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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-1968 | |||||||||
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タイトル | The cryo-EM structure of HBV Cp183 capsid-SRPK complex | |||||||||
マップデータ | This is a map of HBV Cp183 Capsid-SRPK1 complex | |||||||||
試料 |
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キーワード | HBV / Cp183 / SRPK | |||||||||
生物種 | Homo sapiens (ヒト) / Hepatitis B virus (B 型肝炎ウイルス) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 14.2 Å | |||||||||
データ登録者 | Chen C / Wang JC-Y / Zlotnick A | |||||||||
引用 | ジャーナル: PLoS Pathog / 年: 2011 タイトル: A kinase chaperones hepatitis B virus capsid assembly and captures capsid dynamics in vitro. 著者: Chao Chen / Joseph Che-Yen Wang / Adam Zlotnick / 要旨: The C-terminal domain (CTD) of Hepatitis B virus (HBV) core protein is involved in regulating multiple stages of the HBV lifecycle. CTD phosphorylation correlates with pregenomic-RNA encapsidation ...The C-terminal domain (CTD) of Hepatitis B virus (HBV) core protein is involved in regulating multiple stages of the HBV lifecycle. CTD phosphorylation correlates with pregenomic-RNA encapsidation during capsid assembly, reverse transcription, and viral transport, although the mechanisms remain unknown. In vitro, purified HBV core protein (Cp183) binds any RNA and assembles aggressively, independent of phosphorylation, to form empty and RNA-filled capsids. We hypothesize that there must be a chaperone that binds the CTD to prevent self-assembly and nonspecific RNA packaging. Here, we show that HBV capsid assembly is stalled by the Serine Arginine protein kinase (SRPK) binding to the CTD, and reactivated by subsequent phosphorylation. Using the SRPK to probe capsids, solution and structural studies showed that SRPK bound to capsid, though the CTD is sequestered on the capsid interior. This result indicates transient CTD externalization and suggests that capsid dynamics could be crucial for directing HBV intracellular trafficking. Our studies illustrate the stochastic nature of virus capsids and demonstrate the appropriation of a host protein by a virus for a non-canonical function. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_1968.map.gz | 9.1 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-1968-v30.xml emd-1968.xml | 9.4 KB 9.4 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | EMD-1968-SRPK-emdb.jpg | 157.3 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-1968 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-1968 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_1968_validation.pdf.gz | 233 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_1968_full_validation.pdf.gz | 232.1 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_1968_validation.xml.gz | 6.5 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-1968 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-1968 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_1968.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 30.3 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | This is a map of HBV Cp183 Capsid-SRPK1 complex | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 2.94 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-試料の構成要素
-全体 : HBV Cp183 capsid-SRPK complex
全体 | 名称: HBV Cp183 capsid-SRPK complex |
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要素 |
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-超分子 #1000: HBV Cp183 capsid-SRPK complex
超分子 | 名称: HBV Cp183 capsid-SRPK complex / タイプ: sample / ID: 1000 / Number unique components: 2 |
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-超分子 #1: Hepatitis B virus
超分子 | 名称: Hepatitis B virus / タイプ: virus / ID: 1 / Name.synonym: HBV Cp183 / 詳細: HBV Cp183 and SRPK were both purified from E. coli / NCBI-ID: 10407 / 生物種: Hepatitis B virus / ウイルスタイプ: VIRUS-LIKE PARTICLE / ウイルス・単離状態: STRAIN / ウイルス・エンベロープ: No / ウイルス・中空状態: Yes / Syn species name: HBV Cp183 |
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宿主 | 生物種: Homo sapiens (ヒト) / 別称: VERTEBRATES |
ウイルス殻 | Shell ID: 1 / 名称: Cp183 / 直径: 415 Å / T番号(三角分割数): 4 |
-分子 #1: Serine Arginine protein kinase
分子 | 名称: Serine Arginine protein kinase / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / Name.synonym: SRPK / 詳細: HBV Cp183 and SRPK were both purified from E. coli / 組換発現: Yes |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) / 別称: Human |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
濃度 | 0.24 mg/mL |
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緩衝液 | pH: 7.4 / 詳細: 0.53 M NaCl, 10 mM DTT, 20 mM Tris-HCl |
グリッド | 詳細: Quantifoil R 2/2 holey carbon 200 mesh copper grids |
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 93 K / 装置: OTHER / 詳細: Vitrification instrument: Vitrobot / 手法: Blot for 4 seconds before plunging |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | JEOL 3200FS |
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温度 | 平均: 97 K |
アライメント法 | Legacy - 非点収差: objective lens astigmatism was corrected at 80,000 times magnification |
特殊光学系 | エネルギーフィルター - 名称: Omega filter |
撮影 | カテゴリ: CCD フィルム・検出器のモデル: GATAN ULTRASCAN 4000 (4k x 4k) 実像数: 107 / 平均電子線量: 14 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 1.1 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 4.4 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 1.67 µm / 倍率(公称値): 40000 |
試料ステージ | 試料ホルダー: Side entry liquid nitrogen-cooled cryo specimen holder 試料ホルダーモデル: GATAN LIQUID NITROGEN |
-画像解析
CTF補正 | 詳細: Each particle phase-flipping |
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最終 再構成 | 想定した対称性 - 点群: I (正20面体型対称) / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 14.2 Å / 解像度の算出法: FSC 0.5 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: Auto3dem / 使用した粒子像数: 4399 |