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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 6t15 | ||||||
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タイトル | The III2-IV(5B)1 respiratory supercomplex from S. cerevisiae | ||||||
要素 |
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キーワード | OXIDOREDUCTASE / CYTOCHROME C OXIDASE CYTOCHROME BC1 MITOCHONDRIA RESPIRATORY CHAIN SUPERCOMPLEX / ELECTRON TRANSPORT / OXIDOREDUCTASE-ELECTRON TRANSPORT COMPLEX | ||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 : / Complex III assembly / matrix side of mitochondrial inner membrane / protein processing involved in protein targeting to mitochondrion / mitochondrial cytochrome c oxidase assembly / Respiratory electron transport / mitochondrial respiratory chain complex III assembly / mitochondrial respirasome assembly / Mitochondrial protein degradation / : ...: / Complex III assembly / matrix side of mitochondrial inner membrane / protein processing involved in protein targeting to mitochondrion / mitochondrial cytochrome c oxidase assembly / Respiratory electron transport / mitochondrial respiratory chain complex III assembly / mitochondrial respirasome assembly / Mitochondrial protein degradation / : / : / : / cytochrome-c oxidase / quinol-cytochrome-c reductase / ubiquinol-cytochrome-c reductase activity / mitochondrial electron transport, cytochrome c to oxygen / cellular respiration / cytochrome-c oxidase activity / mitochondrial electron transport, ubiquinol to cytochrome c / mitochondrial crista / electron transport coupled proton transport / ATP synthesis coupled electron transport / enzyme regulator activity / aerobic respiration / nuclear periphery / proton transmembrane transport / mitochondrial membrane / positive regulation of protein-containing complex assembly / metalloendopeptidase activity / mitochondrial intermembrane space / 2 iron, 2 sulfur cluster binding / mitochondrial inner membrane / oxidoreductase activity / copper ion binding / heme binding / mitochondrion / proteolysis / zinc ion binding / membrane / metal ion binding / cytosol 類似検索 - 分子機能 | ||||||
生物種 | Saccharomyces cerevisiae S288C (パン酵母) Saccharomyces cerevisiae S288c (パン酵母) | ||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.29 Å | ||||||
データ登録者 | Marechal, A. / Pinotsis, N. / Hartley, A. | ||||||
資金援助 | 英国, 1件
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引用 | ジャーナル: Proc Natl Acad Sci U S A / 年: 2020 タイトル: Rcf2 revealed in cryo-EM structures of hypoxic isoforms of mature mitochondrial III-IV supercomplexes. 著者: Andrew M Hartley / Brigitte Meunier / Nikos Pinotsis / Amandine Maréchal / 要旨: The organization of the mitochondrial electron transport chain proteins into supercomplexes (SCs) is now undisputed; however, their assembly process, or the role of differential expression isoforms, ...The organization of the mitochondrial electron transport chain proteins into supercomplexes (SCs) is now undisputed; however, their assembly process, or the role of differential expression isoforms, remain to be determined. In , cytochrome oxidase (CIV) forms SCs of varying stoichiometry with cytochrome (CIII). Recent studies have revealed, in normoxic growth conditions, an interface made exclusively by Cox5A, the only yeast respiratory protein that exists as one of two isoforms depending on oxygen levels. Here we present the cryo-EM structures of the III-IV and III-IV SCs containing the hypoxic isoform Cox5B solved at 3.4 and 2.8 Å, respectively. We show that the change of isoform does not affect SC formation or activity, and that SC stoichiometry is dictated by the level of CIII/CIV biosynthesis. Comparison of the CIV- and CIV-containing SC structures highlighted few differences, found mainly in the region of Cox5. Additional density was revealed in all SCs, independent of the CIV isoform, in a pocket formed by Cox1, Cox3, Cox12, and Cox13, away from the CIII-CIV interface. In the CIV-containing hypoxic SCs, this could be confidently assigned to the hypoxia-induced gene 1 (Hig1) type 2 protein Rcf2. With conserved residues in mammalian Hig1 proteins and Cox3/Cox12/Cox13 orthologs, we propose that Hig1 type 2 proteins are stoichiometric subunits of CIV, at least when within a III-IV SC. | ||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
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構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 6t15.cif.gz | 1.1 MB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb6t15.ent.gz | 905.8 KB | 表示 | PDB形式 |
PDBx/mmJSON形式 | 6t15.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
文書・要旨 | 6t15_validation.pdf.gz | 2.9 MB | 表示 | wwPDB検証レポート |
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文書・詳細版 | 6t15_full_validation.pdf.gz | 3 MB | 表示 | |
XML形式データ | 6t15_validation.xml.gz | 160 KB | 表示 | |
CIF形式データ | 6t15_validation.cif.gz | 242.9 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/t1/6t15 ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/t1/6t15 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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-要素
-CYTOCHROME B-C1 COMPLEX SUBUNIT ... , 9種, 18分子 ALBMCNEPFQGRHSITJU
#1: タンパク質 | 分子量: 47459.270 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae S288C (パン酵母) 参照: UniProt: P07256 #2: タンパク質 | 分子量: 38751.918 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae S288C (パン酵母) 参照: UniProt: P07257 #3: タンパク質 | 分子量: 43686.590 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae S288C (パン酵母) 参照: UniProt: P00163 #5: タンパク質 | 分子量: 20122.955 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae S288C (パン酵母) 参照: UniProt: P08067, quinol-cytochrome-c reductase #6: タンパク質 | 分子量: 17276.074 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae S288C (パン酵母) 参照: UniProt: P00127 #7: タンパク質 | 分子量: 14583.755 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae S288C (パン酵母) 参照: UniProt: P00128 #8: タンパク質 | 分子量: 10987.511 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae S288C (パン酵母) 参照: UniProt: P08525 #9: タンパク質 | 分子量: 7485.334 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae S288C (パン酵母) 参照: UniProt: P22289 #10: タンパク質 | 分子量: 8602.913 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae S288C (パン酵母) 参照: UniProt: P37299 |
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-タンパク質 , 3種, 4分子 DOlm
#4: タンパク質 | 分子量: 27807.395 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae S288C (パン酵母) 参照: UniProt: P07143 #22: タンパク質 | | 分子量: 7461.718 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae S288C (パン酵母) 参照: UniProt: Q2V2P9 #23: タンパク質 | | 分子量: 25381.139 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae S288C (パン酵母) 参照: UniProt: P53721 |
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-CYTOCHROME C OXIDASE SUBUNIT ... , 9種, 9分子 abcdfgijk
#11: タンパク質 | 分子量: 58832.586 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae S288C (パン酵母) 参照: UniProt: P00401, cytochrome-c oxidase |
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#12: タンパク質 | 分子量: 26779.816 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae S288C (パン酵母) 参照: UniProt: P00410, cytochrome-c oxidase |
#13: タンパク質 | 分子量: 30383.582 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae S288C (パン酵母) 参照: UniProt: P00420, cytochrome-c oxidase |
#14: タンパク質 | 分子量: 14188.949 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae S288C (パン酵母) 参照: UniProt: P04037, cytochrome-c oxidase |
#16: タンパク質 | 分子量: 12641.998 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae S288C (パン酵母) 参照: UniProt: P00427, cytochrome-c oxidase |
#17: タンパク質 | 分子量: 6811.154 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae S288C (パン酵母) 参照: UniProt: P10174, cytochrome-c oxidase |
#19: タンパク質 | 分子量: 6471.684 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae S288C (パン酵母) 参照: UniProt: P07255, cytochrome-c oxidase |
#20: タンパク質 | 分子量: 9668.697 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae S288c (パン酵母) 参照: UniProt: Q01519, cytochrome-c oxidase |
#21: タンパク質 | 分子量: 15117.017 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Saccharomyces cerevisiae S288C (パン酵母) 遺伝子: COX13, YGL191W, G1341 / 発現宿主: Saccharomyces cerevisiae S288C (パン酵母) / Variant (発現宿主): W303-1B / 参照: UniProt: P32799, cytochrome-c oxidase |
-Cytochrome c oxidase ... , 2種, 2分子 eh
#15: タンパク質 | 分子量: 15325.436 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae S288C (パン酵母) 参照: UniProt: P00425, cytochrome-c oxidase |
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#18: タンパク質 | 分子量: 5737.735 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae S288c (パン酵母) 参照: UniProt: P04039, cytochrome-c oxidase |
-非ポリマー , 11種, 45分子
#24: 化合物 | ChemComp-PEF / #25: 化合物 | ChemComp-HEM / #26: 化合物 | ChemComp-CDL / #27: 化合物 | ChemComp-PCF / #28: 化合物 | #29: 化合物 | #30: 化合物 | ChemComp-CU / | #31: 化合物 | #32: 化合物 | ChemComp-MG / | #33: 化合物 | ChemComp-CUA / | #34: 化合物 | ChemComp-ZN / | |
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-詳細
研究の焦点であるリガンドがあるか | Y |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: The III2-IV(5B)1 respiratory supercomplex from S. cerevisiae タイプ: COMPLEX 詳細: A Delta-cox5a Delta-rox1 strain used for this complex that only expresses Cox5B Entity ID: #1-#23 / 由来: NATURAL |
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分子量 | 実験値: NO |
由来(天然) | 生物種: Saccharomyces cerevisiae S288C (パン酵母) |
緩衝液 | pH: 7.2 |
試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
急速凍結 | 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE 詳細: 3 microliter of sample applied to negatively glow discharged grid, blot force -10; blotting time 8.5 s |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD |
撮影 | 電子線照射量: 56.4 e/Å2 フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) |
画像スキャン | 動画フレーム数/画像: 40 |
-解析
EMソフトウェア |
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CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
対称性 | 点対称性: C1 (非対称) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 3.29 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 73042 / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 | B value: 80 / プロトコル: RIGID BODY FIT / 空間: REAL | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 | PDB-ID: 6HU9 |