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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-15416 | |||||||||||||||||||||
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タイトル | Vaccinia C16 protein bound to Ku70/Ku80 | |||||||||||||||||||||
マップデータ | Map of C16 vaccinia protein bound to Ku70/Ku80 | |||||||||||||||||||||
試料 |
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キーワード | C16 vaccinia virus protein Ku70/Ku80 DNA binding inhibition / VIRAL PROTEIN | |||||||||||||||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 positive regulation of lymphocyte differentiation / small-subunit processome assembly / Ku70:Ku80 complex / DNA-dependent protein kinase complex / negative regulation of t-circle formation / DNA end binding / DNA-dependent protein kinase-DNA ligase 4 complex / nonhomologous end joining complex / cellular response to X-ray / regulation of smooth muscle cell proliferation ...positive regulation of lymphocyte differentiation / small-subunit processome assembly / Ku70:Ku80 complex / DNA-dependent protein kinase complex / negative regulation of t-circle formation / DNA end binding / DNA-dependent protein kinase-DNA ligase 4 complex / nonhomologous end joining complex / cellular response to X-ray / regulation of smooth muscle cell proliferation / Cytosolic sensors of pathogen-associated DNA / DNA ligation / IRF3-mediated induction of type I IFN / nuclear telomere cap complex / double-strand break repair via classical nonhomologous end joining / positive regulation of catalytic activity / U3 snoRNA binding / recombinational repair / regulation of telomere maintenance / protein localization to chromosome, telomeric region / cellular response to fatty acid / positive regulation of neurogenesis / cellular hyperosmotic salinity response / hematopoietic stem cell proliferation / telomeric DNA binding / 2-LTR circle formation / : / site of DNA damage / 付加脱離酵素(リアーゼ); 炭素-酸素リアーゼ類; その他の炭素-酸素リアーゼ / 5'-deoxyribose-5-phosphate lyase activity / hematopoietic stem cell differentiation / positive regulation of protein kinase activity / ATP-dependent activity, acting on DNA / activation of innate immune response / enzyme activator activity / positive regulation of telomere maintenance via telomerase / DNA helicase activity / telomere maintenance / cyclin binding / neurogenesis / protein-DNA complex / cellular response to leukemia inhibitory factor / small-subunit processome / Nonhomologous End-Joining (NHEJ) / 加水分解酵素; 酸無水物に作用; 酸無水物に作用・細胞または細胞小器官の運動に関与 / cellular response to gamma radiation / double-strand break repair via nonhomologous end joining / double-strand break repair / double-stranded DNA binding / scaffold protein binding / secretory granule lumen / DNA recombination / transcription regulator complex / ficolin-1-rich granule lumen / damaged DNA binding / chromosome, telomeric region / transcription cis-regulatory region binding / response to xenobiotic stimulus / ribonucleoprotein complex / innate immune response / negative regulation of DNA-templated transcription / DNA damage response / ubiquitin protein ligase binding / Neutrophil degranulation / protein-containing complex binding / nucleolus / positive regulation of DNA-templated transcription / positive regulation of transcription by RNA polymerase II / ATP hydrolysis activity / protein-containing complex / DNA binding / RNA binding / extracellular region / nucleoplasm / ATP binding / membrane / nucleus / plasma membrane / cytosol 類似検索 - 分子機能 | |||||||||||||||||||||
生物種 | Homo sapiens (ヒト) / Vaccinia virus Western Reserve (ウイルス) | |||||||||||||||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.47 Å | |||||||||||||||||||||
データ登録者 | Rivera-Calzada A / Arribas-Bosacoma R / Pearl LH / Llorca O | |||||||||||||||||||||
資金援助 | スペイン, 英国, 6件
