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万見
- PDB-9p01: Cryo-EM structure of S. Mansoni p97 bound to ATPgS -

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基本情報

登録情報
データベース: PDB / ID: 9p01
タイトルCryo-EM structure of S. Mansoni p97 bound to ATPgS
要素vesicle-fusing ATPase
キーワードCHAPERONE / AAA-ATPase / Endoplasmic Reticulum / Hexamer
機能・相同性
機能・相同性情報


mitotic spindle disassembly / VCP-NPL4-UFD1 AAA ATPase complex / vesicle-fusing ATPase / retrograde protein transport, ER to cytosol / polyubiquitin modification-dependent protein binding / autophagosome maturation / ATP hydrolysis activity / ATP binding / nucleus / cytosol
類似検索 - 分子機能
AAA ATPase, CDC48 family / Cell division protein 48 (CDC48), N-terminal domain / : / CDC48, N-terminal subdomain / Cell division protein 48 (CDC48) N-terminal domain / CDC48, domain 2 / Cell division protein 48 (CDC48), domain 2 / Cell division protein 48 (CDC48) domain 2 / CDC48 domain 2-like superfamily / Aspartate decarboxylase-like domain superfamily ...AAA ATPase, CDC48 family / Cell division protein 48 (CDC48), N-terminal domain / : / CDC48, N-terminal subdomain / Cell division protein 48 (CDC48) N-terminal domain / CDC48, domain 2 / Cell division protein 48 (CDC48), domain 2 / Cell division protein 48 (CDC48) domain 2 / CDC48 domain 2-like superfamily / Aspartate decarboxylase-like domain superfamily / AAA ATPase, AAA+ lid domain / AAA+ lid domain / ATPase, AAA-type, conserved site / AAA-protein family signature. / ATPase family associated with various cellular activities (AAA) / ATPase, AAA-type, core / ATPases associated with a variety of cellular activities / AAA+ ATPase domain / P-loop containing nucleoside triphosphate hydrolase
類似検索 - ドメイン・相同性
PHOSPHOTHIOPHOSPHORIC ACID-ADENYLATE ESTER / vesicle-fusing ATPase
類似検索 - 構成要素
生物種Schistosoma mansoni (マンソン住血吸虫)
手法電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.2 Å
データ登録者Stephens, D.R. / Han, Y. / Chen, Z. / Collins, J.J. / Fung, H.Y.J.
資金援助 米国, 5件
組織認可番号国
Cancer Prevention and Research Institute of Texas (CPRIT)RP220582 米国
National Institutes of Health/National Institute Of Allergy and Infectious Diseases (NIH/NIAID)R01AI167967 米国
National Institutes of Health/National Institute Of Allergy and Infectious Diseases (NIH/NIAID)R01AI150776 米国
Welch FoundationI-1948-20240404 米国
Howard Hughes Medical Institute (HHMI) 米国
引用ジャーナル: Proc Natl Acad Sci U S A / 年: 2025
タイトル: A genome-scale drug discovery pipeline uncovers therapeutic targets and a unique p97 allosteric binding site in .
著者: Dylon R Stephens / Ho Yee Joyce Fung / Yan Han / Jue Liang / Zhe Chen / Joseph Ready / James J Collins /
要旨: Schistosomes are parasitic flatworms that infect more than 200 million people globally. However, there is a shortage of molecular tools that enable the discovery of potential drug targets within ...Schistosomes are parasitic flatworms that infect more than 200 million people globally. However, there is a shortage of molecular tools that enable the discovery of potential drug targets within schistosomes. Thus, praziquantel has remained the frontline treatment for schistosomiasis despite known liabilities. Here, we have conducted a genome-wide study in using the human druggable genome as a bioinformatic template to identify essential genes within schistosomes bearing similarity to catalogued drug targets. Then, we assessed these candidate targets in silico using a set of unbiased criteria to determine which possess ideal characteristics for a ready-made drug discovery campaign. Following this prioritization, we pursued a parasite p97 ortholog as a bona-fide drug target for the development of therapeutics to treat schistosomiasis. From this effort, we identified a covalent inhibitor series that kills schistosomes through an on-target killing mechanism by disrupting the ubiquitin proteasome system. Fascinatingly, these inhibitors induce a conformational change in the conserved D2 domain P-loop of schistosome p97 upon modification of Cys519. This conformational change reveals an allosteric binding site adjacent to the D2 domain active site reminiscent of the "DFG" flip in protein kinases. This allosteric binding site can potentially be utilized to generate new classes of species-selective p97 inhibitors. Furthermore, these studies provide a resource for the development of alternative therapeutics for schistosomiasis and a workflow to identify potential drug targets in similar systems with few available molecular tools.
履歴
登録2025年6月6日登録サイト: RCSB / 処理サイト: RCSB
改定 1.02025年8月13日Provider: repository / タイプ: Initial release
改定 1.12025年9月10日Group: Data collection / Database references / カテゴリ: citation / citation_author / em_admin
Item: _citation.journal_volume / _citation.page_first ..._citation.journal_volume / _citation.page_first / _citation.page_last / _citation.pdbx_database_id_PubMed / _citation.title / _citation_author.identifier_ORCID / _citation_author.name / _em_admin.last_update

