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基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 8oir | ||||||||||||
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タイトル | 55S human mitochondrial ribosome with mtRF1 and P-site tRNA | ||||||||||||
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![]() | RIBOSOME / human mitochondrial ribosome / release factor mtRF1 / non-canonical stop codon | ||||||||||||
機能・相同性 | ![]() translation release factor activity / mitochondrial ribosome binding / rRNA import into mitochondrion / mitochondrial transcription / mitochondrial ribosome assembly / mitochondrial translational elongation / mitochondrial translational termination / microprocessor complex / translation release factor activity, codon nonspecific / translation release factor activity, codon specific ...translation release factor activity / mitochondrial ribosome binding / rRNA import into mitochondrion / mitochondrial transcription / mitochondrial ribosome assembly / mitochondrial translational elongation / mitochondrial translational termination / microprocessor complex / translation release factor activity, codon nonspecific / translation release factor activity, codon specific / Mitochondrial translation elongation / Mitochondrial translation termination / positive regulation of mitochondrial translation / Mitochondrial translation initiation / negative regulation of mitotic nuclear division / 加水分解酵素; エステル加水分解酵素; 5'-リン酸モノエステル産生エンドリボヌクレアーゼ / mitochondrial large ribosomal subunit / peptidyl-tRNA hydrolase / mitochondrial small ribosomal subunit / aminoacyl-tRNA hydrolase activity / mitochondrial ribosome / mitochondrial translation / positive regulation of proteolysis / ribosomal small subunit binding / anatomical structure morphogenesis / RNA processing / Mitochondrial protein degradation / rescue of stalled ribosome / cellular response to leukemia inhibitory factor / apoptotic signaling pathway / fibrillar center / double-stranded RNA binding / cell junction / regulation of translation / ribosomal small subunit assembly / small ribosomal subunit / small ribosomal subunit rRNA binding / 5S rRNA binding / large ribosomal subunit rRNA binding / nuclear membrane / cytosolic small ribosomal subunit / endonuclease activity / cell population proliferation / cytosolic large ribosomal subunit / mitochondrial inner membrane / tRNA binding / cytoplasmic translation / nuclear body / rRNA binding / negative regulation of translation / ribosome / structural constituent of ribosome / mitochondrial matrix / ribonucleoprotein complex / translation / cell cycle / protein domain specific binding / intracellular membrane-bounded organelle / nucleotide binding / mRNA binding / apoptotic process / synapse / nucleolus / GTP binding / positive regulation of DNA-templated transcription / mitochondrion / RNA binding / extracellular space / nucleoplasm / nucleus / plasma membrane / cytoplasm / cytosol 類似検索 - 分子機能 | ||||||||||||
生物種 | ![]() | ||||||||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.1 Å | ||||||||||||
![]() | Saurer, M. / Leibundgut, M. / Scaiola, A. / Schoenhut, T. / Ban, N. | ||||||||||||
資金援助 | ![]()
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![]() | ![]() タイトル: Molecular basis of translation termination at noncanonical stop codons in human mitochondria. 著者: Martin Saurer / Marc Leibundgut / Hima Priyanka Nadimpalli / Alain Scaiola / Tanja Schönhut / Richard G Lee / Stefan J Siira / Oliver Rackham / René Dreos / Tea Lenarčič / Eva Kummer / ...