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基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-1036
タイトルStructure of a fast kinesin: implications for ATPase mechanism and interactions with microtubules.
マップデータNeurospora crassa kinesin monomer (nK355) AMP-PNP state
試料
  • 試料: neurospora crassa kinesin monomer
  • タンパク質・ペプチド: neurospora crassakinesin
  • タンパク質・ペプチド: tubulin
生物種Neurospora crassa (菌類)
手法らせん対称体再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / ネガティブ染色法 / 解像度: 25.0 Å
データ登録者Krebs A
引用ジャーナル: EMBO J / : 2001
タイトル: Structure of a fast kinesin: implications for ATPase mechanism and interactions with microtubules.
著者: Y H Song / A Marx / J Müller / G Woehlke / M Schliwa / A Krebs / A Hoenger / E Mandelkow /
要旨: We determined the crystal structure of the motor domain of the fast fungal kinesin from Neurospora crassa (NcKin). The structure has several unique features. (i) Loop 11 in the switch 2 region is ...We determined the crystal structure of the motor domain of the fast fungal kinesin from Neurospora crassa (NcKin). The structure has several unique features. (i) Loop 11 in the switch 2 region is ordered and enables one to describe the complete nucleotide-binding pocket, including three inter-switch salt bridges between switch 1 and 2. (ii) Loop 9 in the switch 1 region bends outwards, making the nucleotide-binding pocket very wide. The displacement in switch 1 resembles that of the G-protein ras complexed with its guanosine nucleotide exchange factor. (iii) Loop 5 in the entrance to the nucleotide-binding pocket is remarkably long and interacts with the ribose of ATP. (iv) The linker and neck region is not well defined, indicating that it is mobile. (v) Image reconstructions of ice-embedded microtubules decorated with NcKin show that it interacts with several tubulin subunits, including a central beta-tubulin monomer and the two flanking alpha-tubulin monomers within the microtubule protofilament. Comparison of NcKin with other kinesins, myosin and G-proteins suggests that the rate-limiting step of ADP release is accelerated in the fungal kinesin and accounts for the unusually high velocity and ATPase activity.
履歴
登録2003年2月27日-
ヘッダ(付随情報) 公開2003年2月27日-
マップ公開2003年2月27日-
更新2016年4月13日-
現状2016年4月13日処理サイト: PDBe / 状態: 公開

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構造の表示

ムービー
  • 表面図(断面を密度値に従い着色)
  • 表面レベル: 53.068715402
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
  • 表面図(円筒半径に従い着色)
  • 表面レベル: 53.068715402
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
ムービービューア
構造ビューアEMマップ:
SurfViewMolmilJmol/JSmol
添付画像

ダウンロードとリンク

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マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_1036.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 3.7 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
注釈Neurospora crassa kinesin monomer (nK355) AMP-PNP state
投影像・断面図

画像のコントロール

大きさ
明度
コントラスト
その他
Z (Sec.)Y (Row.)X (Col.)
5.53 Å/pix.
x 100 pix.
= 552.6 Å
5.53 Å/pix.
x 100 pix.
= 552.6 Å
5.53 Å/pix.
x 100 pix.
= 552.6 Å

表面

投影像

断面 (1/3)

断面 (1/2)

断面 (2/3)

画像は Spider により作成

ボクセルのサイズX=Y=Z: 5.526 Å
密度
表面レベル1: 64.5 / ムービー #1: 53.0687154
最小 - 最大0.0 - 100.0
平均 (標準偏差)42.953899999999997 (±9.965009999999999)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderXYZ
Origin000
サイズ100100100
Spacing100100100
セルA=B=C: 552.6 Å
α=β=γ: 90 °

CCP4マップ ヘッダ情報:

modeImage stored as Reals
Å/pix. X/Y/Z5.5265.5265.526
M x/y/z100100100
origin x/y/z0.0000.0000.000
length x/y/z552.600552.600552.600
α/β/γ90.00090.00090.000
MAP C/R/S123
start NC/NR/NS000
NC/NR/NS100100100
D min/max/mean0.000100.00042.954

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添付データ

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試料の構成要素

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全体 : neurospora crassa kinesin monomer

全体名称: neurospora crassa kinesin monomer
要素
  • 試料: neurospora crassa kinesin monomer
  • タンパク質・ペプチド: neurospora crassakinesin
  • タンパク質・ペプチド: tubulin

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超分子 #1000: neurospora crassa kinesin monomer

超分子名称: neurospora crassa kinesin monomer / タイプ: sample / ID: 1000 / 集合状態: monomer / Number unique components: 2

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分子 #1: neurospora crassakinesin

分子名称: neurospora crassakinesin / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / Name.synonym: molecular motor / コピー数: 1 / 集合状態: monomer / 組換発現: Yes / データベース: NCBI
由来(天然)生物種: Neurospora crassa (菌類) / 別称: neurospora

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分子 #2: tubulin

分子名称: tubulin / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / Name.synonym: microtubules / コピー数: 1 / 集合状態: hetero dimer / 組換発現: No / データベース: NCBI
由来(天然)生物種: Neurospora crassa (菌類) / 別称: neurospora / 組織: brain / 細胞: neuronal cells / 細胞中の位置: cytoplasm

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実験情報

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構造解析

手法ネガティブ染色法, クライオ電子顕微鏡法
解析らせん対称体再構成法
試料の集合状態filament

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試料調製

濃度0.5 mg/mL
緩衝液pH: 6.9
詳細: Pipes 20mM, 50 mM NaCl, 5mM mgcl,1mM Mg-ATP, 20um taxol.
染色タイプ: NEGATIVE / 詳細: ice-embedded
グリッド詳細: holey grids
凍結凍結剤: PROPANE / チャンバー内温度: 93 K / 装置: HOMEMADE PLUNGER / 詳細: Vitrification instrument: self made

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電子顕微鏡法

顕微鏡FEI/PHILIPS CM120T
撮影カテゴリ: FILM / フィルム・検出器のモデル: KODAK SO-163 FILM / デジタル化 - スキャナー: ZEISS SCAI / デジタル化 - サンプリング間隔: 21 µm / 実像数: 18 / 平均電子線量: 5 e/Å2 / ビット/ピクセル: 16
Tilt angle min0
Tilt angle max0
電子線加速電圧: 100 kV / 電子線源: LAB6
電子光学系照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 2.0 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 1.5 µm / 倍率(公称値): 37000
試料ステージ試料ホルダー: side entry / 試料ホルダーモデル: GATAN LIQUID NITROGEN

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画像解析

最終 再構成想定した対称性 - らせんパラメータ - 軸対称性: C1 (非対称)
アルゴリズム: OTHER / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 25.0 Å / 解像度の算出法: FSC 0.5 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: Phoelix, Suprim
詳細: Final maps from 36 averaged datasets = 18 helical tubes

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月:コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか? / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例:em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

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  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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