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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-2147 | |||||||||
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タイトル | Electron microscopy of Influenza hemagglutinin (South Carolina/1/1918 (H1N1)) in complex with neutralizing antibody (Fab CR9114) | |||||||||
マップデータ | Influenza hemagglutinin (South Carolina/1/1918 (H1N1)), neutralizing antibody (Fab CR9114), negative stained, single particle analysis | |||||||||
試料 |
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キーワード | Influenza hemagglutinin (South Carolina/1/1918 (H1N1)) / neutralizing antibody (Fab CR9114) / negative stained / single particle analysis | |||||||||
生物種 | Influenza A virus (A/South Carolina/1/1918(H1N1)) (A型インフルエンザウイルス) / Homo sapiens (ヒト) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / ネガティブ染色法 / 解像度: 18.0 Å | |||||||||
データ登録者 | Khayat R / Meltagen Z / Ekiert DC / Dreyfus C / Wilson IA / Ward AB | |||||||||
引用 | ジャーナル: Science / 年: 2012 タイトル: Highly conserved protective epitopes on influenza B viruses. 著者: Cyrille Dreyfus / Nick S Laursen / Ted Kwaks / David Zuijdgeest / Reza Khayat / Damian C Ekiert / Jeong Hyun Lee / Zoltan Metlagel / Miriam V Bujny / Mandy Jongeneelen / Remko van der Vlugt / ...著者: Cyrille Dreyfus / Nick S Laursen / Ted Kwaks / David Zuijdgeest / Reza Khayat / Damian C Ekiert / Jeong Hyun Lee / Zoltan Metlagel / Miriam V Bujny / Mandy Jongeneelen / Remko van der Vlugt / Mohammed Lamrani / Hans J W M Korse / Eric Geelen / Özcan Sahin / Martijn Sieuwerts / Just P J Brakenhoff / Ronald Vogels / Olive T W Li / Leo L M Poon / Malik Peiris / Wouter Koudstaal / Andrew B Ward / Ian A Wilson / Jaap Goudsmit / Robert H E Friesen / 要旨: Identification of broadly neutralizing antibodies against influenza A viruses has raised hopes for the development of monoclonal antibody-based immunotherapy and "universal" vaccines for influenza. ...Identification of broadly neutralizing antibodies against influenza A viruses has raised hopes for the development of monoclonal antibody-based immunotherapy and "universal" vaccines for influenza. However, a substantial part of the annual flu burden is caused by two cocirculating, antigenically distinct lineages of influenza B viruses. Here, we report human monoclonal antibodies, CR8033, CR8071, and CR9114, that protect mice against lethal challenge from both lineages. Antibodies CR8033 and CR8071 recognize distinct conserved epitopes in the head region of the influenza B hemagglutinin (HA), whereas CR9114 binds a conserved epitope in the HA stem and protects against lethal challenge with influenza A and B viruses. These antibodies may inform on development of monoclonal antibody-based treatments and a universal flu vaccine for all influenza A and B viruses. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_2147.map.gz | 5.9 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-2147-v30.xml emd-2147.xml | 13.4 KB 13.4 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_2147.png | 35.4 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-2147 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-2147 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_2147_validation.pdf.gz | 200.5 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_2147_full_validation.pdf.gz | 199.6 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_2147_validation.xml.gz | 5.9 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-2147 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-2147 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | 2143C 2144C 2145C 2146C 2148C 2149C 2150C 4fqhC 4fqiC 4fqjC 4fqkC 4fqlC 4fqmC 4fqvC 4fqyC C: 同じ文献を引用 (文献) |
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類似構造データ |
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_2147.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 15.3 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | Influenza hemagglutinin (South Carolina/1/1918 (H1N1)), neutralizing antibody (Fab CR9114), negative stained, single particle analysis | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 2.18 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-試料の構成要素
-全体 : Influenza hemagglutinin (South Carolina/1/1918 (H1N1)), neutraliz...
全体 | 名称: Influenza hemagglutinin (South Carolina/1/1918 (H1N1)), neutralizing antibody (Fab CR9114), negative stained, single particle analysis |
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要素 |
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-超分子 #1000: Influenza hemagglutinin (South Carolina/1/1918 (H1N1)), neutraliz...
