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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-14000 | ||||||||||||||||||
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タイトル | Tomogram of cardiac sarcomere A-band and M-band after FIB-milling | ||||||||||||||||||
マップデータ | |||||||||||||||||||
試料 |
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キーワード | Cardiac muscle / Sarcomere / A-band / M-band / CONTRACTILE PROTEIN | ||||||||||||||||||
生物種 | Mus musculus (ハツカネズミ) | ||||||||||||||||||
手法 | 電子線トモグラフィー法 / クライオ電子顕微鏡法 | ||||||||||||||||||
データ登録者 | Wang Z / Raunser S | ||||||||||||||||||
資金援助 | European Union, 5件
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引用 | ジャーナル: Science / 年: 2022 タイトル: Structures from intact myofibrils reveal mechanism of thin filament regulation through nebulin. 著者: Zhexin Wang / Michael Grange / Sabrina Pospich / Thorsten Wagner / Ay Lin Kho / Mathias Gautel / Stefan Raunser / 要旨: In skeletal muscle, nebulin stabilizes and regulates the length of thin filaments, but the underlying mechanism remains nebulous. In this work, we used cryo-electron tomography and subtomogram ...In skeletal muscle, nebulin stabilizes and regulates the length of thin filaments, but the underlying mechanism remains nebulous. In this work, we used cryo-electron tomography and subtomogram averaging to reveal structures of native nebulin bound to thin filaments within intact sarcomeres. This in situ reconstruction provided high-resolution details of the interaction between nebulin and actin, demonstrating the stabilizing role of nebulin. Myosin bound to the thin filaments exhibited different conformations of the neck domain, highlighting its inherent structural variability in muscle. Unexpectedly, nebulin did not interact with myosin or tropomyosin, but it did interact with a troponin T linker through two potential binding motifs on nebulin, explaining its regulatory role. Our structures support the role of nebulin as a thin filament "molecular ruler" and provide a molecular basis for studying nemaline myopathies. | ||||||||||||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
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添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_14000.map.gz | 755 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-14000-v30.xml emd-14000.xml | 13.5 KB 13.5 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_14000.png | 168.8 KB | ||
Filedesc metadata | emd-14000.cif.gz | 4.1 KB | ||
その他 | emd_14000_additional_1.map.gz | 752.5 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-14000 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-14000 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_14000_validation.pdf.gz | 229 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_14000_full_validation.pdf.gz | 228.6 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_14000_validation.xml.gz | 4.9 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_14000_validation.cif.gz | 5.3 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-14000 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-14000 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_14000.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 814.8 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 これらの図は立方格子座標系で作成されたものです | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 9.288 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-追加マップ: #1
ファイル | emd_14000_additional_1.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
-全体 : Mouse cardiac muscle myofibrils
全体 | 名称: Mouse cardiac muscle myofibrils |
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要素 |
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-超分子 #1: Mouse cardiac muscle myofibrils
超分子 | 名称: Mouse cardiac muscle myofibrils / タイプ: organelle_or_cellular_component / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: #1-#7 |
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由来(天然) | 生物種: Mus musculus (ハツカネズミ) |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 電子線トモグラフィー法 |
試料の集合状態 | tissue |
-試料調製
緩衝液 | pH: 7 |
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グリッド | モデル: Quantifoil R1.2/1.3 / 材質: COPPER / メッシュ: 200 |
凍結 | 凍結剤: ETHANE / 装置: FEI VITROBOT MARK IV |
切片作成 | 集束イオンビーム - 装置: OTHER / 集束イオンビーム - イオン: OTHER / 集束イオンビーム - 電圧: 30 / 集束イオンビーム - 電流: 0.05 / 集束イオンビーム - 時間: 60 / 集束イオンビーム - 温度: 90 K / 集束イオンビーム - Initial thickness: 2000 / 集束イオンビーム - 最終 厚さ: 100 集束イオンビーム - 詳細: The value given for _em_focused_ion_beam.instrument is FEI Aquilos. This is not in a list of allowed values {'DB235', 'OTHER'} so OTHER is written into the XML file. |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 BIOQUANTUM (6k x 4k) 検出モード: COUNTING / 平均電子線量: 3.4 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | C2レンズ絞り径: 50.0 µm / 最大 デフォーカス(補正後): 5.0 µm / 最小 デフォーカス(補正後): 3.2 µm / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 5.0 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 3.2 µm / 倍率(公称値): 42000 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER ホルダー冷却材: NITROGEN |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
-画像解析
最終 再構成 | 使用した粒子像数: 37 |
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