著者: Martin Saurer / Marc Leibundgut / Hima Priyanka Nadimpalli / Alain Scaiola / Tanja Schönhut / Richard G Lee / Stefan J Siira / Oliver Rackham / René Dreos / Tea Lenarčič / Eva Kummer / David Gatfield / Aleksandra Filipovska / Nenad Ban / ![]() ![]() ![]() 要旨: The genetic code that specifies the identity of amino acids incorporated into proteins during protein synthesis is almost universally conserved. Mitochondrial genomes feature deviations from the ...The genetic code that specifies the identity of amino acids incorporated into proteins during protein synthesis is almost universally conserved. Mitochondrial genomes feature deviations from the standard genetic code, including the reassignment of two arginine codons to stop codons. The protein required for translation termination at these noncanonical stop codons to release the newly synthesized polypeptides is not currently known. In this study, we used gene editing and ribosomal profiling in combination with cryo-electron microscopy to establish that mitochondrial release factor 1 (mtRF1) detects noncanonical stop codons in human mitochondria by a previously unknown mechanism of codon recognition. We discovered that binding of mtRF1 to the decoding center of the ribosome stabilizes a highly unusual conformation in the messenger RNA in which the ribosomal RNA participates in specific recognition of the noncanonical stop codons. | ||||||||||||
履歴 |
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構造の表示
構造ビューア | 分子: ![]() ![]() |
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ダウンロードとリンク
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ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | ![]() | 4.5 MB | 表示 | ![]() |
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PDB形式 | ![]() | 表示 | ![]() | |
PDBx/mmJSON形式 | ![]() | ツリー表示 | ![]() | |
その他 | ![]() |
-検証レポート
文書・要旨 | ![]() | 2.6 MB | 表示 | ![]() |
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文書・詳細版 | ![]() | 2.7 MB | 表示 | |
XML形式データ | ![]() | 386.3 KB | 表示 | |
CIF形式データ | ![]() | 640.6 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | ![]() 16897MC ![]() 8oinC ![]() 8oipC ![]() 8oiqC ![]() 8oisC ![]() 8oitC C: 同じ文献を引用 ( M: このデータのモデリングに利用したマップデータ |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性 ![]() |
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リンク
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集合体
登録構造単位 | ![]()
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1 |
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要素
+39S ribosomal protein ... , 48種, 53分子 B1B2B3B4B5B6BABBBCBDBEBFBGBHBIBJBKBLBMBNBOBPBQBRBSBTBUBVBWBX...
-RNA鎖 , 6種, 6分子 B7B8B9AAAGAI
#2: RNA鎖 | 分子量: 894.612 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
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#3: RNA鎖 | 分子量: 500727.125 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 詳細: NCBI Reference Sequence: NC_012920.1 added 3' GU (encoded on genome but not annotated as part of the 16S rRNA), N1437>U as in MT079070.1 由来: (天然) ![]() |
#4: RNA鎖 | 分子量: 22989.752 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 詳細: NCBI Reference Sequence: NC_012920.1 + aminoacylated CCA-end 由来: (天然) ![]() |
#56: RNA鎖 | 分子量: 306547.531 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 詳細: NCBI Reference Sequence: NC_012920.1 + one C at 3'-end (encoded but not annotated as part of the sequence), a A103>G and A791>G as found in e.g. GenBank: OM714795.1 由来: (天然) ![]() |
#62: RNA鎖 | 分子量: 22692.508 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 詳細: NCBI Reference Sequence: NC_012920.1 + aminoacylated CCA-end 由来: (天然) ![]() |
#64: RNA鎖 | 分子量: 7329.883 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 詳細: Sequence as observed in the cryo-EM density map. / 由来: (天然) ![]() |
-タンパク質 , 8種, 8分子 BeBfBgBsADAaAcAe
#35: タンパク質 | 分子量: 12292.333 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
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#36: タンパク質 | 分子量: 23674.203 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
#37: タンパク質 | 分子量: 25426.895 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
#48: タンパク質 | 分子量: 23352.633 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
#59: タンパク質 | 分子量: 22395.326 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
