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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 7ae3 | ||||||
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タイトル | Cryo-EM structure of human RNA Polymerase III elongation complex 3 | ||||||
要素 |
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キーワード | TRANSCRIPTION / HUMAN / SHORT RNAs | ||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 snRNA transcription by RNA polymerase III / RNA Polymerase III Chain Elongation / RNA Polymerase III Transcription Termination / calcitonin gene-related peptide receptor activity / DNA/RNA hybrid binding / RPAP3/R2TP/prefoldin-like complex / regulation of transcription by RNA polymerase I / regulation of transcription by RNA polymerase III / DNA polymerase III complex / Cytosolic sensors of pathogen-associated DNA ...snRNA transcription by RNA polymerase III / RNA Polymerase III Chain Elongation / RNA Polymerase III Transcription Termination / calcitonin gene-related peptide receptor activity / DNA/RNA hybrid binding / RPAP3/R2TP/prefoldin-like complex / regulation of transcription by RNA polymerase I / regulation of transcription by RNA polymerase III / DNA polymerase III complex / Cytosolic sensors of pathogen-associated DNA / RNA Polymerase III Transcription Initiation From Type 1 Promoter / RNA Polymerase III Transcription Initiation From Type 2 Promoter / RNA Polymerase III Transcription Initiation From Type 3 Promoter / RNA Polymerase III Abortive And Retractive Initiation / positive regulation of innate immune response / Abortive elongation of HIV-1 transcript in the absence of Tat / nucleobase-containing compound metabolic process / MicroRNA (miRNA) biogenesis / FGFR2 alternative splicing / RNA Polymerase I Transcription Termination / Viral Messenger RNA Synthesis / Signaling by FGFR2 IIIa TM / RNA Pol II CTD phosphorylation and interaction with CE during HIV infection / RNA Pol II CTD phosphorylation and interaction with CE / Formation of the Early Elongation Complex / Formation of the HIV-1 Early Elongation Complex / termination of RNA polymerase III transcription / mRNA Capping / PIWI-interacting RNA (piRNA) biogenesis / HIV Transcription Initiation / RNA Polymerase II HIV Promoter Escape / Transcription of the HIV genome / RNA Polymerase II Promoter Escape / RNA Polymerase II Transcription Pre-Initiation And Promoter Opening / RNA Polymerase II Transcription Initiation / RNA Polymerase II Transcription Initiation And Promoter Clearance / transcription initiation at RNA polymerase III promoter / mRNA Splicing - Minor Pathway / RNA Polymerase I Transcription Initiation / Pausing and recovery of Tat-mediated HIV elongation / Tat-mediated HIV elongation arrest and recovery / transcription by RNA polymerase I / transcription by RNA polymerase III / Processing of Capped Intron-Containing Pre-mRNA / HIV elongation arrest and recovery / Pausing and recovery of HIV elongation / RNA polymerase II transcribes snRNA genes / neuropeptide signaling pathway / transcription elongation by RNA polymerase I / Tat-mediated elongation of the HIV-1 transcript / Formation of HIV-1 elongation complex containing HIV-1 Tat / RNA polymerase I complex / RNA polymerase III complex / Formation of HIV elongation complex in the absence of HIV Tat / RNA polymerase III activity / RNA polymerase II, core complex / tRNA transcription by RNA polymerase III / RNA polymerase I activity / RNA Polymerase II Transcription Elongation / RNA polymerase II activity / Formation of RNA Pol II elongation complex / RNA Polymerase II Pre-transcription Events / Inhibition of DNA recombination at telomere / positive regulation of interferon-beta production / mRNA Splicing - Major Pathway / acrosomal vesicle / RNA Polymerase I Promoter Escape / TP53 Regulates Transcription of DNA Repair Genes / protein-DNA complex / Transcriptional regulation by small RNAs / NoRC negatively regulates rRNA expression / B-WICH complex positively regulates rRNA expression / Transcription-Coupled Nucleotide Excision Repair (TC-NER) / ribonucleoside binding / Formation of TC-NER Pre-Incision Complex / fibrillar center / DNA-directed 5'-3' RNA polymerase activity / DNA-directed RNA polymerase / Activation of anterior HOX genes in hindbrain