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引用 | ジャーナル: Nat Commun / 年: 2022 タイトル: Structural basis for the inactivation of cytosolic DNA sensing by the vaccinia virus. 著者: Angel Rivera-Calzada / Raquel Arribas-Bosacoma / Alba Ruiz-Ramos / Paloma Escudero-Bravo / Jasminka Boskovic / Rafael Fernandez-Leiro / Antony W Oliver / Laurence H Pearl / Oscar Llorca / 要旨: Detection of cytosolic DNA is a central element of the innate immunity system against viral infection. The Ku heterodimer, a component of the NHEJ pathway of DNA repair in the nucleus, functions as ...Detection of cytosolic DNA is a central element of the innate immunity system against viral infection. The Ku heterodimer, a component of the NHEJ pathway of DNA repair in the nucleus, functions as DNA sensor that detects dsDNA of viruses that replicate in the cytoplasm. Vaccinia virus expresses two proteins, C4 and C16, that inactivate DNA sensing and enhance virulence. The structural basis for this is unknown. Here we determine the structure of the C16 - Ku complex using cryoEM. Ku binds dsDNA by a preformed ring but C16 sterically blocks this access route, abrogating binding to a dsDNA end and its insertion into DNA-PK, thereby averting signalling into the downstream innate immunity system. C4 replicates these activities using a domain with 54% identity to C16. Our results reveal how vaccinia virus subverts the capacity of Ku to recognize viral DNA. | |||||||||||||||||||||
履歴 |
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-構造の表示
添付画像 |
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-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_15416.map.gz | 82 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-15416-v30.xml emd-15416.xml | 19.9 KB 19.9 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_15416.png | 91.4 KB | ||
Filedesc metadata | emd-15416.cif.gz | 7.4 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-15416 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-15416 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_15416_validation.pdf.gz | 374.7 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_15416_full_validation.pdf.gz | 374.3 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_15416_validation.xml.gz | 6.5 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_15416_validation.cif.gz | 7.5 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-15416 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-15416 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_15416.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 107.2 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | Map of C16 vaccinia protein bound to Ku70/Ku80 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 0.835 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-試料の構成要素
-全体 : Vaccinia C16 protein bound to Ku70/Ku80
全体 | 名称: Vaccinia C16 protein bound to Ku70/Ku80 |
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要素 |
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-超分子 #1: Vaccinia C16 protein bound to Ku70/Ku80
超分子 | 名称: Vaccinia C16 protein bound to Ku70/Ku80 / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: all |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
分子量 | 理論値: 230 KDa |
-分子 #1: Ku70-Xrcc6
分子 | 名称: Ku70-Xrcc6 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
分子量 | 理論値: 74.234703 KDa |
組換発現 | 生物種: Trichoplusia ni (イラクサキンウワバ) |
配列 | 文字列: MSAWSHPQFE KGSAGSAAGS GAGWSHPQFE KLEVLFQGPG GSMSGWESYY KTEGDEEAEE EQEENLEASG DYKYSGRDSL IFLVDASKA MFESQSEDEL TPFDMSIQCI QSVYISKIIS SDRDLLAVVF YGTEKDKNSV NFKNIYVLQE LDNPGAKRIL E LDQFKGQQ ...文字列: MSAWSHPQFE KGSAGSAAGS GAGWSHPQFE KLEVLFQGPG GSMSGWESYY KTEGDEEAEE EQEENLEASG DYKYSGRDSL IFLVDASKA MFESQSEDEL TPFDMSIQCI QSVYISKIIS SDRDLLAVVF YGTEKDKNSV NFKNIYVLQE LDNPGAKRIL E LDQFKGQQ GQKRFQDMMG HGSDYSLSEV LWVCANLFSD VQFKMSHKRI MLFTNEDNPH GNDSAKASRA RTKAGDLRDT GI FLDLMHL KKPGGFDISL FYRDIISIAE DEDLRVHFEE SSKLEDLLRK VRAKETRKRA LSRLKLKLNK DIVISVGIYN LVQ KALKPP PIKLYRETNE PVKTKTRTFN TSTGGLLLPS DTKRSQIYGS RQIILEKEET EELKRFDDPG LMLMGFKPLV LLKK HHYLR PSLFVYPEES LVIGSSTLFS ALLIKCLEKE VAALCRYTPR RNIPPYFVAL VPQEEELDDQ KIQVTPPGFQ LVFLP FADD KRKMPFTEKI MATPEQVGKM KAIVEKLRFT YRSDSFENPV LQQHFRNLEA LALDLMEPEQ AVDLTLPKVE AMNKRL GSL VDEFKELVYP PDYNPEGKVT KRKHDNEGSG SKRPKVEYSE EELKTHISKG TLGKFTVPML KEACRAYGLK SGLKKQE LL EALTKHFQD UniProtKB: X-ray repair cross-complementing protein 6 |
