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基本情報
| 登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-20922 | |||||||||
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| タイトル | GltPh in complex with L-aspartate and sodium ions in outward-facing state | |||||||||
マップデータ | GltPh in complex with L-aspartate and sodium ions map | |||||||||
試料 |
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キーワード | aspartate transporter / TRANSPORT PROTEIN | |||||||||
| 機能・相同性 | 機能・相同性情報L-aspartate transmembrane transport / amino acid:sodium symporter activity / L-aspartate transmembrane transporter activity / L-aspartate import across plasma membrane / chloride transmembrane transporter activity / protein homotrimerization / chloride transmembrane transport / metal ion binding / identical protein binding / plasma membrane 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
| 生物種 | ![]() Pyrococcus horikoshii (古細菌) | |||||||||
| 手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.08 Å | |||||||||
データ登録者 | Wang X / Boudker O | |||||||||
| 資金援助 | 米国, 2件
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引用 | ジャーナル: Nat Chem Biol / 年: 2020タイトル: Use of paramagnetic F NMR to monitor domain movement in a glutamate transporter homolog. 著者: Yun Huang / Xiaoyu Wang / Guohua Lv / Asghar M Razavi / Gerard H M Huysmans / Harel Weinstein / Clay Bracken / David Eliezer / Olga Boudker / ![]() 要旨: In proteins where conformational changes are functionally important, the number of accessible states and their dynamics are often difficult to establish. Here we describe a novel F-NMR spectroscopy ...In proteins where conformational changes are functionally important, the number of accessible states and their dynamics are often difficult to establish. Here we describe a novel F-NMR spectroscopy approach to probe dynamics of large membrane proteins. We labeled a glutamate transporter homolog with a F probe via cysteine chemistry and with a Ni ion via chelation by a di-histidine motif. We used distance-dependent enhancement of the longitudinal relaxation of F nuclei by the paramagnetic metal to assign the observed resonances. We identified one inward- and two outward-facing states of the transporter, in which the substrate-binding site is near the extracellular and intracellular solutions, respectively. We then resolved the structure of the unanticipated second outward-facing state by cryo-EM. Finally, we showed that the rates of the conformational exchange are accessible from measurements of the metal-enhanced longitudinal relaxation of F nuclei. | |||||||||
| 履歴 |
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構造の表示
| ムービー |
ムービービューア |
|---|---|
| 構造ビューア | EMマップ: SurfView Molmil Jmol/JSmol |
| 添付画像 |
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ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
| マップデータ | emd_20922.map.gz | 3.4 MB | EMDBマップデータ形式 | |
|---|---|---|---|---|
| ヘッダ (付随情報) | emd-20922-v30.xml emd-20922.xml | 10.6 KB 10.6 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
| 画像 | emd_20922.png | 27.8 KB | ||
| Filedesc metadata | emd-20922.cif.gz | 5.3 KB | ||
| アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-20922 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-20922 | HTTPS FTP |
-検証レポート
| 文書・要旨 | emd_20922_validation.pdf.gz | 321.4 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
|---|---|---|---|---|
| 文書・詳細版 | emd_20922_full_validation.pdf.gz | 321 KB | 表示 | |
| XML形式データ | emd_20922_validation.xml.gz | 6 KB | 表示 | |
| CIF形式データ | emd_20922_validation.cif.gz | 6.9 KB | 表示 | |
| アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-20922 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-20922 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
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リンク
| EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
|---|---|
| 「今月の分子」の関連する項目 |
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マップ
| ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_20922.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 64 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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| 注釈 | GltPh in complex with L-aspartate and sodium ions map | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.06 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 密度 |
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| 対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
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試料の構成要素
-全体 : Complex of GltPh with L-aspartate and sodium ions in MSP1E3 nanodisc
| 全体 | 名称: Complex of GltPh with L-aspartate and sodium ions in MSP1E3 nanodisc |
|---|---|
| 要素 |
|
-超分子 #1: Complex of GltPh with L-aspartate and sodium ions in MSP1E3 nanodisc
| 超分子 | 名称: Complex of GltPh with L-aspartate and sodium ions in MSP1E3 nanodisc タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: #1 |
|---|---|
| 由来(天然) | 生物種: ![]() Pyrococcus horikoshii (古細菌) |
| 分子量 | 理論値: 134 KDa |
-分子 #1: Glutamate transporter homolog
| 分子 | 名称: Glutamate transporter homolog / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
|---|---|
| 由来(天然) | 生物種: ![]() Pyrococcus horikoshii (古細菌) |
| 分子量 | 理論値: 44.669957 KDa |
| 組換発現 | 生物種: ![]() |
| 配列 | 文字列: (FME)GLYRKYIEY PVLQKILIGL ILGAIVGLIL GHYGYAHAVH TYVKPFGDLF VRLLKMLVMP IVFASLVVGA ASISPA RLG RVGVKIVVYY LLTSAFAVTL GIIMARLFNP GAGIHLAVGG QQFQPHQAPP LVHILLDIVP TNPFGALANG QVLPTIF FA ...文字列: (FME)GLYRKYIEY PVLQKILIGL ILGAIVGLIL GHYGYAHAVH TYVKPFGDLF VRLLKMLVMP IVFASLVVGA ASISPA RLG RVGVKIVVYY LLTSAFAVTL GIIMARLFNP GAGIHLAVGG QQFQPHQAPP LVHILLDIVP TNPFGALANG QVLPTIF FA IILGIAITYL MNSENEKVRK SAETLLDAIN GLAEAMYKIV NGVMQYAPIG VFALIAYVMA EQGVHVVGEL AKVTAAVY V GLTLQILLVY FVLLKIYGID PISFIKHAKD AMLTAFVTRS SSGTLPVTMR VAKEMGISEG IYSFTLPLGA TINMDGTAL YQGVCTFFIA NALGSHLTVG QQLTIVLTAV LASIGTAGVP GAGAIMLAMV LHSVGLPLTD PNVAAAYAMI LGIDAILDMG RTMVNVTGD LTGTAIVAKT EGTLVPR |
-分子 #2: ASPARTIC ACID
| 分子 | 名称: ASPARTIC ACID / タイプ: ligand / ID: 2 / コピー数: 1 / 式: ASP |
|---|---|
| 分子量 | 理論値: 133.103 Da |
| Chemical component information | ![]() ChemComp-ASP: |
-分子 #3: [(2~{R})-1-[2-azanylethoxy(oxidanyl)phosphoryl]oxy-3-hexadecanoyl...
| 分子 | 名称: [(2~{R})-1-[2-azanylethoxy(oxidanyl)phosphoryl]oxy-3-hexadecanoyloxy-propan-2-yl] (~{Z})-octadec-9-enoate タイプ: ligand / ID: 3 / コピー数: 2 / 式: 6OU |
|---|---|
| 分子量 | 理論値: 717.996 Da |
| Chemical component information | ![]() ChemComp-6OU: |
-実験情報
-構造解析
| 手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
|---|---|
解析 | 単粒子再構成法 |
| 試料の集合状態 | particle |
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試料調製
| 緩衝液 | pH: 7.4 |
|---|---|
| 糖包埋 | 材質: ice |
| 凍結 | 凍結剤: ETHANE |
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電子顕微鏡法
| 顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
|---|---|
| 撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) / 平均電子線量: 50.1615 e/Å2 |
| 電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
| 電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD |
| 実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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画像解析
| 初期モデル | モデルのタイプ: PDB ENTRY |
|---|---|
| 最終 再構成 | 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 3.08 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 使用した粒子像数: 94731 |
| 初期 角度割当 | タイプ: ANGULAR RECONSTITUTION |
| 最終 角度割当 | タイプ: ANGULAR RECONSTITUTION |
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万見について



キーワード
Pyrococcus horikoshii (古細菌)
データ登録者
米国, 2件
引用
UCSF Chimera













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