILGEQL ASQLGVNRGD Q IRVMVPSA SQFTPMGRIP SQRLFNVIGT FAANSEVDGY EMLVNIEDAS RLMRYPAGNI TGWRLWLDEP LKVDSLSQQK LP EGSKWQD WRDRKGELFQ AVRMEKNMMG LLLSLIVAVA AFNIITSLGL MVMEKQGEVA ILQTQGLTPR QIMMVFMVQG ASA GIIGAI LGAALGALLA SQLNNLMPII GVLLDGAALP VAIEPLQVIV IALVAMAIAL LSTLYPSWRA AATQPAE UniProtKB: Lipoprotein-releasing system transmembrane protein LolC |
-分子 #2: Lipoprotein-releasing system transmembrane protein LolE
分子 | 名称: Lipoprotein-releasing system transmembrane protein LolE タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
---|---|
由来(天然) | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
分子量 | 理論値: 44.200496 KDa |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
配列 | 文字列: SLLIGLRFSR GRRRGGMVSL ISVISTIGIA LGVAVLIVGL SAMNGFEREL NNRILAVVPH GEIEAVDQPW TNWQEALDHV QKVPGIAAA APYINFTGLV ESGANLRAIQ VKGVNPQQEQ RLSALPSFVQ GDAWRNFKAG EQQIIIGKGV ADALKVKQGD W VSIMIPNS ...文字列: SLLIGLRFSR GRRRGGMVSL ISVISTIGIA LGVAVLIVGL SAMNGFEREL NNRILAVVPH GEIEAVDQPW TNWQEALDHV QKVPGIAAA APYINFTGLV ESGANLRAIQ VKGVNPQQEQ RLSALPSFVQ GDAWRNFKAG EQQIIIGKGV ADALKVKQGD W VSIMIPNS NPEHKLMQPK RVRLHVAGIL QLSGQLDHSF AMIPLADAQQ YLDMGSSVSG IALKMTDVFN ANKLVRDAGE VT NSYVYIK SWIGTYGYMY RDIQMIRAIM YLAMVLVIGV ACFNIVSTLV MAVKDKSGDI AVLRTLGAKD GLIRAIFVWY GLL AGLFGS LCGVIIGVVV SLQLTPIIEW IEKLIGHQFL SSDIYFIDFL PSELHWLDVF YVLVTALLLS LLASWYPARR ASNI DPA UniProtKB: Lipoprotein-releasing system transmembrane protein LolE |
-分子 #3: Lipoprotein-releasing system ATP-binding protein LolD
分子 | 名称: Lipoprotein-releasing system ATP-binding protein LolD タイプ: protein_or_peptide / ID: 3 / コピー数: 2 / 光学異性体: LEVO EC番号: トランスロカーゼ; 他の化合物の輸送を触媒; ヌクレオシド三リン酸の加水分解に伴う |
---|---|
由来(天然) | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
分子量 | 理論値: 23.823326 KDa |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
配列 | 文字列: ILLQCDNLCK RYQEGSVQTD VLHNVSFSVG EGEMMAIVGS SGSGKSTLLH LLGGLDTPTS GDVIFNGQPM SKLSSAAKAE LRNQKLGFI YQFHHLLPDF TALENVAMPL LIGKKKPAEI NSRALEMLKA VGLDHRANHR PSELSGGERQ RVAIARALVN N PRLVLADE ...文字列: ILLQCDNLCK RYQEGSVQTD VLHNVSFSVG EGEMMAIVGS SGSGKSTLLH LLGGLDTPTS GDVIFNGQPM SKLSSAAKAE LRNQKLGFI YQFHHLLPDF TALENVAMPL LIGKKKPAEI NSRALEMLKA VGLDHRANHR PSELSGGERQ RVAIARALVN N PRLVLADE PTGNLDARNA DSIFQLLGEL NRLQGTAFLV VTHDLQLAKR MSRQLEMRDG UniProtKB: Lipoprotein-releasing system ATP-binding protein LolD |
-分子 #4: Triacyl-lipoprotein
分子 | 名称: Triacyl-lipoprotein / タイプ: protein_or_peptide / ID: 4 / コピー数: 1 / 光学異性体: DEXTRO |
---|---|
由来(天然) | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
分子量 | 理論値: 492.547 Da |
配列 | 文字列: (DCY)(DSN)(DAL)(DAL)AA |
-分子 #5: PENTADECANOIC ACID
分子 | 名称: PENTADECANOIC ACID / タイプ: ligand / ID: 5 / コピー数: 1 / 式: F15 |
---|---|
分子量 | 理論値: 242.397 Da |
Chemical component information | ChemComp-F15: |
-分子 #6: (2R)-2-(tridecanoyloxy)propyl hexadecanoate
分子 | 名称: (2R)-2-(tridecanoyloxy)propyl hexadecanoate / タイプ: ligand / ID: 6 / コピー数: 1 / 式: ZM5 |
---|---|
分子量 | 理論値: 526.832 Da |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
---|---|
解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
濃度 | 1.6 mg/mL |
---|---|
緩衝液 | pH: 7.4 |
凍結 | 凍結剤: ETHANE |
詳細 | This sample was monodisperse |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
---|---|
撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) / 平均電子線量: 46.4 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: OTHER / 撮影モード: OTHER / 最大 デフォーカス(公称値): 5.0 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 1.0 µm |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
-画像解析
初期モデル | モデルのタイプ: NONE |
---|---|
最終 再構成 | 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 3.8 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 使用した粒子像数: 104875 |
初期 角度割当 | タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD / ソフトウェア - 名称: RELION (ver. 3) |
最終 角度割当 | タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD / ソフトウェア - 名称: RELION (ver. 3) |