development during early embryogenesis / Dual incision in TC-NER / Gap-filling DNA repair synthesis and ligation in TC-NER / single-stranded DNA binding / 4 iron, 4 sulfur cluster binding / double-stranded DNA binding / defense response to virus / Estrogen-dependent gene expression / cell population proliferation / transcription by RNA polymerase II / nucleic acid binding / nuclear body / protein stabilization / protein dimerization activity / intracellular membrane-bounded organelle / innate immune response / nucleotide binding / centrosome / DNA-templated transcription / chromatin binding / magnesium ion binding / DNA binding 類似検索 - 分子機能 | ||||||
生物種 | Homo sapiens (ヒト) synthetic construct (人工物) | ||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.1 Å | ||||||
データ登録者 | Girbig, M. / Misiaszek, A.D. / Vorlaender, M.K. / Mueller, C.W. | ||||||
引用 | ジャーナル: Nat Struct Mol Biol / 年: 2021 タイトル: Cryo-EM structures of human RNA polymerase III in its unbound and transcribing states. 著者: Mathias Girbig / Agata D Misiaszek / Matthias K Vorländer / Aleix Lafita / Helga Grötsch / Florence Baudin / Alex Bateman / Christoph W Müller / 要旨: RNA polymerase III (Pol III) synthesizes transfer RNAs and other short, essential RNAs. Human Pol III misregulation is linked to tumor transformation, neurodegenerative and developmental disorders, ...RNA polymerase III (Pol III) synthesizes transfer RNAs and other short, essential RNAs. Human Pol III misregulation is linked to tumor transformation, neurodegenerative and developmental disorders, and increased sensitivity to viral infections. Here, we present cryo-electron microscopy structures at 2.8 to 3.3 Å resolution of transcribing and unbound human Pol III. We observe insertion of the TFIIS-like subunit RPC10 into the polymerase funnel, providing insights into how RPC10 triggers transcription termination. Our structures resolve elements absent from Saccharomyces cerevisiae Pol III such as the winged-helix domains of RPC5 and an iron-sulfur cluster, which tethers the heterotrimer subcomplex to the core. The cancer-associated RPC7α isoform binds the polymerase clamp, potentially interfering with Pol III inhibition by tumor suppressor MAF1, which may explain why overexpressed RPC7α enhances tumor transformation. Finally, the human Pol III structure allows mapping of disease-related mutations and may contribute to the development of inhibitors that selectively target Pol III for therapeutic interventions. | ||||||
履歴 |
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-構造の表示
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構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 7ae3.cif.gz | 972.4 KB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb7ae3.ent.gz | 772.8 KB | 表示 | PDB形式 |
PDBx/mmJSON形式 | 7ae3.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
文書・要旨 | 7ae3_validation.pdf.gz | 1.7 MB | 表示 | wwPDB検証レポート |
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文書・詳細版 | 7ae3_full_validation.pdf.gz | 1.7 MB | 表示 | |
XML形式データ | 7ae3_validation.xml.gz | 136.2 KB | 表示 | |
CIF形式データ | 7ae3_validation.cif.gz | 218.4 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/ae/7ae3 ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/ae/7ae3 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | 11738MC 7a6hC 7ae1C 7aeaC M: このデータのモデリングに利用したマップデータ C: 同じ文献を引用 (文献) |
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類似構造データ | |
電子顕微鏡画像生データ | EMPIAR-10697 (タイトル: Cryo-EM structures of human RNA Polymerase III Data size: 3.3 TB Data #1: LZW-TIFF compressed multiframe micrographs of human RNA Pol III EC [micrographs - multiframe] Data #2: Initially picked particles of human RNA Pol III EC [picked particles - single frame - processed] Data #3: Polished particles of human RNA Pol III EC (final reconstruction) [picked particles - single frame - processed] Data #4: LZW-TIFF compressed multiframe micrographs of human RNA Pol III apo [micrographs - multiframe] Data #5: Initially picked particles of human RNA Pol III apo [picked particles - single frame - processed] Data #6: Polished particles of human RNA Pol III apo (final reconstruction) [picked particles - single frame - processed]) |
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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-要素
