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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-22245 | |||||||||
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タイトル | Cryo-EM structure of EcmrR-RNAP-promoter initial transcribing complex with 4-nt RNA transcript (EcmrR-RPitc-4nt) | |||||||||
マップデータ | ||||||||||
試料 |
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キーワード | Transcriptional factor / TRANSCRIPTION / TRANSFERASE-DNA complex / promoter / multidrug recognition | |||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 sigma factor antagonist complex / cytosolic DNA-directed RNA polymerase complex / regulation of DNA-templated transcription initiation / sigma factor activity / DNA-directed RNA polymerase complex / DNA-templated transcription initiation / ribonucleoside binding / DNA-directed 5'-3' RNA polymerase activity / DNA-directed RNA polymerase / response to heat ...sigma factor antagonist complex / cytosolic DNA-directed RNA polymerase complex / regulation of DNA-templated transcription initiation / sigma factor activity / DNA-directed RNA polymerase complex / DNA-templated transcription initiation / ribonucleoside binding / DNA-directed 5'-3' RNA polymerase activity / DNA-directed RNA polymerase / response to heat / protein dimerization activity / negative regulation of DNA-templated transcription / DNA-templated transcription / magnesium ion binding / DNA binding / zinc ion binding / cytosol / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Escherichia coli O157:H7 (大腸菌) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.7 Å | |||||||||
データ登録者 | Yang Y / Liu C | |||||||||
引用 | ジャーナル: Nat Commun / 年: 2021 タイトル: Structural visualization of transcription activated by a multidrug-sensing MerR family regulator. 著者: Yang Yang / Chang Liu / Wei Zhou / Wei Shi / Ming Chen / Baoyue Zhang / David G Schatz / Yangbo Hu / Bin Liu / 要旨: Bacterial RNA polymerase (RNAP) holoenzyme initiates transcription by recognizing the conserved -35 and -10 promoter elements that are optimally separated by a 17-bp spacer. The MerR family of ...Bacterial RNA polymerase (RNAP) holoenzyme initiates transcription by recognizing the conserved -35 and -10 promoter elements that are optimally separated by a 17-bp spacer. The MerR family of transcriptional regulators activate suboptimal 19-20 bp spacer promoters in response to myriad cellular signals, ranging from heavy metals to drug-like compounds. The regulation of transcription by MerR family regulators is not fully understood. Here we report one crystal structure of a multidrug-sensing MerR family regulator EcmrR and nine cryo-electron microscopy structures that capture the EcmrR-dependent transcription process from promoter opening to initial transcription to RNA elongation. These structures reveal that EcmrR is a dual ligand-binding factor that reshapes the suboptimal 19-bp spacer DNA to enable optimal promoter recognition, sustains promoter remodeling to stabilize initial transcribing complexes, and finally dissociates from the promoter to reverse DNA remodeling and facilitate the transition to elongation. Our findings yield a comprehensive model for transcription regulation by MerR family factors and provide insights into the transition from transcription initiation to elongation. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_22245.map.gz | 59.7 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-22245-v30.xml emd-22245.xml | 27.1 KB 27.1 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_22245.png | 221.3 KB | ||
Filedesc metadata | emd-22245.cif.gz | 9.5 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-22245 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-22245 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_22245_validation.pdf.gz | 542.3 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_22245_full_validation.pdf.gz | 541.9 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_22245_validation.xml.gz | 6.4 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_22245_validation.cif.gz | 7.3 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-22245 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-22245 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | 6xljMC 6wl5C 6xl5C 6xl6C 6xl9C 6xlaC 6xlkC 6xllC 6xlmC 6xlnC C: 同じ文献を引用 (文献) M: このマップから作成された原子モデル |
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類似構造データ |
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_22245.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 64 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.333 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-試料の構成要素
+全体 : EcmrR-RNAP-promoter initial transcribing complex with 4-nt RNA tr...
+超分子 #1: EcmrR-RNAP-promoter initial transcribing complex with 4-nt RNA tr...
+分子 #1: DNA-directed RNA polymerase subunit alpha
+分子 #2: DNA-directed RNA polymerase subunit beta
+分子 #3: DNA-directed RNA polymerase subunit beta'
+分子 #4: DNA-directed RNA polymerase subunit omega
+分子 #5: RNA polymerase sigma factor RpoD
+分子 #6: MerR family transcriptional regulator EcmrR
+分子 #7: synthetic non-template strand DNA (54-MER)
+分子 #9: synthetic template strand DNA (54-MER)
+分子 #8: RNA (5'-D(*(GTP))-R(P*CP*AP*G)-3')
+分子 #10: CHAPSO
+分子 #11: TETRAPHENYLANTIMONIUM ION
+分子 #12: MAGNESIUM ION
+分子 #13: ZINC ION
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
濃度 | 6.6 mg/mL |
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緩衝液 | pH: 7.5 |
グリッド | モデル: Quantifoil R1.2/1.3 / 材質: GOLD / メッシュ: 300 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: HOLEY / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 前処理 - 時間: 15 sec. / 前処理 - 雰囲気: AIR / 前処理 - 気圧: 101.325 kPa |
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 295 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 検出モード: SUPER-RESOLUTION / デジタル化 - 画像ごとのフレーム数: 1-44 / 平均露光時間: 13.2 sec. / 平均電子線量: 50.46 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | C2レンズ絞り径: 100.0 µm / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 2.2 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 1.2 µm / 倍率(公称値): 105000 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER ホルダー冷却材: NITROGEN |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |