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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-1036 | |||||||||
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タイトル | Structure of a fast kinesin: implications for ATPase mechanism and interactions with microtubules. | |||||||||
マップデータ | Neurospora crassa kinesin monomer (nK355) AMP-PNP state | |||||||||
試料 |
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生物種 | Neurospora crassa (菌類) | |||||||||
手法 | らせん対称体再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / ネガティブ染色法 / 解像度: 25.0 Å | |||||||||
データ登録者 | Krebs A | |||||||||
引用 | ジャーナル: EMBO J / 年: 2001 タイトル: Structure of a fast kinesin: implications for ATPase mechanism and interactions with microtubules. 著者: Y H Song / A Marx / J Müller / G Woehlke / M Schliwa / A Krebs / A Hoenger / E Mandelkow / 要旨: We determined the crystal structure of the motor domain of the fast fungal kinesin from Neurospora crassa (NcKin). The structure has several unique features. (i) Loop 11 in the switch 2 region is ...We determined the crystal structure of the motor domain of the fast fungal kinesin from Neurospora crassa (NcKin). The structure has several unique features. (i) Loop 11 in the switch 2 region is ordered and enables one to describe the complete nucleotide-binding pocket, including three inter-switch salt bridges between switch 1 and 2. (ii) Loop 9 in the switch 1 region bends outwards, making the nucleotide-binding pocket very wide. The displacement in switch 1 resembles that of the G-protein ras complexed with its guanosine nucleotide exchange factor. (iii) Loop 5 in the entrance to the nucleotide-binding pocket is remarkably long and interacts with the ribose of ATP. (iv) The linker and neck region is not well defined, indicating that it is mobile. (v) Image reconstructions of ice-embedded microtubules decorated with NcKin show that it interacts with several tubulin subunits, including a central beta-tubulin monomer and the two flanking alpha-tubulin monomers within the microtubule protofilament. Comparison of NcKin with other kinesins, myosin and G-proteins suggests that the rate-limiting step of ADP release is accelerated in the fungal kinesin and accounts for the unusually high velocity and ATPase activity. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_1036.map.gz | 2.8 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-1036-v30.xml emd-1036.xml | 9.7 KB 9.7 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | 1036.gif | 64.9 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-1036 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-1036 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_1036_validation.pdf.gz | 250.5 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_1036_full_validation.pdf.gz | 249.6 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_1036_validation.xml.gz | 5 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-1036 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-1036 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_1036.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 3.7 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | Neurospora crassa kinesin monomer (nK355) AMP-PNP state | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 5.526 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-試料の構成要素
-全体 : neurospora crassa kinesin monomer
全体 | 名称: neurospora crassa kinesin monomer |
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要素 |
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-超分子 #1000: neurospora crassa kinesin monomer
超分子 | 名称: neurospora crassa kinesin monomer / タイプ: sample / ID: 1000 / 集合状態: monomer / Number unique components: 2 |
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-分子 #1: neurospora crassakinesin
分子 | 名称: neurospora crassakinesin / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / Name.synonym: molecular motor / コピー数: 1 / 集合状態: monomer / 組換発現: Yes / データベース: NCBI |
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由来(天然) | 生物種: Neurospora crassa (菌類) / 別称: neurospora |
-分子 #2: tubulin
分子 | 名称: tubulin / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / Name.synonym: microtubules / コピー数: 1 / 集合状態: hetero dimer / 組換発現: No / データベース: NCBI |
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由来(天然) | 生物種: Neurospora crassa (菌類) / 別称: neurospora / 組織: brain / 細胞: neuronal cells / 細胞中の位置: cytoplasm |
-実験情報
-構造解析
手法 | ネガティブ染色法, クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | らせん対称体再構成法 |
試料の集合状態 | filament |
-試料調製
濃度 | 0.5 mg/mL |
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緩衝液 | pH: 6.9 詳細: Pipes 20mM, 50 mM NaCl, 5mM mgcl,1mM Mg-ATP, 20um taxol. |
染色 | タイプ: NEGATIVE / 詳細: ice-embedded |
グリッド | 詳細: holey grids |
凍結 | 凍結剤: PROPANE / チャンバー内温度: 93 K / 装置: HOMEMADE PLUNGER / 詳細: Vitrification instrument: self made |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI/PHILIPS CM120T |
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撮影 | カテゴリ: FILM / フィルム・検出器のモデル: KODAK SO-163 FILM / デジタル化 - スキャナー: ZEISS SCAI / デジタル化 - サンプリング間隔: 21 µm / 実像数: 18 / 平均電子線量: 5 e/Å2 / ビット/ピクセル: 16 |
Tilt angle min | 0 |
Tilt angle max | 0 |
電子線 | 加速電圧: 100 kV / 電子線源: LAB6 |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 2.0 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 1.5 µm / 倍率(公称値): 37000 |
試料ステージ | 試料ホルダー: side entry / 試料ホルダーモデル: GATAN LIQUID NITROGEN |
-画像解析
最終 再構成 | 想定した対称性 - らせんパラメータ - 軸対称性: C1 (非対称) アルゴリズム: OTHER / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 25.0 Å / 解像度の算出法: FSC 0.5 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: Phoelix, Suprim 詳細: Final maps from 36 averaged datasets = 18 helical tubes |
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