-DNA-directed RNA polymerase III subunit ... , 10種, 10分子 ABDGIMNOPQ
#1: タンパク質 | 分子量: 155860.125 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: O14802, DNA-directed RNA polymerase |
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#2: タンパク質 | 分子量: 127953.891 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q9NW08, DNA-directed RNA polymerase |
#4: タンパク質 | 分子量: 16893.990 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: O75575 |
#7: タンパク質 | 分子量: 22938.846 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q9Y535 |
#9: タンパク質 | 分子量: 12354.104 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q9Y2Y1 |
#13: タンパク質 | 分子量: 80004.031 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q9NVU0 |
#14: タンパク質 | 分子量: 44471.875 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P05423 |
#15: タンパク質 | 分子量: 60692.555 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q9BUI4 |
#16: タンパク質 | 分子量: 35726.914 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q9H1D9 |
#17: タンパク質 | 分子量: 25953.510 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: O15318 |
-DNA-directed RNA polymerases I and III subunit ... , 2種, 2分子 CK
#3: タンパク質 | 分子量: 39301.672 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: O15160 |
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#11: タンパク質 | 分子量: 15259.222 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P0DPB6 |
-DNA-directed RNA polymerases I, II, and III subunit ... , 5種, 5分子 EFHJL
#5: タンパク質 | 分子量: 24584.223 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P19388 |
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#6: タンパク質 | 分子量: 14491.026 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P61218 |
#8: タンパク質 | 分子量: 17162.273 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P52434 |
#10: タンパク質 | 分子量: 7655.123 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P62875 |
#12: タンパク質 | 分子量: 7018.244 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P53803 |
-RNA鎖 , 1種, 1分子 R
#18: RNA鎖 | 分子量: 6084.713 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 由来: (合成) synthetic construct (人工物) |
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-DNA鎖 , 2種, 2分子 ST
#19: DNA鎖 | 分子量: 14102.053 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 由来: (合成) synthetic construct (人工物) |
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#20: DNA鎖 | 分子量: 14254.121 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 由来: (合成) synthetic construct (人工物) |
-非ポリマー , 3種, 9分子
#21: 化合物 | ChemComp-ZN / #22: 化合物 | ChemComp-SF4 / | #23: 化合物 | ChemComp-MG / | |
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-詳細
研究の焦点であるリガンドがあるか | Y |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 |
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分子量 | 値: 0.776 MDa / 実験値: NO | ||||||||||||||||||||||||
由来(天然) |
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由来(組換発現) | 生物種: synthetic construct (人工物) | ||||||||||||||||||||||||
緩衝液 | pH: 7.5 | ||||||||||||||||||||||||
緩衝液成分 |
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試料 | 濃度: 2 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES | ||||||||||||||||||||||||
急速凍結 | 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 100 % / 凍結前の試料温度: 277 K / 詳細: Wait time 10 s Blot force 4 Blot time 4 s |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 倍率(公称値): 130000 X / 最大 デフォーカス(公称値): 2000 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 750 nm / Cs: 2.7 mm / C2レンズ絞り径: 50 µm |
試料ホルダ | 凍結剤: NITROGEN 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER |
撮影 | 電子線照射量: 40.4 e/Å2 / 検出モード: COUNTING フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) |
-解析
ソフトウェア | 名称: UCSF ChimeraX / バージョン: 0.92/v8 / 分類: モデル構築 / URL: https://www.rbvi.ucsf.edu/chimerax/ / Os: Linux / タイプ: package | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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EMソフトウェア |
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CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
粒子像の選択 | 選択した粒子像数: 367717 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
対称性 | 点対称性: C1 (非対称) | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 3.1 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 30525 / 対称性のタイプ: POINT |