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構造の表示

構造ビューア分子:
MolmilJmol/JSmol

ダウンロードとリンク

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集合体

登録構造単位
A: vesicle-fusing ATPase
B: vesicle-fusing ATPase
F: vesicle-fusing ATPase
E: vesicle-fusing ATPase
D: vesicle-fusing ATPase
C: vesicle-fusing ATPase
ヘテロ分子


分子量 (理論値)分子数
合計 (水以外)563,10430
ポリマ－556,5346
非ポリマー6,57124
水00
1


  • 登録構造と同一
  • 登録者・ソフトウェアが定義した集合体
  • 根拠: 電子顕微鏡法, not applicable
タイプ名称対称操作数
identity operation1_555x,y,z1

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要素

#1: タンパク質
vesicle-fusing ATPase


分子量: 92755.594 Da / 分子数: 6 / 由来タイプ: 組換発現 / 詳細: First 37 residues is the expression tags.
由来: (組換発現) Schistosoma mansoni (マンソン住血吸虫)
発現宿主: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌) / 参照: UniProt: G4M0P7, vesicle-fusing ATPase
#2: 化合物
ChemComp-AGS / PHOSPHOTHIOPHOSPHORIC ACID-ADENYLATE ESTER / ATP-GAMMA-S / ADENOSINE 5'-(3-THIOTRIPHOSPHATE) / ADENOSINE 5'-(GAMMA-THIOTRIPHOSPHATE) / ADENOSINE-5'-DIPHOSPHATE MONOTHIOPHOSPHATE


分子量: 523.247 Da / 分子数: 12 / 由来タイプ: 合成 / 式: C10H16N5O12P3S / タイプ: SUBJECT OF INVESTIGATION
コメント: ATP-gamma-S, エネルギー貯蔵分子類似体*YM
#3: 化合物
ChemComp-MG / MAGNESIUM ION


分子量: 24.305 Da / 分子数: 12 / 由来タイプ: 合成 / 式: Mg / タイプ: SUBJECT OF INVESTIGATION
研究の焦点であるリガンドがあるかY
Has protein modificationN

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実験情報

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実験

実験手法: 電子顕微鏡法
EM実験試料の集合状態: PARTICLE / ３次元再構成法: 単粒子再構成法

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試料調製

構成要素名称: Hexamer of p97 bound to 2 copies of ATPgS-Mg in each chain
タイプ: COMPLEX / Entity ID: #1 / 由来: RECOMBINANT
由来(天然)生物種: Schistosoma mansoni (マンソン住血吸虫)
由来(組換発現)生物種: Escherichia coli (大腸菌) / 株: BL21(DE3)
緩衝液pH: 7.4
詳細: 20mM Tris (pH 7.4), 180mM NaCl, 5mM MgCl2, and 1mM tris(2-carboxyethyl)phosphine (TCEP)
試料濃度: 1 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES
試料支持グリッドの材料: COPPER / グリッドのサイズ: 300 divisions/in. / グリッドのタイプ: Quantifoil R1.2/1.3
急速凍結装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE

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電子顕微鏡撮影

実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company
顕微鏡モデル: TFS KRIOS
電子銃電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM
電子レンズモード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス（公称値）: 2200 nm / 最小 デフォーカス（公称値）: 900 nm
撮影電子線照射量: 60 e/Å2
フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 BIOQUANTUM (6k x 4k)
電子光学装置エネルギーフィルター名称: GIF Bioquantum / エネルギーフィルタースリット幅: 10 eV

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解析

EMソフトウェア
ID名称バージョンカテゴリ
1cryoSPARC粒子像選択
2SerialEM画像取得
4cryoSPARCCTF補正
7UCSF ChimeraXモデルフィッティング
8Cootモデルフィッティング
9ISOLDEモデルフィッティング
11cryoSPARC初期オイラー角割当
12cryoSPARC最終オイラー角割当
13cryoSPARC分類
14cryoSPARC３次元再構成
15PHENIX1.20.1_4487モデル精密化
CTF補正タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION
粒子像の選択選択した粒子像数: 1681589
詳細: Template picking using templates generated from CB-5083 bound map.
対称性点対称性: C6 (6回回転対称)
3次元再構成解像度: 2.2 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 665490
詳細: Homogenous refinement with C6 symmetry, global and local CTF refinements. DeepEMhancer sharpened map was used for modeling.
対称性のタイプ: POINT
原子モデル構築空間: REAL
詳細: Initial fitting done in ChimeraX using apo structure, then manually built using ISODLE and coot. Refined in Phenix.
原子モデル構築PDB-ID: 9P00

9p00


Accession code: 9P00 / Source name: PDB / タイプ: experimental model
精密化最高解像度: 2.2 Å
立体化学のターゲット値: REAL-SPACE (WEIGHTED MAP SUM AT ATOM CENTERS)
拘束条件
Refine-IDタイプDev ideal数
ELECTRON MICROSCOPYf_bond_d0.00326064
ELECTRON MICROSCOPYf_angle_d0.4235238
ELECTRON MICROSCOPYf_dihedral_angle_d10.9173600
ELECTRON MICROSCOPYf_chiral_restr0.043984
ELECTRON MICROSCOPYf_plane_restr0.0044602

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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