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基本情報
| 登録情報 | ![]() | |||||||||
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| タイトル | 70S ribosome with additional S4-LSU in native untreated Mycoplasma pneumoniae cells | |||||||||
マップデータ | ||||||||||
試料 |
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キーワード | In situ / Ribosome heterogeneity / S4 / cryo-ET / RIBOSOME | |||||||||
| 生物種 | Mycoplasmoides pneumoniae M129 (バクテリア) | |||||||||
| 手法 | サブトモグラム平均法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 4.4 Å | |||||||||
データ登録者 | Xue L / Mahamid J | |||||||||
| 資金援助 | European Union, ドイツ, 2件
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引用 | ジャーナル: Nature / 年: 2022タイトル: Visualizing translation dynamics at atomic detail inside a bacterial cell. 著者: Liang Xue / Swantje Lenz / Maria Zimmermann-Kogadeeva / Dimitry Tegunov / Patrick Cramer / Peer Bork / Juri Rappsilber / Julia Mahamid / ![]() 要旨: Translation is the fundamental process of protein synthesis and is catalysed by the ribosome in all living cells. Here we use advances in cryo-electron tomography and sub-tomogram analysis to ...Translation is the fundamental process of protein synthesis and is catalysed by the ribosome in all living cells. Here we use advances in cryo-electron tomography and sub-tomogram analysis to visualize the structural dynamics of translation inside the bacterium Mycoplasma pneumoniae. To interpret the functional states in detail, we first obtain a high-resolution in-cell average map of all translating ribosomes and build an atomic model for the M. pneumoniae ribosome that reveals distinct extensions of ribosomal proteins. Classification then resolves 13 ribosome states that differ in their conformation and composition. These recapitulate major states that were previously resolved in vitro, and reflect intermediates during active translation. On the basis of these states, we animate translation elongation inside native cells and show how antibiotics reshape the cellular translation landscapes. During translation elongation, ribosomes often assemble in defined three-dimensional arrangements to form polysomes. By mapping the intracellular organization of translating ribosomes, we show that their association into polysomes involves a local coordination mechanism that is mediated by the ribosomal protein L9. We propose that an extended conformation of L9 within polysomes mitigates collisions to facilitate translation fidelity. Our work thus demonstrates the feasibility of visualizing molecular processes at atomic detail inside cells. | |||||||||
| 履歴 |
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構造の表示
| 添付画像 |
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ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
| マップデータ | emd_17146.map.gz | 6.7 MB | EMDBマップデータ形式 | |
|---|---|---|---|---|
| ヘッダ (付随情報) | emd-17146-v30.xml emd-17146.xml | 20.5 KB 20.5 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
| FSC (解像度算出) | emd_17146_fsc.xml | 9.1 KB | 表示 | FSCデータファイル |
| 画像 | emd_17146.png | 67.4 KB | ||
| マスクデータ | emd_17146_msk_1.map | 64 MB | マスクマップ | |
| Filedesc metadata | emd-17146.cif.gz | 5.4 KB | ||
| その他 | emd_17146_half_map_1.map.gz emd_17146_half_map_2.map.gz | 49.6 MB 49.6 MB | ||
| アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-17146 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-17146 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
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リンク
| EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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マップ
| ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_17146.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 64 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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| 投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.7005 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 密度 |
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| 対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-マスク #1
| ファイル | emd_17146_msk_1.map | ||||||||||||
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| 投影像・断面図 |
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| 密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: half maps from RELION
| ファイル | emd_17146_half_map_1.map | ||||||||||||
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| 注釈 | half maps from RELION | ||||||||||||
| 投影像・断面図 |
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| 密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: half maps from RELION
| ファイル | emd_17146_half_map_2.map | ||||||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 注釈 | half maps from RELION | ||||||||||||
| 投影像・断面図 |
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| 密度ヒストグラム |
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試料の構成要素
-全体 : Native untreated Mycoplasma pneumoniae M129 cells
| 全体 | 名称: Native untreated Mycoplasma pneumoniae M129 cells |
|---|---|
| 要素 |
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-超分子 #1: Native untreated Mycoplasma pneumoniae M129 cells
| 超分子 | 名称: Native untreated Mycoplasma pneumoniae M129 cells / タイプ: cell / ID: 1 / 親要素: 0 詳細: cryo-electron tomograms of untreated Mycoplasma pneumoniae cells growing in the fast-growing phase |
|---|---|
| 由来(天然) | 生物種: Mycoplasmoides pneumoniae M129 (バクテリア) |
-実験情報
-構造解析
| 手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
|---|---|
解析 | サブトモグラム平均法 |
| 試料の集合状態 | cell |
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試料調製
| 緩衝液 | pH: 7.4 詳細: The modified Hayflick medium: 14.7g/L Difco PPLO(Becton Dickinson), 20% (v/v) Gibco horse serum(New Zealand origin), 100 mM HEPES-Na; pH 7.4, 1% (w/w) glucose, 0.002% (w/w) phenol red, 1000 U/mL penicillin G. |
|---|---|
| グリッド | モデル: Quantifoil R2/1 / 材質: GOLD / メッシュ: 200 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: HOLEY / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE |
| 凍結 | 凍結剤: ETHANE-PROPANE 詳細: Back-side blotting for 2-3 second before plunging using a manual plunger without an environmental chamber.. |
| 詳細 | Mycoplasma pneumoniae M129 cells grown on gold Quantifoil grids at 37 degrees Celsius before plunge freezing. |
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電子顕微鏡法
| 顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
|---|---|
| 特殊光学系 | エネルギーフィルター - 名称: GIF Bioquantum / エネルギーフィルター - スリット幅: 20 eV |
| 撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 検出モード: COUNTING / 平均電子線量: 3.2 e/Å2 |
| 電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
| 電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 3.75 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 1.5 µm / 倍率(公称値): 81000 |
| 試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER ホルダー冷却材: NITROGEN |
| 実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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キーワード
Mycoplasmoides pneumoniae M129 (バクテリア)
データ登録者
ドイツ, 2件
引用























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Y (Row.)
X (Col.)












































解析
FIELD EMISSION GUN

