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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-2036 | |||||||||
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タイトル | Three-dimensional structure of Tripeptidyl peptidase II from Homo sapiens - a spindle-shaped homo-36mer | |||||||||
マップデータ | Tripeptidyl peptidase II complex of Homo sapiens | |||||||||
試料 |
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機能・相同性 | Peptidase S8/S53 domain 機能・相同性情報 | |||||||||
生物種 | Homo sapiens (ヒト) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 9.9 Å | |||||||||
データ登録者 | Schoenegge AM / Villa E / Foerster F / Hegerl R / Peters J / Baumeister W / Rockel B | |||||||||
引用 | ジャーナル: Structure / 年: 2012 タイトル: The structure of human tripeptidyl peptidase II as determined by a hybrid approach. 著者: Anne-Marie Schönegge / Elizabeth Villa / Friedrich Förster / Reiner Hegerl / Jürgen Peters / Wolfgang Baumeister / Beate Rockel / 要旨: Tripeptidyl-peptidase II (TPPII) is a high molecular mass (∼5 MDa) serine protease, which is thought to act downstream of the 26S proteasome, cleaving peptides released by the latter. Here, the ...Tripeptidyl-peptidase II (TPPII) is a high molecular mass (∼5 MDa) serine protease, which is thought to act downstream of the 26S proteasome, cleaving peptides released by the latter. Here, the structure of human TPPII (HsTPPII) has been determined to subnanometer resolution by cryoelectron microscopy and single-particle analysis. The complex is built from two strands forming a quasihelical structure harboring a complex system of inner cavities. HsTPPII particles exhibit some polymorphism resulting in complexes consisting of nine or of eight dimers per strand. To obtain deeper insights into the architecture and function of HsTPPII, we have created a pseudoatomic structure of the HsTPPII spindle using a comparative model of HsTPPII dimers and molecular dynamics flexible fitting. Analyses of the resulting hybrid structure of the HsTPPII holocomplex provide new insights into the mechanism of maturation and activation. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_2036.map.gz | 22.1 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-2036-v30.xml emd-2036.xml | 8.4 KB 8.4 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | EMD_2036.png | 150.2 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-2036 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-2036 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_2036_validation.pdf.gz | 217.9 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_2036_full_validation.pdf.gz | 217 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_2036_validation.xml.gz | 7.1 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-2036 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-2036 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_2036.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 210.9 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | Tripeptidyl peptidase II complex of Homo sapiens | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.78 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-試料の構成要素
-全体 : Tripeptidyl peptidase II of Homo Sapiens
全体 | 名称: Tripeptidyl peptidase II of Homo Sapiens |
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要素 |
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-超分子 #1000: Tripeptidyl peptidase II of Homo Sapiens
超分子 | 名称: Tripeptidyl peptidase II of Homo Sapiens / タイプ: sample / ID: 1000 / 集合状態: 36-mer / Number unique components: 1 |
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分子量 | 理論値: 5 MDa |
-分子 #1: Tripeptidyl peptidase II
分子 | 名称: Tripeptidyl peptidase II / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / Name.synonym: Tripeptidyl peptidase II of Homo Sapiens / コピー数: 1 / 集合状態: 36-mer / 組換発現: Yes |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) / 別称: Human |
分子量 | 理論値: 5 MDa |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) / 組換プラスミド: pET30b |
配列 | InterPro: Peptidase S8/S53 domain |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
濃度 | 0.2 mg/mL |
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緩衝液 | pH: 7.5 / 詳細: 80 mM KPO4, 1 mM DTT, 5% glycerol |
グリッド | 詳細: glow-discharged C-flat 4/1 grids covered with a thin carbon film |
凍結 | 凍結剤: ETHANE / 装置: OTHER 手法: Sample was applied on grid, blotted briefly and washed twice with buffer (40 mM ammonium sulfate, pH 7.5) |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TECNAI F20 |
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撮影 | カテゴリ: CCD / フィルム・検出器のモデル: FEI EAGLE (2k x 2k) / 平均電子線量: 15 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 200 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 倍率(補正後): 84270 / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2 mm |
試料ステージ | 試料ホルダー: side-entry cryoholder / 試料ホルダーモデル: GATAN LIQUID NITROGEN |
実験機器 | モデル: Tecnai F20 / 画像提供: FEI Company |
-画像解析
詳細 | Particles were selected manually |
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CTF補正 | 詳細: each image |
最終 再構成 | 想定した対称性 - 点群: D2 (2回x2回 2面回転対称) アルゴリズム: OTHER / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 9.9 Å / 解像度の算出法: FSC 0.5 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: XMIPP / 詳細: Final map was b-factor corrected. / 使用した粒子像数: 96116 |