超分子 | 名称: Influenza hemagglutinin (South Carolina/1/1918 (H1N1)), neutralizing antibody (Fab CR9114), negative stained, single particle analysis タイプ: sample / ID: 1000 / 詳細: The sample was monodisperse / 集合状態: Trimer of hemagglutinin binds 3 Fabs / Number unique components: 2 |
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分子量 | 実験値: 282 KDa / 理論値: 282 KDa / 手法: Amino acid sequence |
-分子 #1: Influenza hemagglutinin (South Carolina/1/1918 (H1N1))
分子 | 名称: Influenza hemagglutinin (South Carolina/1/1918 (H1N1)) タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 3 / 集合状態: Trimer / 組換発現: Yes |
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由来(天然) | 生物種: Influenza A virus (A/South Carolina/1/1918(H1N1)) (A型インフルエンザウイルス) 別称: Influenza |
分子量 | 実験値: 49 KDa / 理論値: 49 KDa |
組換発現 | 生物種: Sf9 / 組換プラスミド: pDCE198 |
-分子 #2: IgG Fab fragment (CR9114)
分子 | 名称: IgG Fab fragment (CR9114) / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / コピー数: 3 / 集合状態: 3 monomers / 組換発現: Yes |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) / 別称: Human |
分子量 | 実験値: 45 KDa / 理論値: 45 KDa |
-実験情報
-構造解析
手法 | ネガティブ染色法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
濃度 | 0.1 mg/mL |
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緩衝液 | pH: 8 / 詳細: 20 mM HEPES 8.0, 50mM NaCl |
染色 | タイプ: NEGATIVE 詳細: Grids with adsorbed protein floated on 2% w/v uranyl formate for 30 seconds. |
グリッド | 詳細: 400 mesh gold grid with thin carbon support, glow discharged in amylamine atmosphere |
凍結 | 凍結剤: NONE / チャンバー内湿度: 18 % / 装置: OTHER |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TECNAI F20 |
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アライメント法 | Legacy - 非点収差: Objective lens astigmatism was corrected at 100,000 times magnification |
詳細 | Weak beam illumination |
日付 | 2011年2月16日 |
撮影 | カテゴリ: CCD フィルム・検出器のモデル: GATAN ULTRASCAN 4000 (4k x 4k) デジタル化 - サンプリング間隔: 10.9 µm / 実像数: 195 / 平均電子線量: 16 e/Å2 / Od range: 1.4 / ビット/ピクセル: 16 |
Tilt angle min | 0 |
電子線 | 加速電圧: 120 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 倍率(補正後): 100000 / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 1.2 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 0.6 µm / 倍率(公称値): 100000 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: SIDE ENTRY, EUCENTRIC / Tilt angle max: 55 |
実験機器 | モデル: Tecnai F20 / 画像提供: FEI Company |
-画像解析
詳細 | Particles were selected using DoG Picker and processed using a combination of EMAN2 and Sparx. |
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CTF補正 | 詳細: Each particle |
最終 再構成 | 想定した対称性 - 点群: C3 (3回回転対称) / アルゴリズム: OTHER / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 18.0 Å / 解像度の算出法: FSC 0.5 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: EMAN2, and, Sparx / 使用した粒子像数: 9402 |
-原子モデル構築 1
初期モデル | PDB ID: |
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ソフトウェア | 名称: Molrep, Chimera |
詳細 | Protocol: Rigid body. The hemagglutinin trimer was fit, then the Fabs were fit while imposing 3-fold non-cyrstallographic symmetry using Molrep. |
精密化 | 空間: REAL / プロトコル: RIGID BODY FIT / 当てはまり具合の基準: Correlation coefficient |
-原子モデル構築 2
初期モデル | PDB ID: |
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ソフトウェア | 名称: Molrep, Chimera |
詳細 | Protocol: Rigid body. The hemagluttinin trimer was fit, then the Fabs were fit while imposing 3-fold non-cyrstallographic symmetry using Molrep. |
精密化 | 空間: REAL / プロトコル: RIGID BODY FIT / 当てはまり具合の基準: Correlation coefficient |