#82: タンパク質 | 分子量: 56258.391 Da / 分子数: 1 / Mutation: 311GGQ313 > AAQ / 由来タイプ: 組換発現 詳細: Human mitochondrial release factor 1 (mtRF1), containing a 311GGQ>AAQ mutation, a C-terminal linker (GGSGGSGGSGGSGGSGG) and a 3xFLAG-tag (DYKDHDGDYKDHDIDYKDDDDK), expressed from a pcDNA3.1(+) ...詳細: Human mitochondrial release factor 1 (mtRF1), containing a 311GGQ>AAQ mutation, a C-terminal linker (GGSGGSGGSGGSGGSGG) and a 3xFLAG-tag (DYKDHDGDYKDHDIDYKDDDDK), expressed from a pcDNA3.1(+) plasmid in HEK293 EBNA cells. 由来: (組換発現) ![]() ![]() |
#84: タンパク質 | 分子量: 13540.856 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
#86: タンパク質 | 分子量: 78648.547 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
+28S ribosomal protein ... , 27種, 27分子 ABACAEAFAHAJAKALAMANAOAPAQARASATAUAVAWAXAYAZAbAdAgAiAj
-非ポリマー , 9種, 418分子 ![](data/chem/img/K.gif)
![](data/chem/img/MG.gif)
![](data/chem/img/VAL.gif)
![](data/chem/img/ZN.gif)
![](data/chem/img/FS2.gif)
![](data/chem/img/MET.gif)
![](data/chem/img/ATP.gif)
![](data/chem/img/GDP.gif)
![](data/chem/img/HOH.gif)
![](data/chem/img/MG.gif)
![](data/chem/img/VAL.gif)
![](data/chem/img/ZN.gif)
![](data/chem/img/FS2.gif)
![](data/chem/img/MET.gif)
![](data/chem/img/ATP.gif)
![](data/chem/img/GDP.gif)
![](data/chem/img/HOH.gif)
#90: 化合物 | ChemComp-K / #91: 化合物 | ChemComp-MG / #92: 化合物 | ChemComp-VAL / | #93: 化合物 | #94: 化合物 | #95: 化合物 | ChemComp-MET / | #96: 化合物 | ChemComp-ATP / | #97: 化合物 | ChemComp-GDP / | #98: 水 | ChemComp-HOH / | |
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-詳細
研究の焦点であるリガンドがあるか | N |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
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試料調製
構成要素 | 名称: 55S human mitochondrial ribosome with mtRF1 and P-site tRNA タイプ: RIBOSOME 詳細: 55S human mitochondrial ribosome in complex with mtRF1(AAQ)-3xFLAG, human methionine-tRNA(Met), and an mRNA containing a non-canonical stop codon, purified from HEK293 EBNA cells. Entity ID: #1-#47, #49-#89 / 由来: NATURAL | ||||||||||||||||||||||||||||||
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分子量 |
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由来(天然) |
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由来(組換発現) | 生物種: ![]() | ||||||||||||||||||||||||||||||
緩衝液 | pH: 7.5 | ||||||||||||||||||||||||||||||
緩衝液成分 |
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試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES / 詳細: Affinity-purified 55S mitoribosome. | ||||||||||||||||||||||||||||||
試料支持 | グリッドの材料: COPPER / グリッドのタイプ: Quantifoil R2/2 | ||||||||||||||||||||||||||||||
急速凍結 | 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE-PROPANE / 湿度: 100 % / 凍結前の試料温度: 277.15 K |
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電子顕微鏡撮影
実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: ![]() |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 倍率(公称値): 81000 X / 最大 デフォーカス(公称値): 3000 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 600 nm / Cs: 2.7 mm / C2レンズ絞り径: 100 µm / アライメント法: COMA FREE |
試料ホルダ | 凍結剤: NITROGEN 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER |
撮影 | 電子線照射量: 60 e/Å2 / フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) / 撮影したグリッド数: 2 / 実像数: 43882 |
電子光学装置 | エネルギーフィルタースリット幅: 20 eV |
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解析
EMソフトウェア |
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画像処理 | 詳細: Micrographs were motion corrected and CTF parameters were estimated using Cryosparc. | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
粒子像の選択 | 選択した粒子像数: 5423665 詳細: Particles were picked with blob picker in Cryosparc. | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 3.1 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 41288 / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 | プロトコル: FLEXIBLE FIT / 空間: REAL | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 | 3D fitting-ID: 1
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