-分子 #2: X-ray repair cross-complementing protein 5
分子 | 名称: X-ray repair cross-complementing protein 5 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO EC番号: 加水分解酵素; 酸無水物に作用; 酸無水物に作用・細胞または細胞小器官の運動に関与 |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
分子量 | 理論値: 85.546484 KDa |
組換発現 | 生物種: Trichoplusia ni (イラクサキンウワバ) |
配列 | 文字列: MAHHHHHHHH HHGALEVLFQ GPHMVRSGNK AAVVLCMDVG FTMSNSIPGI ESPFEQAKKV ITMFVQRQVF AENKDEIALV LFGTDGTDN PLSGGDQYQN ITVHRHLMLP DFDLLEDIES KIQPGSQQAD FLDALIVSMD VIQHETIGKK FEKRHIEIFT D LSSRFSKS ...文字列: MAHHHHHHHH HHGALEVLFQ GPHMVRSGNK AAVVLCMDVG FTMSNSIPGI ESPFEQAKKV ITMFVQRQVF AENKDEIALV LFGTDGTDN PLSGGDQYQN ITVHRHLMLP DFDLLEDIES KIQPGSQQAD FLDALIVSMD VIQHETIGKK FEKRHIEIFT D LSSRFSKS QLDIIIHSLK KCDISLQFFL PFSLGKEDGS GDRGDGPFRL GGHGPSFPLK GITEQQKEGL EIVKMVMISL EG EDGLDEI YSFSESLRKL CVFKKIERHS IHWPCRLTIG SNLSIRIAAY KSILQERVKK TWTVVDAKTL KKEDIQKETV YCL NDDDET EVLKEDIIQG FRYGSDIVPF SKVDEEQMKY KSEGKCFSVL GFCKSSQVQR RFFMGNQVLK VFAARDDEAA AVAL SSLIH ALDDLDMVAI VRYAYDKRAN PQVGVAFPHI KHNYECLVYV QLPFMEDLRQ YMFSSLKNSK KYAPTEAQLN AVDAL IDSM SLAKKDEKTD TLEDLFPTTK IPNPRFQRLF QCLLHRALHP REPLPPIQQH IWNMLNPPAE VTTKSQIPLS KIKTLF PLI EAKKKDQVTA QEIFQDNHED GPTAKKLKTE QGGAHFSVSS LAEGSVTSVG SVNPAENFRV LVKQKKASFE EASNQLI NH IEQFLDTNET PYFMKSIDCI RAFREEAIKF SEEQRFNNFL KALQEKVEIK QLNHFWEIVV QDGITLITKE EASGSSVT A EEAKKFLAPK DKPSGDTAAV FEEGGDVDDL LDMI UniProtKB: X-ray repair cross-complementing protein 5 |
-分子 #3: Protein C10
分子 | 名称: Protein C10 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 3 / コピー数: 2 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Vaccinia virus Western Reserve (ウイルス) / 株: Western Reserve |
分子量 | 理論値: 42.47668 KDa |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
配列 | 文字列: MDIYDDKGLQ TIKLFNNEFD CIRNDIRELF KHVTDSDSIQ LPMEDNSDII ENIRKILYRR LKNVECVDID STITFMKYDP NDDNKRTCS NWVPLTNNYM EYCLVIYLET PICGGKIKLY HPTGNIKSDK DIMFAKTLDF KSKKVLTGRK TIAVLDISVS Y NRSMTTIH ...文字列: MDIYDDKGLQ TIKLFNNEFD CIRNDIRELF KHVTDSDSIQ LPMEDNSDII ENIRKILYRR LKNVECVDID STITFMKYDP NDDNKRTCS NWVPLTNNYM EYCLVIYLET PICGGKIKLY HPTGNIKSDK DIMFAKTLDF KSKKVLTGRK TIAVLDISVS Y NRSMTTIH YNDDVDIDIH TDKNGKELCY CYITIDDHYL VDVETIGVIV NRSGKCLLVN NHLGIGIVKD KRISDSFGDV CM DTIFDFS EARELFSLTN DDNRNIAWDT DKLDDDTDIW TPVTEDDYKF LSRLVLYAKS QSDTVFDYYV LTGDTEPPTV FIF KVTRFY FNMPKGGENL YFQGWSHPQF EKGGGSGGGS GGSSAWSHPQ FEK UniProtKB: Protein C10 |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
濃度 | 0.4 mg/mL | ||||||||||||||||||
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緩衝液 | pH: 7.9 構成要素:
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グリッド | モデル: Quantifoil R0.6/1 / 材質: COPPER / メッシュ: 300 / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE | ||||||||||||||||||
凍結 | 凍結剤: ETHANE-PROPANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 278 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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特殊光学系 | エネルギーフィルター - スリット幅: 20 eV |
撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) / 実像数: 13216 / 平均電子線量: 50.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | C2レンズ絞り径: 50.0 µm / 照射モード: SPOT SCAN / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 2.4 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 0.6 µm / 倍率(公称値): 105000 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER ホルダー冷却材: NITROGEN |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
+画像解析
-原子モデル構築 1
初期モデル |
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詳細 | Initial model for chains C and D was generated using AlphaFold2 | ||||||
精密化 | 空間: REAL / プロトコル: RIGID BODY FIT | ||||||
得られたモデル | PDB-8ag5: |