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基本情報
| 登録情報 | ![]() | |||||||||
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| タイトル | Template-free detection and classification of microsomal membrane bound complexes | |||||||||
マップデータ | Ribosome bound to fully assembled translocon complex | |||||||||
試料 |
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| 生物種 | ![]() | |||||||||
| 手法 | サブトモグラム平均法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 18.0 Å | |||||||||
データ登録者 | Martinez-Sanchez A / Lucic V | |||||||||
| 資金援助 | ドイツ, 1件
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引用 | ジャーナル: Nat Methods / 年: 2020タイトル: Template-free detection and classification of membrane-bound complexes in cryo-electron tomograms. 著者: Antonio Martinez-Sanchez / Zdravko Kochovski / Ulrike Laugks / Johannes Meyer Zum Alten Borgloh / Saikat Chakraborty / Stefan Pfeffer / Wolfgang Baumeister / Vladan Lučić / ![]() 要旨: With faithful sample preservation and direct imaging of fully hydrated biological material, cryo-electron tomography provides an accurate representation of molecular architecture of cells. However, ...With faithful sample preservation and direct imaging of fully hydrated biological material, cryo-electron tomography provides an accurate representation of molecular architecture of cells. However, detection and precise localization of macromolecular complexes within cellular environments is aggravated by the presence of many molecular species and molecular crowding. We developed a template-free image processing procedure for accurate tracing of complex networks of densities in cryo-electron tomograms, a comprehensive and automated detection of heterogeneous membrane-bound complexes and an unsupervised classification (PySeg). Applications to intact cells and isolated endoplasmic reticulum (ER) allowed us to detect and classify small protein complexes. This classification provided sufficiently homogeneous particle sets and initial references to allow subsequent de novo subtomogram averaging. Spatial distribution analysis showed that ER complexes have different localization patterns forming nanodomains. Therefore, this procedure allows a comprehensive detection and structural analysis of complexes in situ. | |||||||||
| 履歴 |
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構造の表示
| 構造ビューア | EMマップ: SurfView Molmil Jmol/JSmol |
|---|---|
| 添付画像 |
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ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
| マップデータ | emd_0074.map.gz | 6.2 MB | EMDBマップデータ形式 | |
|---|---|---|---|---|
| ヘッダ (付随情報) | emd-0074-v30.xml emd-0074.xml | 12.7 KB 12.7 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
| FSC (解像度算出) | emd_0074_fsc.xml | 4.4 KB | 表示 | FSCデータファイル |
| 画像 | emd_0074.png | 36.7 KB | ||
| その他 | emd_0074_half_map_1.map.gz emd_0074_half_map_2.map.gz | 4.9 MB 5 MB | ||
| アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-0074 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-0074 | HTTPS FTP |
-検証レポート
| 文書・要旨 | emd_0074_validation.pdf.gz | 416.9 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
|---|---|---|---|---|
| 文書・詳細版 | emd_0074_full_validation.pdf.gz | 416.1 KB | 表示 | |
| XML形式データ | emd_0074_validation.xml.gz | 10 KB | 表示 | |
| アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-0074 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-0074 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-
リンク
| EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
|---|---|
| 「今月の分子」の関連する項目 |
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マップ
| ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_0074.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 6.6 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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| 注釈 | Ribosome bound to fully assembled translocon complex | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 5.24 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 密度 |
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| 対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-ハーフマップ: Ribosome bound to fully assembled translocon complex, 2nd half map
| ファイル | emd_0074_half_map_1.map | ||||||||||||
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| 注釈 | Ribosome bound to fully assembled translocon complex, 2nd half map | ||||||||||||
| 投影像・断面図 |
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| 密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: Ribosome bound to fully assembled translocon complex, 1st half map
| ファイル | emd_0074_half_map_2.map | ||||||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 注釈 | Ribosome bound to fully assembled translocon complex, 1st half map | ||||||||||||
| 投影像・断面図 |
| ||||||||||||
| 密度ヒストグラム |
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試料の構成要素
-全体 : Mammalian ribosome bound to the native protein translocon on cani...
| 全体 | 名称: Mammalian ribosome bound to the native protein translocon on canine pancreatic ER vesicles |
|---|---|
| 要素 |
|
-超分子 #1: Mammalian ribosome bound to the native protein translocon on cani...
| 超分子 | 名称: Mammalian ribosome bound to the native protein translocon on canine pancreatic ER vesicles タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 |
|---|---|
| 由来(天然) | 生物種: ![]() |
-実験情報
-構造解析
| 手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
|---|---|
解析 | サブトモグラム平均法 |
| 試料の集合状態 | particle |
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試料調製
| 濃度 | 2.0 mg/mL |
|---|---|
| 緩衝液 | pH: 7.6 |
| 凍結 | 凍結剤: ETHANE-PROPANE / チャンバー内湿度: 70 % / 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 詳細: Blot 3 seconds before plunging.. |
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電子顕微鏡法
| 顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
|---|---|
| 撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 検出モード: COUNTING / 平均電子線量: 30.0 e/Å2 |
| 電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
| 電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD |
| 実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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画像解析
| 最終 再構成 | 想定した対称性 - 点群: C1 (非対称) / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 18.0 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 使用したサブトモグラム数: 1064 |
|---|---|
| 抽出 | トモグラム数: 55 / 使用した粒子像数: 64000 |
| 最終 角度割当 | タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD |
| FSC曲線 (解像度の算出) | ![]() |
-原子モデル構築 1
| 精密化 | プロトコル: AB INITIO MODEL |
|---|
ムービー
コントローラー
万見について





データ登録者
ドイツ, 1件
引用
























Z (Sec.)
Y (Row.)
X (Col.)




































FIELD EMISSION GUN

