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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-1018 | |||||||||
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タイトル | The first step: activation of the Semliki Forest virus spike protein precursor causes a localized conformational change in the trimeric spike. | |||||||||
マップデータ | Semliki forest virus | |||||||||
試料 |
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生物種 | Semliki forest virus (セムリキ森林ウイルス) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 9.0 Å | |||||||||
データ登録者 | Fuller SD | |||||||||
引用 | ジャーナル: J Mol Biol / 年: 1998 タイトル: The first step: activation of the Semliki Forest virus spike protein precursor causes a localized conformational change in the trimeric spike. 著者: I Ferlenghi / B Gowen / F de Haas / E J Mancini / H Garoff / M Sjöberg / S D Fuller / 要旨: The structure of the particle formed by the SFVmSQL mutant of Semliki Forest virus (SFV) has been defined by cryo-electron microscopy and image reconstruction to a resolution of 21 A. The SQL ...The structure of the particle formed by the SFVmSQL mutant of Semliki Forest virus (SFV) has been defined by cryo-electron microscopy and image reconstruction to a resolution of 21 A. The SQL mutation blocks the cleavage of p62, the precursor of the spike proteins E2 and E3, which normally occurs in the trans-Golgi. The uncleaved spike protein is insensitive to the low pH treatment that triggers membrane fusion during entry of the wild-type virus. The conformation of the spike in the SFVmSQL particle should correspond to that of the inactive precursor found in the early stages of the secretory pathway. Comparison of this "precursor" structure with that of the mature, wild-type, virus allows visualization of the changes that lead to activation, the first step in the pathway toward fusion. We find that the conformational change in the spike is dramatic but localized. The projecting domains of the spikes are completely separated in the precursor and close to generate a cavity in the mature spike. E1, the fusion peptide-bearing protein, interacts only with the p62 in its own third of the trimer before cleavage and then collapses to form a trimer of heterotrimers (E1E2E3)3 surrounding the cavity, poised for the pH-induced conformational change that leads to fusion. The capsid, transmembrane regions and the spike skirts (thin layers of protein that link spikes above the membrane) remain unchanged by cleavage. Similarly, the interactions of the spikes with the nucleocapsid through the transmembrane domains remain constant. Hence, the interactions that lead to virus assembly are unaffected by the SFVmSQL mutation. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_1018.map.gz | 21.7 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-1018-v30.xml emd-1018.xml | 8.8 KB 8.8 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | 1018.gif | 45.1 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-1018 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-1018 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_1018_validation.pdf.gz | 286.8 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_1018_full_validation.pdf.gz | 285.9 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_1018_validation.xml.gz | 4.8 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-1018 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-1018 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_1018.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 31.3 MB / タイプ: IMAGE STORED AS SIGNED INTEGER (2 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | Semliki forest virus | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-試料の構成要素
-全体 : Semliki forest mSQL
全体 | 名称: Semliki forest mSQL |
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要素 |
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-超分子 #1000: Semliki forest mSQL
超分子 | 名称: Semliki forest mSQL / タイプ: sample / ID: 1000 / Number unique components: 1 |
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-超分子 #1: Semliki forest virus
超分子 | 名称: Semliki forest virus / タイプ: virus / ID: 1 / Name.synonym: semliki forest m SQL / 詳細: mSQL mutation. / NCBI-ID: 11033 / 生物種: Semliki forest virus / ウイルスタイプ: VIRION / ウイルス・単離状態: STRAIN / ウイルス・エンベロープ: Yes / ウイルス・中空状態: No / Syn species name: semliki forest m SQL |
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宿主 | 生物種: baby hamster kidney 21 cells (unknown) / 別称: VERTEBRATES |
ウイルス殻 | Shell ID: 1 / 名称: envelope / T番号(三角分割数): 4 |
ウイルス殻 | Shell ID: 2 / 名称: nucleo capsid / T番号(三角分割数): 4 |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
濃度 | 3 mg/mL |
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緩衝液 | pH: 7.4 / 詳細: tris(10mM) NaCL (100mM) ph 7.4 |
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 37 K / 装置: HOMEMADE PLUNGER 詳細: Vitrification instrument: EMBL plunger with warm humid air spray 手法: blot for 2 sec Graticule grids were used to maintain |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI/PHILIPS CM200FEG/ST |
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温度 | 平均: 105 K |
撮影 | カテゴリ: FILM / フィルム・検出器のモデル: KODAK SO-163 FILM / デジタル化 - スキャナー: PERKIN ELMER / デジタル化 - サンプリング間隔: 20 µm / 平均電子線量: 8 e/Å2 / カメラ長: 44 / Od range: 1 / ビット/ピクセル: 8 |
電子線 | 加速電圧: 200 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 7.628 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 0.975 µm / 倍率(公称値): 50000 |
試料ステージ | 試料ホルダー: eucentric / 試料ホルダーモデル: GATAN LIQUID NITROGEN |
-画像解析
CTF補正 | 詳細: ctf multiplication and summation of normalized reconstructions |
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最終 再構成 | 想定した対称性 - 点群: I (正20面体型対称) / アルゴリズム: OTHER / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 9.0 Å / 解像度の算出法: FSC 0.5 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: EMBL / 使用した粒子像数: 62 |
最終 角度割当 | 詳細: sufficient to give maximum inverse eigen value of 0.1 |